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GC-MS/MS法一針測定植物性食品中208種農(nóng)殘及代謝物
閱讀：606 發(fā)布時間：2020-9-15前言：中國是農(nóng)藥生產(chǎn)和使用大國,，農(nóng)藥廣泛用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，同時農(nóng)藥濫用和不 規(guī)范使用現(xiàn)象比較普遍,，所以在食品中農(nóng)藥殘留情況也是比較突出,。日常檢 測中，農(nóng)殘檢測的任務(wù)也相當(dāng)繁重,，當(dāng)前我國對于農(nóng)殘檢測的方法標(biāo)準(zhǔn)主要 集中在GC,、GCMS等，隨著氣相色譜三重四極桿質(zhì)譜的普及,，GC-MS/MS 的檢測方法以其高選擇性,、高靈敏度、高通量特點越來越受檢測工作者的歡 迎,，為此農(nóng)業(yè)部在2017年發(fā)布了《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中208種 農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測定 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法》（征求意見稿）,。賽 默飛應(yīng)用團(tuán)隊基于此國標(biāo)方法，開發(fā)了應(yīng)對不同基質(zhì)中農(nóng)殘前處理方式,，以 及配套的儀器方法和數(shù)據(jù)處理方法,，以滿足農(nóng)殘檢測快速、準(zhǔn)確、高通量的 要求,。
基于QuEChERS前處理技術(shù),，我們開發(fā)了上海青、大米,、花生油,、茶葉四 種具有代表性的樣品基質(zhì)的提取凈化方法，基于TSQ 9000的Time-SRM掃 描方式建立了一針檢測208種農(nóng)藥的儀器方法(Instrument Method),，依托 TraceFinder軟件開發(fā)了對應(yīng)的數(shù)據(jù)處理方法(Master Method),。對樣品基質(zhì)進(jìn) 行了不同濃度的加標(biāo)回收測算，經(jīng)過基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線定量計算,，大部分的化合 物回收率在80-120%之間,，基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度在0.01-0.2 mg/kg范圍內(nèi)，所有 化合物的線性相關(guān)系數(shù)均在0.99以上,，定量限都能做到0.01 mg/kg,。
2. 儀器 氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜儀TSQ 9000 (賽默飛世爾科 技，美國),，Pesticides II 30 m×0.25 mm×0.25 µm with 5 m guard（PN：26RD142F）毛細(xì)管色譜柱,。
3. 主要試劑和材料 3.1 乙腈（色譜純） 3.2 正己烷（色譜純） 3.3 冰醋酸（分析純） 3.4 酸化乙腈（1:99）：取10 mL冰醋酸（3.3）加入到 990 mL乙腈（3.1）中，混勻 3.5 正己烷飽和的乙腈：取500 mL乙腈（3.1）,，往里加 入正己烷（3.2）,，直到有明顯分層 3.6 QuEChERS鹽包1（PN：60105-333-P）：含4 g硫 酸鎂、1 g氯化鈉,、1 g檸檬酸鈉,、0.5 g檸檬酸氫二鈉 3.7 QuEChERS鹽包2（PN：60105-335-P）：含6 g無 水硫酸鎂、1.5 g醋酸鈉 3.8 QuEChERS凈化管1（PN:60105-218-P）：內(nèi)含 900 mg硫酸鎂,、150 mg PSA及15 mg GCB的15 mL 塑料離心管 3.9 QuEChERS凈化管2（PN：60105-226）：內(nèi)含 1200 mg硫酸鎂,、400 mg PSA、400 mg C18及400 mg GCB 的15 mL塑料離心管 3.10 QuEChERS凈化管3（PN：60105-225-P）：內(nèi)含 1200 mg硫酸鎂,、400 mg PSA及400 mg C18的15 mL 塑料離心管
4 實驗部分 4.1 QuEChERS前處理方法 根據(jù)不同的樣品基質(zhì)類型,，前處理有如下四種基本流程： 4.1.1 上海青（適用于蔬菜、水果和食用菌類） 稱取10 g已均質(zhì)好的試樣（至0.01 g）于50 mL塑 料離心管中,，加入10mL乙腈（3.1）,，充分混勻后， 放入-20℃冰箱冷凍10 min,，再加入4 g硫酸鎂、1 g氯化鈉,、1 g檸檬酸鈉,、0.5 g檸檬酸氫二鈉等鹽包 （PN：60105-333-P），蓋上離心管蓋，劇烈震蕩1 min 后,，9000 r/min離心6 min,。吸取6 mL上清液到內(nèi)含900 mg 硫酸鎂、150 mg PSA及15 mg GCB的15 mL塑料離心管 中（PN: 60105-218-P）,渦旋混勻1 min, 9000 r/min離心 6 min,，吸取1 mL上清液于進(jìn)樣瓶中,，待上機(jī)測定。
4.1.2 大米（適用于谷物,、油料和堅果類） 稱取5 g已粉碎的試樣（至0.01 g）于50 mL塑料離 心管中,，加10 mL水渦旋混勻，靜置30 min,。加入10 mL 1%醋酸乙腈溶液（3.4）,，充分混勻后，放入-20℃冰箱 冷凍10 min,，再加入6 g無水硫酸鎂,、1.5 g醋酸鈉等鹽包 （PN：60105-335-P），蓋上離心管蓋,，劇烈震蕩1 min后 9000 r/min離心6 min,。吸取6 mL上清液加到內(nèi)含1200 mg 硫酸鎂、400 mg PSA及400 mg C18的15 mL塑料離心管中 （PN：60105-225-P）,，渦旋混勻1 min,。9000 r/min離心 6 min，吸取1 mL上清液于進(jìn)樣瓶中,，待上機(jī)測定,。 4.1.3 普洱茶（適用于茶葉和香辛料類） 稱取2 g已粉碎的試樣（至0.01 g）于50 mL塑料離 心管中，加10 mL水渦旋混勻,，靜置30 min,。加入10 mL 1%醋酸乙腈溶液（3.4），充分混勻后,，放入-20℃冰 箱冷凍10 min,，再加入6 g無水硫酸鎂、1.5 g醋酸鈉等鹽 包（PN：60105-335-P）,，蓋上離心管蓋,，劇烈震蕩 1 min后9000 r/min離心6 min。吸取6 mL上清液加到內(nèi)含 1200 mg硫酸鎂,、400 mg PSA,、400 mg C18及400 mg GCB的15 mL塑料離心管中（PN：60105-226），渦旋混 勻1 min,。9000 r/min離心6 min,，吸取1 mL上清液于進(jìn)樣瓶 中,，待上機(jī)測定。 4.1.4 花生油（適用于食用油類） 稱取2 g試樣（至0.01 g）于50 mL塑料離心管中,， 加入10 mL正己烷飽和的乙腈（3.5）,，劇烈震蕩1 min后 9000 r/min離心6 min。吸取乙腈層加到內(nèi)含1200 mg硫 酸鎂,、400 mg PSA及400 mg C18的15 mL塑料離心管中 （PN：60105-225-P）,，渦旋混勻1 min。9000 r/min離心 6 min,，吸取1 mL上清液于進(jìn)樣瓶中,，待上機(jī)測定。
結(jié)論 ：本實驗采用QuEChERS前處理方案,，Thermo Fisher全新 一代三重四極桿質(zhì)譜TSQ 9000,，同時配備Pesticide II色譜 柱分離，在Time-SRM的掃描方式下,，讓儀器方法管理更 加智能方便,，使208種農(nóng)藥及代謝物在36min內(nèi)一針完成 分析，基于TraceFinder軟件一站式的數(shù)據(jù)處理,，一站式完 成208種農(nóng)殘的全流程分析檢測,。該實驗室方案具有前處 理流程簡單、快速,、準(zhǔn)確,、有效，儀器操作簡便,，方法性 能具有靈敏度和出色的穩(wěn)定性的特點,，*新 國標(biāo)對于農(nóng)殘檢測的要求。