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賽默飛氣相色譜針對奶粉中香蘭素和乙基香蘭素的測定
閱讀：568 發(fā)布時間：2019-7-16摘要
以二氯甲烷為溶劑,，提取奶粉中的香蘭素和乙基香蘭素，經(jīng)分散固相萃 取方法凈化后,，用Trace1310氣相色譜儀測定,，外標法定量，線性良好,，回收 率和重現(xiàn)性均滿足分析要求,。
引言
香蘭素（vanillin），又叫香草醛,，學名3-甲氧基-4-羥基ben甲醛,；乙基 香蘭素（ethyl vanillin），學名3-乙氧基-4-羥基ben甲醛,。兩者均為白色或微 黃色結(jié)晶粉末,，微溶于水，具有香莢蘭香氣及濃郁的奶香,，是重要的食品添 加劑,，廣泛用作食品、飲料以及日化用品等的增香劑。但是,，大劑量使用香 蘭素等香料將有害健康,。根據(jù)《食品安全國家標準食品添加劑使用規(guī)定》 GB2760-2011要求，凡使用范圍涵蓋0至6個月嬰幼兒配方食品不得添加任何 食用香料,。2012年7月有報道稱,，幾大洋品牌的I段奶粉被檢出添加了國家禁 止的香蘭素，因此需要建立相關(guān)檢測方法對奶粉中的香蘭素進行檢測,。
目前關(guān)于香蘭素和乙基香蘭素的測定方法主要有分光光度法,、電化學 法、液相色譜法,、氣相色譜和氣質(zhì)聯(lián)用法,，由于HPLC法對樣品凈化程度 要求不高，因此樣品預處理方面的研究較少,。本方法采用二氯甲烷提取,，分 散固相萃取凈化，建立同時測定嬰幼兒配方奶粉中香蘭素和乙基香蘭素含量 的氣相色譜法,。
實驗部分
主要儀器設(shè)備與試劑
儀器：氣相色譜儀,，Trace 1310，美國ThermoFisher,。
試劑：二氯甲烷,，色譜純；氯化鈉,，分析純,； Cleanert C18固體吸附劑；香蘭素和乙基香蘭素標準品,。
樣品前處理方法
稱取5 g奶粉（到0.01 g）于100 mL容量瓶中,， 加入20 mL水，振蕩,，使成為均勻奶液,，加水定容至刻 度,，搖勻,。用移液管移取5 mL奶液于15 mL離心管中，加 入2 g NaCl,，5 mL二氯甲烷,，蓋好蓋子振蕩提取5 min，靜 置2 min,，然后以10000 rpm離心5 min,，小心全部移取下 層有機層，過無水硫酸鈉后，定容至5 mL,，加入150 mg C18吸附劑,，渦旋1 min，靜置后吸取上層清液過0.2 µm濾 膜,，待氣相色譜儀測定,。
樣品的測定
上述得到的樣品溶液直接進樣，氣相色譜儀檢測,，外 標法定量,。儀器參數(shù)設(shè)置見表1.
結(jié)果與討論
標準樣品的色譜圖和線性
標準樣品中香蘭素和乙基香蘭素的色譜圖如圖1 所示。用標準樣品配制成濃度分別為1 µg/mL, 2.5 µg/ mL,10 µg/mL, 35 µg/mL, 50 µg/mL的系列標準工作液,， 進樣1 µL,，然后按照以上所述的測定方法進行GC-FID測 定，以標準物質(zhì)的濃度為橫坐標,，以各標準物質(zhì)的峰面積 為縱坐標,，繪制標準曲線，得到香蘭素和乙基香蘭素的標 準工作曲線如圖2,。香蘭素和乙基香蘭素的相關(guān)系數(shù)分別 為0.9980和0.9991,。
方法的精密度和回收率
對香蘭素和乙基香蘭素的1 µg/mL，2 µg/mL,，10 µg/ mL三個水平加標樣品分別進行了3次測定,，平均回收 率和相對標準偏差列于表2中。樣品加標的色譜圖見圖 3,。選擇1 µg/mL的標準溶液,，以噪聲的3倍計算，本方 法中香蘭素和乙基香蘭素的檢測限分別為0.33 µg/mL和 0.25 µg/mL,。
對市售4個奶粉樣品中香蘭素和乙基香蘭素的測定
按上述前處理方法測定了4個奶粉樣品中的香蘭素 和乙基香蘭素含量,，其中樣品1為I段奶粉，為禁止添加 香蘭素和乙基香蘭素,。樣品2,、3、4為III段奶粉,，可以添 加香蘭素和乙基香蘭素,，允許添加量為5 mg/100 mL， 即50 µg/mL,。其中100 mL以即食食品計,，即沖調(diào)好的 奶液，按照奶粉沖調(diào)說明一般為每100 mL水加入14 g奶 粉,。樣品中的香蘭素和乙基香蘭素的含量采用外標法定 量,，配制一系列標準工作溶液,，以濃度為橫坐標，峰面 積為縱坐標繪制標準曲線,，定量結(jié)果按公式（1）換算為 奶液中的含量,，列于表3中。
C=Ci×Vi×14 g Ms×100 mL
其中：C 為按照沖調(diào)說明沖調(diào)好的奶液中的含量,， 單位為 µg/mL Ci 為經(jīng)前處理后終定容液中的含量,，單位 為 µg/mL Vi 為前處理后終定容液的體積，單位為mL Ms 為終定容液中包含的奶粉的質(zhì)量,，單位 為g,，本方法中為0.25 g
結(jié)論
建立了嬰幼兒配方奶粉中香蘭素和乙基香蘭素的氣 相色譜測定方法。本方法步驟簡單,、快捷,，精密度高， 具有較好的分離度,，雜質(zhì)干擾少,，測定結(jié)果準確可靠， 靈敏度高,，是測定嬰幼兒配方奶粉中香蘭素,、乙基香蘭 素的較好的方法。