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摘要：本應(yīng)用簡報介紹了使用 Agilent 1260 Infinity II 液相色譜與 Agilent Ultivo LC/TQ 的聯(lián)用系統(tǒng)分析蜂蜜樣品中皮克級的極低含量氯霉素 (CAP),。此方法采用 Agilent Ultivo LC/TQ 開發(fā)，盡管該系統(tǒng)體積小巧,，但結(jié)果毫不遜色,。此應(yīng)用是食品行業(yè)中蜂蜜生產(chǎn)、加工和商業(yè)化樣品常規(guī)檢測的理想選擇,，也十分適合用于學(xué)術(shù)研究目的,。使用基于液液萃取 (LLE) 的簡單樣品前處理方法，能夠成功實現(xiàn)基質(zhì)中 50 ppt 的定量限 (LOQ),。

 

前言： CAP 是一種能夠抑制蛋白質(zhì)合成的廣譜抗生素,，長期接觸會導(dǎo)致罕見且嚴重的血液疾病（再生障礙性貧血）以及骨髓損傷,。由于 CAP 對人體具有明顯的毒性作用,，因此食品中的含量不得高于 0.3 ppb 的低性能要求限值 (MRPL)[1,2]。實驗部分本研究采用以下溶劑：乙腈（Honeywell,， LC/MS,，貨號 34967）；甲醇（Honeywell,， LC/MS,，貨號 34966）,；水（Millipore， Milli-Q）,；乙酸乙酯（分析純，Rankem）,；氯霉素（安捷倫科技公司,，貨號 5091- 0591）。CAP 的所有工作稀釋液均采用 100% 甲醇配制,。圖 1. CAP 和氘代 CAP HO HO H O O –O + N N Cl Cl HO HO H D D D D D O O –O + N N Cl Cl 氯霉素 D5-氯霉素三重四極桿 LC/MS 系統(tǒng)是美國,、歐盟、 FSSAI 和其他國家/地區(qū)用于確認蜂蜜中 CAP 的金標準,。本應(yīng)用采用新款三重四極桿 LC/MS 系統(tǒng) Ultivo LC/TQ,。使用 Ultivo LC/TQ 獲得的靈敏度優(yōu)于歐盟食品法規(guī)規(guī)定的 MRPL。此工作流程僅使用 LLE,，而傳統(tǒng)方法需要結(jié)合 LLE 和固相萃取 (SPE),。由于省去了 SPE 步驟，我們實現(xiàn)了一種簡單,、省時的高性價比解決方案（圖 2）[3,4,5],。通過采用結(jié)構(gòu)相似的 CAP-d5 作為內(nèi)標以減少變異，這一基于 Ultivo LC/TQ 的解決方案展現(xiàn)出了優(yōu)異的特異性,、線性和穩(wěn)定性,，能夠提供可靠的結(jié)果。

 

結(jié)果與討論由于規(guī)定的 MRPL 為 300 ppt,，大多數(shù)分析實驗室普遍將 100 ppt 設(shè)置為常規(guī) LOQ,。所提出的方法的檢測限 (LOD) 為 25 ppt。但是,，考慮到蜂蜜產(chǎn)品的多樣性,，建議的 LOQ 為 50 ppt。圖 3 的 MRM 色譜圖展示了稀釋劑空白,、LOD 和 LOQ,。此外，通過進樣各種濃度的 CAP 稀釋液,，獲得了可重現(xiàn)的洗脫曲線,，如圖 4 所示。表 2 顯示了六次重復(fù)測定獲得的 CAP 濃度計算值的變異系數(shù) (CV%) 數(shù)據(jù),。