常用細(xì)胞核熒光染料的介紹及應(yīng)用
目前細(xì)胞核常用熒光染料有以下幾大類:吖啶橙、溴化乙錠和碘化丙啶,,DAPI,、Hoechst染料、EthD III,、7-AAD,、RedDot1,2等等,。性能優(yōu)良細(xì)胞核熒光染料應(yīng)具有好的膜通透性,,高靈敏度,快速的染核效率,,良好的光穩(wěn)定性,,良好的生物相容性細(xì)胞毒性更小,波長(zhǎng)更長(zhǎng)的激發(fā)光和發(fā)射光等,。仔細(xì)分析目前國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)上常用的細(xì)胞核熒光染料,,滿足以上要素的化合物體系為數(shù)不多,探究新的優(yōu)良的細(xì)胞核熒光染料是目前研究人員的共識(shí),。然后,,進(jìn)一步深層研究細(xì)胞核內(nèi)的生物機(jī)制。下文所述為目前市場(chǎng)上常用的細(xì)胞核熒光染料,,透膜的染料如下:
1,,吖啶橙:具有膜通透性,能透過細(xì)胞膜,,將核DNA和RNA分別染成綠色和紅色,,因此使細(xì)胞核呈綠色或黃綠色熒光,。
2,溴化乙錠:一種高度靈敏的熒光染色劑,,在標(biāo)準(zhǔn)302nm處激發(fā)出橙紅色信號(hào),。
3,DAPI:一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料,,其與DNA結(jié)合后可以產(chǎn)生比DAPI自身強(qiáng)20多倍的熒光,,而與單鏈DNA結(jié)合無熒光的增強(qiáng)。DAPI對(duì)雙鏈DNA的染色靈敏度要高于EB和PI,,熒光強(qiáng)度比Hoechst低,,但光穩(wěn)定性高于Hoechst。
4,,Hoechst染料:一類在顯微觀察中標(biāo)記DNA的熒光染料,,最常見的兩種是Hoechst33342,Hoechst33258,。這兩種染料都在紫外350nm處被激發(fā),,在461nm處最大發(fā)射光附近發(fā)射青/藍(lán)色熒光。與DAPI相比,,Hoechst33342加有乙基,,具有更強(qiáng)的親脂性,因此能更好的透過完整的細(xì)胞膜,,并且細(xì)胞毒性更小,。
5, RedDot 1染料:細(xì)胞核選擇性強(qiáng)。RedDot染料可被幾種常見的激光激發(fā)并可在遠(yuǎn)紅外區(qū)激發(fā)熒光,。RedDot的紅色近紅外熒光有效的與其他常用熒光探針區(qū)分開來,。不透膜的染料,如下:PI碘化丙啶:不能通過活細(xì)胞膜,,但卻能穿過死細(xì)胞膜而對(duì)核染色,。PI作為紅色熒光復(fù)染劑,經(jīng)常與Calcein-AM或者FDA等熒光探針合用,,區(qū)分死/活細(xì)胞,。EthD III、7-AAD,、RedDot 2:不能透過活細(xì)胞膜,,但能將壞死細(xì)胞區(qū)分開來,;更適合凋亡壞死實(shí)驗(yàn)的檢測(cè),。
水溶性SupRed650近紅外細(xì)胞核染料的介紹
SupRed650細(xì)胞核染料是一種水溶性染料,同時(shí)也是一種聚集誘導(dǎo)發(fā)光染料,,具有以下特點(diǎn):
1.高靈敏度
2.良好的膜通透性
3.快速的染核效率
4.良好的光穩(wěn)定性
5.良好的生物相容性
6.越聚越亮的優(yōu)勢(shì)
7.波長(zhǎng)更長(zhǎng)的激發(fā)光和發(fā)射光(625/650nm)
8.無背景,,染色程序方法簡(jiǎn)單,,無需洗滌,易于操作,。
供應(yīng)商:杭州新喬生物科技有限公司
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