詳細(xì)介紹
通用原則:
1,, 蜂房小甲蟲探針法熒光定量PCR試劑盒先選擇好探針,,然后設(shè)計(jì)引物使其盡可能的靠近于探針。
2,, 擴(kuò)增子的長度應(yīng)不超過400bp,,理想的能在100-150bp內(nèi),擴(kuò)增片斷約短,,有效的擴(kuò)增反應(yīng)就越容易獲得,。較短的擴(kuò)增片斷也容易保證分析的一致性
3, 保持GC含量在20%和80%之間,,GC富含區(qū)容易產(chǎn)生非特異反應(yīng),,從而會(huì)導(dǎo)致擴(kuò)增效率的降低,及在SG分析中非特異信號,。
4,, 為了保證效率和重復(fù)性,,應(yīng)避免重復(fù)的核苷酸序列,尤其是G(不能有4個(gè)連續(xù)的G)
5,, 將引物和探針互相進(jìn)行配對檢測,以避免二聚體和發(fā)卡結(jié)構(gòu)的形成,。
b),,探針設(shè)計(jì)指導(dǎo)
1,在設(shè)計(jì)引物之前設(shè)計(jì)探針
2,,探針的Tm值應(yīng)在68-70℃之間,,如果是目測探針,則要仔細(xì)審查GC富含區(qū),。
3,,探針的5’端要避免有鳥氨酸,5’G會(huì)有淬滅作用,,即使被切割下來這種淬滅作用也還會(huì)存在
4,,選擇C多于G的鏈作探針,G的含量多于C會(huì)降低反應(yīng)效率,,這時(shí)就應(yīng)選擇配對的另一條鏈作為探針,。
6, 探針應(yīng)盡可能的短,,不要超過30個(gè)bp,。
7, 檢測探針的DNA折疊和二級結(jié)構(gòu),。
產(chǎn)品名稱 | 蜂房小甲蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 |
英文名稱 | Aethina tumida |
編號 | BJP2050 |
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原理:
產(chǎn)品僅用于科研所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),,是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法,。
檢測方法
1.SYBRGreenⅠ法:
在PCR反應(yīng)體系中,加入過量SYBR熒光染料,,SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,,發(fā)射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射任何熒光信號,,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步,。
SYBR定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法:
探針完整時(shí),報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收,;PCR擴(kuò)增時(shí),,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,,即每擴(kuò)增一條DNA鏈,,就有一個(gè)熒光分子形成,實(shí)現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步,。
產(chǎn)品特點(diǎn):
全新的熱啟動(dòng)DNA聚合酶-Hot Start Taq DNA聚合酶,,可在PCR反應(yīng)的過程中抑制非特異擴(kuò)增,從而最大限度地減少非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物的產(chǎn)生,,提高熒光定量PCR反應(yīng)的特異性,;
采用新型的熒光染料EvaGreen,與傳統(tǒng)熒光染料相比,,對PCR反應(yīng)抑制更小,,而且熒光信號更強(qiáng),檢測靈敏度更高,;產(chǎn)品僅用于科研
含有UNG的試劑盒可以防止PCR產(chǎn)物污染體系,,進(jìn)而有效防止實(shí)驗(yàn)過程中PCR產(chǎn)物的交叉污染;
TaqMan熒光定量PCR試劑盒提供了除引物,、探針,、模板外的所有實(shí)驗(yàn)所需組分,并配備2×Buffer,,可完成不同類型熒光探針的實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng),,方便用戶使用;
試劑盒的通用性強(qiáng),,可適用于Roche的Light Cycler,、ABI各型實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀和。
服務(wù)流程:
1.客戶認(rèn)真寫好訂單,,提供待檢基因相關(guān)信息,;
2.簽訂技術(shù)服務(wù)合同,支付預(yù)付款(30-50%),;
3.設(shè)計(jì)合成定量PCR引物(或客戶提供文獻(xiàn)引物委托本公司合成),;
4.DNA/RNA的抽提、定量,、RNA反轉(zhuǎn)錄,;
5.PCR預(yù)實(shí)驗(yàn),主要檢測引物的特異性和擴(kuò)增效率,;
6.正式定量實(shí)驗(yàn):對所有樣品上機(jī)檢測,;
7.實(shí)驗(yàn)結(jié)果和數(shù)據(jù)分析,形成報(bào)告,。產(chǎn)品僅用于科研
以下是公司*產(chǎn)品:
螺旋體染色液(Levaditi硝酸銀法)3-三基硅烷基炔醛
異染顆粒染色液(改良Albert法)3-三基硅烷基炔醛
異染顆粒染色液(改良Albert法)Teniposide
基綠-派絡(luò)寧染色液Ethynodiol diacetate
基綠-派絡(luò)寧染色液Ethynodiol diacetate
基綠染色液(0.5%)Ethynodiol diacetate
基綠染色液(1%)正辛基 α-D-葡萄糖苷
基綠染色液(2%)二硫代磷酸二酯
基綠染色液(0.1%)二硫代磷酸二酯
福爾根DNA染色液(Feulgen Stain)甘氨酰肌氨酸
人雌二醇(E2)干豆腐摻姜黃素快速檢測
人三狀腺原氨酸(T3)ELISA Kit干豆腐摻地板黃快速檢測
人狀腺素(T4)豆芽中尿素快速檢測
人游離狀腺素(Free-T4)真假雞精快速檢測
游離三狀腺原氨酸(Free-T3)真假白醋快速檢測試劑
人新生狀腺素(NN-T4)香辛調(diào)味料摻淀粉類物質(zhì)快速檢測
人胰島素(Insulin)ELISA Kit味精中硫化鈉快速檢測試劑
人C-肽(C-Peptide)味精中摻食鹽快速檢測試劑
人促腎上腺激素皮質(zhì)激素(ATH)味精中摻石膏粉快速檢測試劑
人絨毛促性腺激素(HCG)味精中摻硫酸鎂快速檢測試劑