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紫外可見分光光度計的幾種分析方法
紫外可見分光光度計是一種應(yīng)用很廣的分析儀器,。它的應(yīng)用領(lǐng)域涉及制藥,、醫(yī)療衛(wèi)生,、化學(xué)化工,、環(huán)保,、地質(zhì)、機(jī)械,、冶金,、石油、食品,、生物,、材料、計量科學(xué),、農(nóng)業(yè),、林業(yè)、漁業(yè)等領(lǐng)域中的科研,、教學(xué)等各個方面,,用來進(jìn)行定性分析、純度檢查,、結(jié)構(gòu)分析,、絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定、反應(yīng)動力學(xué)研究等,。因為儀器涉及到光學(xué),、電學(xué)和結(jié)構(gòu)等,所以它需要在一定的環(huán)境中應(yīng)用
?。?)定量分析
根據(jù)瑯伯-比爾定律,,樣品的濃度和吸光度是成正比關(guān)系的,濃度越大,,吸收值越高,,所以分光光度計用的還是定量分析,定量分析的種類有很多,,這里介紹常用的幾種定量分析方法:
A,、法:法是紫外可見分光光度計諸多分析方法中使用較多的一種方法,。這是一種以瑯伯-比爾定律A=εbC為基礎(chǔ)的分析方法,,某一物質(zhì)在一定波長下ε值是一個常數(shù),石英比色皿的光程是已知的,,也是一個常數(shù),。因此,可用紫外可見分光光度計在λmax波長處,,測定樣品溶液的吸光度值A(chǔ),。然后,,根據(jù)瑯伯比爾定律求出C=A/εb,則可求出該樣品溶液的含量或濃度,。
B,、標(biāo)準(zhǔn)法:在選定的波長處,在相同的測試條件下,,分別測試標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液C標(biāo)和被測試樣品溶液C樣的吸光度A標(biāo)和A樣,。然后,按下式求得樣品溶液的濃度或含量,。
C樣=A樣/A標(biāo)×C標(biāo)
C,、標(biāo)準(zhǔn)曲線法
紫外可見分光光度計常用的定量分析方法是標(biāo)準(zhǔn)曲線法。即先用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)配制一定濃度的溶液,,再將該溶液配制成一系列的標(biāo)準(zhǔn)溶液,。在一定波長下,測試每個標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度,,以吸光度值為縱坐標(biāo),,標(biāo)準(zhǔn)溶液對應(yīng)得濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,。將樣品溶液按標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制程序測得吸光度值,,在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出樣品溶液對應(yīng)的濃度或含量。
A,、 其它分析方法
除上述幾個分析方法外經(jīng)常使用的分析方法外,,還有比吸收系數(shù)法、二乘法,、解聯(lián)立方程法和示差分光光度法,。
(2)定性分析
如果未知物的紫外吸收光譜的吸收峰波長λmax,、吸收峰波長λmin,、摩爾吸光系數(shù)εmax,以及吸收峰的數(shù)目,、位置,、拐點與標(biāo)準(zhǔn)光譜數(shù)據(jù)*一致,就可以認(rèn)為是同一種化合物,。定性分析的主要目的是知道分析樣品中是什么物質(zhì),。
定量分析和定性分析是分光光度計的兩大主要功能,特別是定量分析,。其它的分析都應(yīng)該是從這兩大種功能中發(fā)展出來的,。