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AB液質(zhì)聯(lián)用儀分析孔雀石綠與相關(guān)的三苯甲烷類染料的實(shí)驗(yàn)方法
閱讀：728 發(fā)布時(shí)間：2019-9-13化學(xué)試劑 MG (孔雀石綠) LMG (隱色孔雀石綠) C23H25N2 CAS: 2437-29-8 C23H26N2 CAS: 129-73-7 BG (亮綠) CV (結(jié)晶紫) C27H33N2 CAS: 633-03-4 C25H30N3 CAS: 548-62-9 建議的內(nèi)標(biāo)：D5-LMG。
AB液質(zhì)聯(lián)用儀色譜分離流動(dòng)相的制備： 1 M乙酸銨溶液：溶解77 g甲酸銨于1 L HPLC級(jí)的水中,。 流動(dòng)相A：在1 L HPLC級(jí)的水中,，加入1 mL甲酸，10 mL 1 M乙酸銨溶液,。 流動(dòng)相B：在100 mL水中,，加入1 mL甲酸，10 mL乙酸銨溶液,，混勻后,，用HPLC級(jí)的乙腈稀釋到1 L。
樣品制備（魚,、水產(chǎn)品） 基于Bergwerff等人提出的方法[1]： 1．將2 mL pH=3.0的Mcllvaine溶液,、100 mL 1 M的p-TSA,、50 mL的N,N,N,,N,-四甲基-1,4-苯乙烯二胺的甲 醇溶液(1 mg/mL)進(jìn)行混合； 2．加入2 g勻漿的樣品于50 mL螺絲加蓋的聚丙烯管中,； 3．渦旋混合,； 4．加入12 mL乙腈； 5．振搖15 min,； 6．15 ℃下,，3400 r/min離心5 min； 7．加入pH=6.0的Mcllvaine溶液,； 8．加入12 mL乙腈,； 9．振搖15 min； 10．15 ℃下,，3400 r/min離心5 min,； 11．合并上清液；12．加入6 mL 二氯甲烷,； 13．15 ℃下,，3400 r/min離心5 min； 14．有機(jī)相進(jìn)行固相萃取,。
基于Effkemann等人提出的方法[2]： 1．稱量2 g勻漿過(guò)的魚肉組織,； 2．加入100 µL內(nèi)標(biāo)溶液(D5-LMG，1 µg/mL),； 3．加入900 µL水,； 4．加入2 mL鹽酸羥胺溶液(5 g/L)； 5．振搖并放置10 min,； 6．加入8 mL乙腈,； 7．振搖10 min； 8．4 ℃下,，3000 r/min離心5 min,； 9．將上清液吸入樣品，備用,。 注意：新鮮的魚肉提取后,，應(yīng)在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)完成分析，以防止孔雀石綠,、隱色孔雀石綠的降解,。
色譜分離條件 Agilent 1100 系統(tǒng)：G1312A二元泵系統(tǒng)、G1367A型自動(dòng)進(jìn)樣器,、柱溫箱,。 AB液質(zhì)聯(lián)用儀色譜柱：Phenomenex Synergi Max-RP反相柱，50 mm×2 mm，4 µｍ,，80 Å,。 流動(dòng)相：A相—水 + 0.1%甲酸 + 10 mM 乙酸銨；B相—水 / 乙腈(10 / 90) + 0.1%甲酸 + 10 mM 乙酸銨,。 梯度設(shè)置：
