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大鼠骨鈣素(BGP)elisa試劑盒操作步驟

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀

釋,。

800 ng/L

400 ng/L

200 ng/L

100 ng/L

50 ng/L

5 號標(biāo)準(zhǔn)品

4 號標(biāo)準(zhǔn)品

3 號標(biāo)準(zhǔn)品

2 號標(biāo)準(zhǔn)品

1 號標(biāo)準(zhǔn)品

150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

150μl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

150μl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

150μl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

150μl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,，其余各步操作相同）,、標(biāo)準(zhǔn)孔、

待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50μl,，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,，

然后再加待測樣品 10μl（樣品終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡

量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,。

3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4. 配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置 30 秒后棄去,，如此

重復(fù) 5 次,，拍干,。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外,。

7. 溫育：操作同 3。

8. 洗滌：操作同 5,。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl,，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色

15 分鐘.

10. 終止：每孔加終止液 50μl,，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）,。

11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）,。 測定應(yīng)在加終止

液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。