馬內(nèi)皮PAS結(jié)構(gòu)域蛋白1（EPAS1）ELISA定量試劑盒操作簡(jiǎn)單、結(jié)果精確,，臻科生物從業(yè)多年一直專心致力于免疫學(xué)技術(shù)的積累與發(fā)展,，以其優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品質(zhì)量與專業(yè)的技術(shù)服務(wù)，贏得業(yè)內(nèi)廣大人士的認(rèn)可,。我司也一直和國(guó)內(nèi)外眾多高等院校與科研單位保持良好的合作關(guān)系,，共同努力合作共贏。

一,、馬內(nèi)皮PAS結(jié)構(gòu)域蛋白1(EPAS1)ELISA定量試劑盒詳細(xì)介紹

中文名稱:馬內(nèi)皮PAS結(jié)構(gòu)域蛋白1(EPAS1)ELISA定量試劑盒

規(guī)格: 48T /96T

品牌:臻科生物

種屬:馬ELISA試劑盒

檢測(cè)波長(zhǎng):450 nm

所需樣本體積: 50ul

適用范圍:僅供科研,，不得用于臨床診斷。

保存及有效期:2-8℃,，六個(gè)月

檢測(cè)樣本種類:用于測(cè)定血清,，血漿及相關(guān)液體等樣本的含量或者表達(dá)。例如適合檢測(cè)包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、灌洗液,、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本,。

臻科生物供應(yīng)的種屬有：人、大鼠,、小鼠,、豚鼠、兔子,、昆蟲,、豬牛羊、雞鴨鵝,、植物ELISA試劑盒等

二,、實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中馬內(nèi)皮PAS結(jié)構(gòu)域蛋白1(EPAS1)水平,。用純化的馬內(nèi)皮PAS結(jié)構(gòu)域蛋白1(EPAS1)抗體包被微孔板，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入內(nèi)皮PAS結(jié)構(gòu)域蛋白1(EPAS1),，再與HRP 標(biāo)記的內(nèi)皮PAS結(jié)構(gòu)域蛋白1(EPAS1)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB 顯色,。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的內(nèi)皮PAS結(jié)構(gòu)域蛋白1(EPAS1)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中馬內(nèi)皮PAS結(jié)構(gòu)域蛋白1(EPAS1)濃度,。

三,、試劑盒組成

1	30 倍濃縮洗滌液	20ml×1 瓶	7	終止液	6ml×1 瓶
2	酶標(biāo)試劑	6ml×1 瓶	8	標(biāo)準(zhǔn)品（240 pmol/L）	0.5ml×1 瓶
3	酶標(biāo)包被板	12 孔×8 條	9	標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液	1.5ml×1 瓶
4	樣品稀釋液	6ml×1 瓶	10	說(shuō)明書	1 份
5	顯色劑A 液	6ml×1 瓶	11	封板膜	2 張
6	顯色劑 B 液	6ml×1/瓶	12	密封袋	1 個(gè)

 

 

 

 

 

 

 

四、操作步驟

 

 

五,、試劑盒計(jì)算

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),，OD 值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,，根據(jù)樣品的

OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD 值計(jì)算出標(biāo)

準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,，將樣品的OD 值代入方程式,，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù),，

即為樣品的實(shí)際濃度,。

 

六、注意事項(xiàng)

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未

用完,，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器,，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間

控制在5 分鐘內(nèi),，如標(biāo)本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣。

4． 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD 值

大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD 值）,，請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測(cè)定，計(jì)

算時(shí)請(qǐng)Zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）,。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染,。

6．底物請(qǐng)避光保存,。

7．嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。

9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

 

七,、特別提醒

1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能

馬上進(jìn)行試驗(yàn),，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.不能檢測(cè)含NaN3 的樣品,，因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性,。

 

 

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