【產(chǎn)品名稱】沙門氏菌SPP-sdfiPCR試劑盒

【包裝規(guī)格】 50T/盒實時熒光PCR法

適用于檢測,，可用于臨床沙門氏菌SPP-sdfi感染的輔助診斷，但不作確診使用,。

利用相應儀器對 PCR 過程進行實時監(jiān)測,，實現(xiàn)檢測結果的定性分析，用于臨床上對可疑感染者的病原 學診斷,。

反應液,、酶液、陽性質控品,、陰性質控品,。

-20℃±5℃，避光保存,、運輸,、反復凍融次數(shù)不超過 5 次，有效期 12 個月,。
ABI ,、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler,、Bio-Rad,、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。上述標本短期內(nèi)可保存于-20℃,，長期保存可置-70℃,，但不能超過 6 個月,，標本運送應采用 2~8℃冰袋運輸,， 嚴禁反復凍融。

1

1.1樣本前處理 血液、體液和棉拭子樣本取 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中,。 核酸提取 推薦采用核酸提qu或純化試劑（磁珠法或離心柱法）進行核酸提qu,， 請按照試劑說明書進行操作。

試劑RP

將混合好的測試反應液分裝到 PCR 反應管中,，21μL/管,。

3.加樣（樣本處理區(qū)） 將步驟 1 提取的核酸、陽性質控品,、陰性質控品各取 4μL,，分別加入相應的反應管中，蓋好管蓋,，混勻,，短 暫離心。

4.1

4.2

4.3推薦循環(huán)參數(shù)設置：

2.結果分析判定 結果分析條件設定 設置 Baseline 和 Threshold：一般直接按機器自動分析的結果分析,，當曲線出現(xiàn)整體傾斜時,，根據(jù)分析后圖像 調節(jié) Baseline 的 start 值（一般可在 3~15 范圍內(nèi)調節(jié)）、stop 值（一般可在 5~20 范圍內(nèi)調節(jié)）,，以及 Threshold 的 Value 值（上下拖動閾值線至高于陰性對照）,，重新分析結果。結果判斷 陽性：檢測通道 Ct 值≤35,，且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線,； 可疑：檢測通道 35值≤38，建議重復檢測,，如果檢測通道仍為 35值≤38,，且曲線有明顯的增長曲線， 判定為陽性,，否則為陰性,； 陰性：樣本檢測結果 Ct 值>38 或無 Ct 值。

4.檢測方法的局限性

2.樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,，會出現(xiàn)假陽性結果,；

4.病原體在流行過程中基因突變、重組,，會導致假陰性結果,；

6.試劑運輸，保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,，出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準確的結果,；
7.本檢測結果僅供參考，如須確診請結合臨床癥狀以及其他檢測手段,。

1.所有操作嚴格按照說明書進行,；

3.反應液應避光保存,；

5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服,；

7.實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器,；