詳細介紹
一,、昆蟲保幼激素(JH)ELISA試劑盒詳細介紹:
中文名稱:昆蟲保幼激素(JH)ELISA試劑盒
規(guī)格: 48T /96T
品牌:臻科生物
種屬:昆蟲ELISA試劑盒
檢測波長:450 nm
所需樣本體積: 50ul
適用范圍:僅供科研,,不得用于臨床診斷
保存及有效期:2-8℃,六個月
檢測樣本種類:用于測定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本的含量或者表達,。例如適合檢測包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、灌洗液,、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本,。
臻科生物供應(yīng)的種屬有:昆蟲,、大鼠、小鼠,、豚鼠,、兔子、昆蟲,、豬牛羊,、雞鴨鵝,、植物ELISA試劑盒等,。
二、實驗原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中昆蟲保幼激素(JH)水平。用純化的昆蟲保幼激素(JH)抗體包被微孔板,,制成固相抗體,,往包被單抗的微孔中依次加入保幼激素(JH),再與HRP 標(biāo)記的保幼激素(JH)抗體結(jié)合,,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的保幼激素(JH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中昆蟲保幼激素(JH)濃度,。
三、試劑盒組成:
1 | 30 倍濃縮洗滌液 | 20ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(240 pmol/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
四,、操作步驟:
1,、準(zhǔn)備試劑,樣品和標(biāo)準(zhǔn)品
2,、加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,,37℃反應(yīng)30分鐘
3、洗板5次,,加入酶標(biāo)試劑,,37℃反應(yīng)30分鐘
4、洗板5次,,加入顯色A,、B,37℃顯色10分鐘
5、加入終止液
6,、15分鐘之內(nèi)讀OD值后計算
五,、試劑盒計算:
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),,在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù),;或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,,再乘以稀釋倍數(shù),,即為樣品的實際濃度。
六,、注意事項:
1,、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
2,、濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,,洗滌時不影響結(jié)果,。
3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器,,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),,如標(biāo)本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣。
4,、請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔di一孔的OD值),,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5,、封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染。
6,、底物請避光保存,。
7、嚴格按照說明書的操作進行,,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),。
8、所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
9、本試劑不同批號組分不得混用,。
七,、特別提醒:
1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,,提取后應(yīng)盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
2.不能檢測含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。