【產(chǎn)品名稱】布尼亞病毒（BV）PCR試劑盒

【包裝規(guī)格】 50T/盒實時熒光PCR法

適用于檢測，可用于臨床布尼亞病毒（BV）感染的輔助診斷,，但不作確診使用,。

利用相應儀器對 PCR 過程進行實時監(jiān)測，實現(xiàn)檢測結(jié)果的定性分析,，用于臨床上對可疑感染者的病原 學診斷,。

反應液、酶液,、陽性質(zhì)控品,、陰性質(zhì)控品。

-20℃±5℃,，避光保存,、運輸、反復凍融次數(shù)不超過 5 次,，有效期 12 個月,。
ABI ,、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler,、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀,。上述標本短期內(nèi)可保存于-20℃,，長期保存可置-70℃，但不能超過 6 個月,，標本運送應采用 2~8℃冰袋運輸,， 嚴禁反復凍融。

1

1.1樣本前處理 血液,、體液和棉拭子樣本取 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中,。 核酸提取 推薦采用核酸提qu或純化試劑（磁珠法或離心柱法）進行核酸提qu， 請按照試劑說明書進行操作,。

試劑RP

將混合好的測試反應液分裝到 PCR 反應管中,，21μL/管。

3.加樣（樣本處理區(qū)） 將步驟 1 提取的核酸,、陽性質(zhì)控品,、陰性質(zhì)控品各取 4μL，分別加入相應的反應管中,，蓋好管蓋,，混勻，短 暫離心,。

4.1

4.2

4.3推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置：

2.結(jié)果分析判定 結(jié)果分析條件設(shè)定 設(shè)置 Baseline 和 Threshold：一般直接按機器自動分析的結(jié)果分析,，當曲線出現(xiàn)整體傾斜時，根據(jù)分析后圖像 調(diào)節(jié) Baseline 的 start 值（一般可在 3~15 范圍內(nèi)調(diào)節(jié)）,、stop 值（一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié)）,，以及 Threshold 的 Value 值（上下拖動閾值線至高于陰性對照），重新分析結(jié)果,。結(jié)果判斷 陽性：檢測通道 Ct 值≤35,，且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線； 可疑：檢測通道 35值≤38,，建議重復檢測,，如果檢測通道仍為 35值≤38，且曲線有明顯的增長曲線,， 判定為陽性,，否則為陰性； 陰性：樣本檢測結(jié)果 Ct 值>38 或無 Ct 值,。

4.檢測方法的局限性

2.樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,，會出現(xiàn)假陽性結(jié)果,；

4.病原體在流行過程中基因突變、重組,，會導致假陰性結(jié)果,；

6.試劑運輸，保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,，出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準確的結(jié)果,；
7.本檢測結(jié)果僅供參考，如須確診請結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測手段,。

1.所有操作嚴格按照說明書進行,；

3.反應液應避光保存；

5.使用一次性吸頭,、一次性手套和各區(qū)專用工作服,；

7.實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器；