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人活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒

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更新時間:2024-07-03 10:15:27瀏覽次數(shù):993

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 應用領域 生物產(chǎn)業(yè)
人活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒操作簡單,、結果精確,,臻科生物從業(yè)多年一直專心致力于免疫學技術的積累與發(fā)展,,以其優(yōu)質的產(chǎn)品質量與專業(yè)的技術服務,贏得業(yè)內(nèi)廣大人士的認可,。我司也一直和國內(nèi)外眾多高等院校與科研單位保持良好的合作關系,,共同努力合作共贏。

詳細介紹

一,、人活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒詳細介紹

中文名稱:人活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒

規(guī)格: 48T /96T

品牌:臻科生物

種屬:人ELISA試劑盒

檢測波長:450 nm

所需樣本體積: 50ul

適用范圍:僅供科研,,不得用于臨床診斷,。

保存及有效期:2-8℃,六個月

檢測樣本種類:用于測定血清,,血漿及相關液體等樣本的含量或者表達,。例如適合檢測包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、灌洗液,、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標本,。

臻科生物供應的種屬有:人、大鼠,、小鼠,、豚鼠、兔子,、人,、豬牛羊、雞鴨鵝,、植物ELISA試劑盒等

二、實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人活化蛋白C(APC)水平,。用純化的人活化蛋白C(APC)抗體包被微孔板,,制成固相抗體,,往包被單抗的微孔中依次加入活化蛋白C(APC),再與HRP 標記的活化蛋白C(APC)抗體結合,,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉化成藍色,,并在酸的作用下轉化成終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的活化蛋白C(APC)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),,通過標準曲線計算樣品中人活化蛋白C(APC)濃度,。

三,、試劑盒組成

1

30 倍濃縮洗滌液

20ml×1 瓶

7

終止液

6ml×1 瓶

2

酶標試劑

6ml×1 瓶

8

標準品(240 pmol/L)

0.5ml×1 瓶

3

酶標包被板

12 孔×8 條

9

標準品稀釋液

1.5ml×1 瓶

4

樣品稀釋液

6ml×1 瓶

10

說明書

1 份

5

顯色劑A 液

6ml×1 瓶

11

封板膜

2 張

6

顯色劑 B 液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1 個

 

 四,、操作步驟

1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。

5號標準品

150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

4號標準品 

150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

3號標準品 

150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

2號標準品 

150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

1號標準品 

150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

 

2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同),、標準孔、待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,。

3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。   

4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,如此重復5次,,拍干,。

6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外,。

7.溫育:操作同3,。

8.洗滌:操作同5。

9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色10分鐘.

10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色),。

11.測定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。

五、試劑盒計算

以標準物的濃度為橫坐標,,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,,根據(jù)樣品的

OD 值由標準曲線查出相應的濃度,;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD 值計算出標

準曲線的直線回歸方程式,,將樣品的OD 值代入方程式,,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),,

即為樣品的實際濃度,。

 

六,、注意事項

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未

用完,,板條應裝入密封袋中保存,。

2.濃洗滌液可能會有結晶析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果,。

3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,,以避免試驗誤差,。一次加樣時間

控制在5 分鐘內(nèi),,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣,。

4.請每次測定的同時做標準曲線,,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD 值

大于標準品孔di一孔的OD 值),,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,,計

算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

5.封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染,。

6.底物請避光保存。

7.嚴格按照說明書的操作進行,,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8.所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9.本試劑不同批號組分不得混用,。

 

七.特別提醒

1.標本采集后盡早進行提取,,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗,。若不能

馬上進行試驗,,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融

2.不能檢測含NaN3 的樣品,,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。

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