化工儀器網
技術文章
針測定植物性食品中208種農殘及代謝物
閱讀：723 發(fā)布時間：2020-11-24前言：中國是農藥生產和使用大國，農藥廣泛用于農業(yè)生產中,，同時農藥濫用和不規(guī)范使用現(xiàn)象比較普遍,，所以在食品中農藥殘留情況也是比較突出。日常檢測中,，農殘檢測的任務也相當繁重,，當前我國對于農殘檢測的方法標準主要集中在GC、GCMS等,，隨著氣相色譜三重四極桿質譜的普及,，GC-MS/MS 的檢測方法以其高選擇性、高靈敏度,、高通量特點越來越受檢測工作者的歡迎,，為此農業(yè)部在2017年發(fā)布了《食品安家標準 植物源性食品中208種農藥及其代謝物殘留量的測定 氣相色譜-質譜聯(lián)用法》（征求意見稿）。賽默飛應用團隊基于此國標方法,，開發(fā)了應對不同基質中農殘前處理方式,，以及配套的儀器方法和數據處理方法，以滿足農殘檢測快速,、準確,、高通量的要求?；赒uEChERS前處理技術,，我們開發(fā)了上海青、大米,、花生油,、茶葉四種具有代表性的樣品基質的提取凈化方法，基于TSQ 9000的Time-SRM掃描方式建立了一針檢測208種農藥的儀器方法(Instrument Method),，依托 TraceFinder軟件開發(fā)了對應的數據處理方法(Master Method),。對樣品基質進行了不同濃度的加標回收測算，經過基質標準曲線定量計算,，大部分的化合物回收率在80-120%之間,，基質標準曲線濃度在0.01-0.2 mg/kg范圍內，所有化合物的線性相關系數均在0.99以上,，定量限都能做到0.01 mg/kg,。
2. 儀器氣相色譜-三重四極桿質譜儀TSQ 9000 (賽默飛世爾科技，美國),，Pesticides II 30 m×0.25 mm×0.25 µm with 5 m guard（PN：26RD142F）毛細管色譜柱,。
3. 主要試劑和材料 3.1 乙腈（色譜純） 3.2 正己烷（色譜純） 3.3 冰醋酸（分析純） 3.4 酸化乙腈（1:99）：取10 mL冰醋酸（3.3）加入到 990 mL乙腈（3.1）中，混勻 3.5 正己烷飽和的乙腈：取500 mL乙腈（3.1）,，往里加入正己烷（3.2）,，直到有明顯分層 3.6 QuEChERS鹽包1（PN：60105-333-P）：含4 g硫酸鎂,、1 g氯化鈉、1 g檸檬酸鈉,、0.5 g檸檬酸氫二鈉 3.7 QuEChERS鹽包2（PN：60105-335-P）：含6 g無水硫酸鎂,、1.5 g醋酸鈉 3.8 QuEChERS凈化管1（PN:60105-218-P）：內含 900 mg硫酸鎂、150 mg PSA及15 mg GCB的15 mL 塑料離心管 3.9 QuEChERS凈化管2（PN：60105-226）：內含 1200 mg硫酸鎂,、400 mg PSA、400 mg C18及400 mg GCB 的15 mL塑料離心管 3.10 QuEChERS凈化管3（PN：60105-225-P）：內含 1200 mg硫酸鎂,、400 mg PSA及400 mg C18的15 mL 塑料離心管
4 實驗部分 4.1 QuEChERS前處理方法根據不同的樣品基質類型,，前處理有如下四種基本流程： 4.1.1 上海青（適用于蔬菜、水果和食用菌類）稱取10 g已均質好的試樣（0.01 g）于50 mL塑料離心管中,，加入10mL乙腈（3.1）,，充分混勻后，放入-20℃冰箱冷凍10 min,，再加入4 g硫酸鎂,、1 g氯化鈉、1 g檸檬酸鈉,、0.5 g檸檬酸氫二鈉等鹽包（PN：60105-333-P）,，蓋上離心管蓋，劇烈震蕩1 min 后,，9000 r/min離心6 min,。吸取6 mL上清液到內含900 mg 硫酸鎂、150 mg PSA及15 mg GCB的15 mL塑料離心管中（PN: 60105-218-P）,渦旋混勻1 min, 9000 r/min離心 6 min,，吸取1 mL上清液于進樣瓶中,，待上機測定。
4.1.2 大米（適用于谷物,、油料和堅果類）稱取5 g已粉碎的試樣（0.01 g）于50 mL塑料離心管中,，加10 mL水渦旋混勻，靜置30 min,。加入10 mL 1%醋酸乙腈溶液（3.4）,，充分混勻后，放入-20℃冰箱冷凍10 min,，再加入6 g無水硫酸鎂,、1.5 g醋酸鈉等鹽包（PN：60105-335-P），蓋上離心管蓋,，劇烈震蕩1 min后 9000 r/min離心6 min,。吸取6 mL上清液加到內含1200 mg 硫酸鎂、400 mg PSA及400 mg C18的15 mL塑料離心管中（PN：60105-225-P）,，渦旋混勻1 min,。9000 r/min離心 6 min,，吸取1 mL上清液于進樣瓶中，待上機測定,。 4.1.3 普洱茶（適用于茶葉和香辛料類）稱取2 g已粉碎的試樣（0.01 g）于50 mL塑料離心管中,，加10 mL水渦旋混勻，靜置30 min,。加入10 mL 1%醋酸乙腈溶液（3.4）,，充分混勻后，放入-20℃冰箱冷凍10 min,，再加入6 g無水硫酸鎂,、1.5 g醋酸鈉等鹽包（PN：60105-335-P），蓋上離心管蓋,，劇烈震蕩 1 min后9000 r/min離心6 min,。吸取6 mL上清液加到內含 1200 mg硫酸鎂、400 mg PSA,、400 mg C18及400 mg GCB的15 mL塑料離心管中（PN：60105-226）,，渦旋混勻1 min。9000 r/min離心6 min,，吸取1 mL上清液于進樣瓶中,，待上機測定。 4.1.4 花生油（適用于食用油類）稱取2 g試樣（0.01 g）于50 mL塑料離心管中,，加入10 mL正己烷飽和的乙腈（3.5）,，劇烈震蕩1 min后 9000 r/min離心6 min。吸取乙腈層加到內含1200 mg硫酸鎂,、400 mg PSA及400 mg C18的15 mL塑料離心管中（PN：60105-225-P）,，渦旋混勻1 min。9000 r/min離心 6 min,，吸取1 mL上清液于進樣瓶中,，待上機測定。
4.2. 樣品基質溶液：選取空白樣品,，用（4.1）前處理方式得到的空白基質溶液,。
4.3. 標準溶液的配置 7.1 標準儲備液：在十萬分之一分析天平上稱取每種農藥單標化合物10 mg，加入10 mL相應的溶劑（根據不同的化合物加入丙酮,、甲苯或者乙腈）溶解,，配制成濃度為約1000 mg/L 的溶液。每種單個標準儲備液的濃度根據稱樣量和加入溶劑的體積計算得到,。所有單標儲備液在-20℃冰箱中冷凍保存,。單標儲備液的有效期為6 個月。 7.2 混合標準中間液：移取適量的單標儲備液，用乙腈稀釋,。中間標準儲備液的濃度為10.0 mg/mL,。中間標準儲備液在-20 ℃冰箱中冷凍保存。中間儲備液的有效期為3 個月,。 7.3 工作標準溶液：取適量的混合標準中間液,，以空白樣品基質液（6）依次稀釋成濃度為0.010, 0.020, 0.050, 0.100, 0.200 mg/L的工作標準溶液。
4.4 儀器方法 4.4.1氣相方法：柱溫箱：40 ℃保持1.5 min,，以25 ℃/min升至90 ℃,，保持1.5 min，再以25 ℃/min升至180 ℃,，保持1.5 min,，以 5 ℃/min升至 280 ℃，后以 10 ℃ /min 升溫到 300 ℃,，保持 5 min；SSL進樣口：溫度270 ℃,，進樣模式：不分流進樣,，不分流時間：1 min；載氣：恒流,，1.2 mL/min. 4.4.2質譜方法：傳輸線溫度：280 ℃,；離子源溫度為300 ℃；離子源：E I,；采集方式：Time-SRM,；分辨率：F W H M 0.7Da(Q1和Q3)；化合物離子對信息來源于Thermo農殘數據庫CDB以及AutoSRM,。 4.5 數據處理使用 Thermo Scientific™ TraceFinder軟件對數據進行采集,、處理和報告分析，該軟件可同時實現(xiàn)儀器控制,、方法開發(fā),、定量/ 定性分析以及報告編輯。此外,，TraceFinder 軟件可以根據你所需要的信息自定義報告模板,。