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分析單端孢霉烯,、霉菌毒素和玉米烯醇的實驗方法
閱讀:724 發(fā)布時間:2020-4-26色譜流動相的制備: 1 M乙酸銨溶液:稱取77 g乙酸銨,溶于1 L HPLC級的水中,。 流動相A:在1 L水 (HPLC級) 中加入5 mL 1 M乙酸銨溶液,。 流動相B:在1 L甲醇 (HPLC級) 中加入5 mL 1 M乙酸銨溶液
樣品制備 基于Berthiller等人提出的方法[1]: 1.稱量10 g勻漿的樣品; 2.加入5 µL濃度100 µg/mL的ZAN的乙腈溶液,; 3.加入40 mL乙腈 / 水(84 / 16),; 4.在自動振搖器以180 r/min的速度振搖提取90 min; 5.過濾提取液(S&S折疊過濾器, 595 ½, Whatman Schleicher & Schuell); 6.轉移8 mL提取液到樣品管中,; 7.將MycoSep226#和227# (Romer實驗室)推入樣品管(推薦使用226#,,極性適應范圍寬,但HPLC進樣 4~5次后,,應用流動相B相沖洗色譜柱10 min,;若使用227#,ZON會滯留在色譜柱上,且NIV的回收率也 較低),; 8.將4 mL經(jīng)過純化的提取液移入樣品管,; 9.N2 流保護下,50 ℃溫和加熱揮干溶劑,; 10.將殘留物溶于1 mL色譜流動相A相中,,渦流混合均勻; 11.0.22 µm濾膜(Millipore)過濾后,,備用,。
色譜分離條件 Agilent 1100 系統(tǒng):G1312A二元泵系統(tǒng)、G1367A型自動進樣器,、柱溫箱,。 色譜柱:Thermo Electron Aquasil,C18柱,, 150 mm×4.6 mm,,3 µm。 流動相:A相—水 + 5 mM 甲酸銨,;B相—甲醇 + 5 mM 甲酸銨
MS/MS檢測: API 3200™或3200 QTRAP® LC-MS/MS液質分析系統(tǒng),。TurboIonSpray® 離子源,MRM掃描方式,。 Period 1 (0~5 min):負離子模式: