詳細(xì)介紹
技術(shù)概論:
豬圓環(huán)病毒PCR檢測(cè)試劑盒圖片聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發(fā)展起來(lái)的體外核酸擴(kuò)增技術(shù),。它具有特異,、敏感,、產(chǎn)率高,、快速、簡(jiǎn)便,、重復(fù)性好,、易自動(dòng)化等突出優(yōu)點(diǎn),;能在一個(gè)試管內(nèi)將所要研究的目的基因或某一DNA片段于數(shù)小時(shí)內(nèi)擴(kuò)增至十萬(wàn)乃至百萬(wàn)倍,使肉眼能直接觀(guān)察和判斷;可從一根毛發(fā),、一滴血,、甚至一個(gè)細(xì)胞中擴(kuò)增出足量的DNA供分析研究和檢測(cè)鑒定。過(guò)去幾天幾星期才能做到的事情,,用PCR幾小時(shí)便可完成,。PCR技術(shù)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的一項(xiàng)革命性創(chuàng)舉和里程碑。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 豬圓環(huán)病毒PCR檢測(cè)試劑盒圖片 |
規(guī)格 | 50T |
價(jià)格 | 電詢(xún) |
PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件:
豬圓環(huán)病毒PCR檢測(cè)試劑盒圖片標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul?
產(chǎn)品特點(diǎn):
豬圓環(huán)病毒PCR檢測(cè)試劑盒圖片PCR引物設(shè)計(jì)的目的是為了找到一對(duì)合適的核苷酸片段,,使其能有效地?cái)U(kuò)增模板DNA序列,。因此,引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否,。
要設(shè)計(jì)引物首先要找到DNA序列的保守區(qū),。同時(shí)應(yīng)預(yù)測(cè)將要擴(kuò)增的片段單鏈?zhǔn)欠裥纬啥?jí)結(jié)構(gòu)。如這個(gè)區(qū)域單鏈能形成二級(jí)結(jié)構(gòu),,就要避開(kāi)它,。如這一段不能形成二級(jí)結(jié)構(gòu),那就可以在這一區(qū)域設(shè)計(jì)引物,。
現(xiàn)在可以在這一保守區(qū)域里設(shè)計(jì)一對(duì)引物,。一般引物長(zhǎng)度為15-30堿基,擴(kuò)增片段長(zhǎng)度為100-600堿基對(duì),。
讓我們先看看P1引物,。一般引物序列中G+C含量一般為40%-60%。而且四種堿基的分布隨機(jī),。不要有聚嘌呤或聚嘧啶存在,。否則P1引物設(shè)計(jì)的就不合理。應(yīng)重新尋找區(qū)域設(shè)計(jì)引物,。
同時(shí)引物之間也不能有互補(bǔ)性,,一般一對(duì)引物間不應(yīng)多于4個(gè)連續(xù)堿基的互補(bǔ)。
引物確定以后,,可以對(duì)引物進(jìn)行必要的修飾,,例如可以在引物的5′端加酶切位點(diǎn)序列;標(biāo)記生物素,、熒光素,、等,這對(duì)擴(kuò)增的特異性影響不大,。但3′端不能進(jìn)行任何修飾,,因?yàn)橐锏难由焓菑?′端開(kāi)始的。這里還需提醒的是3′端不要終止于密碼子的第3位,,因?yàn)槊艽a子第3位易發(fā)生簡(jiǎn)并,,會(huì)影響擴(kuò)增的特異性與效率,。
阪崎腸桿菌rpsU-dnaG 基因熒光PCR檢測(cè)試劑盒間序列(探針?lè)ǎ┚C上所述我們可以歸納十條PCR引物的設(shè)計(jì)原則:
1、豬圓環(huán)病毒PCR檢測(cè)試劑盒圖片引物應(yīng)用核酸系列保守區(qū)內(nèi)設(shè)計(jì)并具有特異性,。
2,、 產(chǎn)物不能形成二級(jí)結(jié)構(gòu),。
3,、引物長(zhǎng)度一般在15~30堿基之間。
4,、G+C含量在40%~60%之間,。
5、堿基要隨機(jī)分布,。
6,、引物自身不能有連續(xù)4個(gè)堿基的互補(bǔ)。
7,、引物之間不能有連續(xù)4個(gè)堿基的互補(bǔ),。
8、引物5′端可以修飾,。
9,、引物3′端不可修飾。
10,、引物3′端要避開(kāi)密碼子的第3位,。
PCR引物設(shè)計(jì)的目的是找到一對(duì)合適的核苷酸片段,使其能有效地?cái)U(kuò)增模板DNA序列,。如前述,,引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否。對(duì)引物的設(shè)計(jì)不可能有一種包羅萬(wàn)象的規(guī)則確保PCR的成功,,但遵循某些原則,,則有助于引物的設(shè)計(jì)。
293A(人胚腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2CM-H035人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL人支氣管上皮細(xì)胞RNAHBEpiCmiRNA5μg
CM-R105大鼠神經(jīng)元細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
CD226OthersCynomolgus食蟹猴CD22人細(xì)胞裂解液(陽(yáng)性對(duì)照)
DU-145細(xì)胞,,人前列腺癌細(xì)胞小鼠腦瘤細(xì)胞,BC3H1細(xì)胞人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞HPAF
HLF-a(人肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠腎小管上皮細(xì)胞MREpiC
CRHR2/CRFR2促腎上腺皮質(zhì)釋放激素受體2抗體規(guī)格:0.2ml
CSIG細(xì)胞衰老抑制基因抗體規(guī)格:0.2ml
Cripto-1(NT)畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子抗體(N端)規(guī)格:0.2ml
Cripto-1畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子抗體(C端)規(guī)格:0.2ml
CSMD1CSMD1抗體規(guī)格:0.2ml
豬圓環(huán)病毒PCR檢測(cè)試劑盒圖片Sodium-2-naphthalenesolfonate2-萘磺酸鈉(>98%,BR) 規(guī)格:供鑒別用
Span*20司班20 規(guī)格:供鑒別用
Stains-All全染色劑(>95%,BS) 規(guī)格:供鑒別用
Strontiumcarbonate碳酸鍶(>98%,BC) 規(guī)格:供鑒別用
Strontiumsulfate硫酸鍶(>98%,BC) 規(guī)格:光譜,≥99%
SucrosephosphorylasefromL.Mesenteroides蔗糖磷酸化酶 規(guī)格:光譜SP
Sulfamethazinesodiumsalt磺胺二甲嘧啶鈉(>99%,BP) 規(guī)格:光譜級(jí),,>99.9%(GC)
Sulfobromophthaleindisodiumsalthydrate磺溴酞鈉(>98%,BR) 規(guī)格:光譜級(jí),≥99.8%(GC)
Sulfo-MBSSulfo-MBS 規(guī)格:含>99.0%
Tetraheptylammoniumbromide四庚基溴化銨(>98%,BC) 規(guī)格:含氮量:23.50-24.30%
Tetrapropylammoniumhydroxide25%solution四丙基氫氧化銨25%溶液 規(guī)格:含氮量:9.00-10.30%
Thapsigargin,fromThapsiagarganica毒胡蘿卜素(>95%(HPLC),BC) 規(guī)格:含量
ThioflavinT硫黃素T(>75%,BS) 規(guī)格:含量:Imipenem≥400μg/mg,Cilastatin(C16H26N2O5S)≥400μg/mg,USP36
ThiolutinfromStreptomycesluteosporeus硫藤黃素(>95%,BC) 規(guī)格:含量>90%%,BR
Thionin硫堇(>90%,BS) 規(guī)格:含量>90%,單鈉鹽