發(fā)光分光光度計(jì)采用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長(zhǎng)的光源，通過(guò)系列分光裝置,，從而產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的光源,，光線透過(guò)測(cè)試的樣品后，部分光線被吸收,，計(jì)算樣品的吸光值,，從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度,。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
單色光輻射穿過(guò)被測(cè)物質(zhì)溶液時(shí),，被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度（光路長(zhǎng)度）成正比,，其關(guān)系如下式：A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc
式中：A 為吸光度；
I0：為入射的單色光強(qiáng)度,；
I：為透射的單色光強(qiáng)度,；
T：為物質(zhì)的透射率；
k：為摩爾吸收系數(shù),；
L：為被分析物質(zhì)的光程,，即比色皿的邊長(zhǎng)；
c：為物質(zhì)的濃度,；
操作方法：
1,、接通電源，打開(kāi)儀器開(kāi)關(guān),，掀開(kāi)樣品室暗箱蓋，預(yù)熱10分鐘,。
2,、將靈敏度開(kāi)關(guān)調(diào)至“1”檔。
3,、根據(jù)所需波長(zhǎng)轉(zhuǎn)動(dòng)波長(zhǎng)選擇鈕,。
4、將空白液及測(cè)定液分別倒入比色杯3/4處,，用擦鏡紙擦清外壁,，放入樣品室內(nèi)，使空白管對(duì)準(zhǔn)光路,。
5,、在暗箱蓋開(kāi)啟狀態(tài)下調(diào)節(jié)零點(diǎn)調(diào)節(jié)器，使讀數(shù)盤(pán)指針指向t=0處,。
6,、蓋上暗箱蓋，調(diào)節(jié)“100”調(diào)節(jié)器,，使空白管的t=100,，指針?lè)€(wěn)定后逐步拉出樣品滑竿，分別讀出測(cè)定管的光密度值,，并記錄,。
7、比色完畢,，關(guān)上電源,，取出比色皿洗凈,，樣品室用軟布或軟紙擦凈。
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