抗原修復鍋Antigen Retriever

    
免疫組織化學方法成功與否關鍵在于抗原決定簇的保存和暴露.組織經甲醛固定.甲醛的醛基與

抗原蛋白的氨基交聯(lián),使決定簇的構像改變.從而影響檢測蛋白表達.要充分暴露抗原決定簇,，通

常用到抗原修復鍋。強適于甲醛固定的組織，經石蠟包

埋后進行免疫染色前的處理，配合特別的抗原修復緩沖液確保你得到搞質量的免疫染色效

果。

· 一次可以在6中不同緩沖液中運行，進行抗原暴露

· 僅暴露抗原決定簇,，不損傷組織的形態(tài)

· 實驗結果穩(wěn)定,，結果重現性高

· 系列的玻片在獨立環(huán)境中經過處理

抗原修復鍋怎樣工作？

    看上去，抗原修復鍋似我們烹飪的高壓鍋,。這是一款功能*的“高壓鍋”,，主要用于抗原暴露

的工作，主要的工作原理也是裝玻片的幾個分室可以達到高溫(>120°C)高壓,。靈敏的傳感控制

器來保持一定的溫度和壓力及一定的時間,，這些工作參數都是經過嚴格的科學實驗得到的數

據。當達到需要的溫度,，抗原修復鍋會在該溫度下保持幾分鐘,，之后鍋內玻片被冷卻2個多小

時，特殊設材質的內鍋體控制了鍋和玻片的冷卻速度,。 

誰是受益人,？

    研究病理的實驗室，那里需要高質量染色照片（用來發(fā)表）的

    缺乏技術人員的實驗室,，學生和博士后均可以處理玻片進行組織染色,，且不需要很多時間來摸索

    小型病理實驗室，每天處理的玻片數量有限

怎樣選擇一種緩沖液（Buffer）

    如果你已經知道哪種緩沖液用在微波的某種組織抗原修復,，那么用抗原修復鍋時,，這種緩沖

液也同時適用的機會很大。我們提供四種即用型緩沖液R-Buffer A/B/C/U,，同時也提供同種更加

溫和的組織處理緩沖液,，我們稱之G系列，R-Buffer AG/BG/CG/UG,。

    
選擇Buffer,，主要考慮以下兩點：

1.  抗原的自然特性以及所選擇的抗體

抗原自身特性和抗原的位置都是首要考慮。我們建議你剛開始的時候選擇抗原表達環(huán)境的

適Buffer,。以下是經驗供大家參考：

Most of the nuclear antigens (apoptosis-related, survival-related, proliferation-r

elated) R: Buffer A (or AG).

Cell adhesion molecules, cell membrane antigens (extracellular domain) R: Buffer A (or AG)

Cytoskeleton and cytoskeleton-associated molecules – R:Buffer A (or AG)

Intracellular domain of some adhesion molecules and surface receptors – R:Buffer B (or BG)

Intracellular domain of some adhesion molecules and surface receptors – R:Buffer C (or CG)

Most of antibodies raised against a linear peptide – R: Buffer U (or UG)

2.  固定液以及固定程度

建議的組織切片的抗原修復處理是一種針對普通的適化狀態(tài)切片,。如果用來切片的組織塊沒有

充分固定，或者過固定（留在福爾馬林溶液中時間過長）,，或者用了其它的固定液,，那么，處

理組織切片的流程方案需要重新修訂,，便利的辦法是選擇使用G系列緩沖液,。對于過固定的

材料一般推薦用U buffer，或者在同一Buffer里面增加循環(huán)

抗原修復鍋技術參數：

使用抗原修復鍋進行染色的效果示例

1.福爾馬林固定,，石蠟包埋,，人乙狀結腸組織切片，經抗原修復鍋進行抗原暴露,，R-

Buffer C (pH 6.0),，組織玻片降溫過夜,，抗體MIB-1，抗原Ki-67,，R-Detect HRP系統(tǒng)染色

2. .福爾馬林固定,，石蠟包埋，人乙狀結腸組織切片,，經抗原修復鍋進行抗原暴露,，R-

Buffer A (pH 8.1)，組織玻片降溫過夜,，抗體#4B11,，抗原CD8 (cell membrane)，R-

Detect HRP系統(tǒng)染色.

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