技術(shù)概論:
玉米GA21/MSPCR檢測試劑盒規(guī)格聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發(fā)展起來的體外核酸擴(kuò)增技術(shù),。它具有特異、敏感,、產(chǎn)率高,、快速、簡便,、重復(fù)性好,、易自動(dòng)化等突出優(yōu)點(diǎn)；能在一個(gè)試管內(nèi)將所要研究的目的基因或某一DNA片段于數(shù)小時(shí)內(nèi)擴(kuò)增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷,；可從一根毛發(fā),、一滴血、甚至一個(gè)細(xì)胞中擴(kuò)增出足量的DNA供分析研究和檢測鑒定,。過去幾天幾星期才能做到的事情,，用PCR幾小時(shí)便可完成。PCR技術(shù)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的一項(xiàng)革命性創(chuàng)舉和里程碑,。

PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件:
玉米GA21/MSPCR檢測試劑盒規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10～100pmol
模板DNA 0.1～2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
?
產(chǎn)品特點(diǎn):
玉米GA21/MSPCR檢測試劑盒規(guī)格PCR引物設(shè)計(jì)的目的是為了找到一對(duì)合適的核苷酸片段,，使其能有效地?cái)U(kuò)增模板DNA序列。因此,，引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否,。
要設(shè)計(jì)引物首先要找到DNA序列的保守區(qū)。同時(shí)應(yīng)預(yù)測將要擴(kuò)增的片段單鏈?zhǔn)欠裥纬啥?jí)結(jié)構(gòu),。如這個(gè)區(qū)域單鏈能形成二級(jí)結(jié)構(gòu),，就要避開它。如這一段不能形成二級(jí)結(jié)構(gòu),，那就可以在這一區(qū)域設(shè)計(jì)引物,。
現(xiàn)在可以在這一保守區(qū)域里設(shè)計(jì)一對(duì)引物。一般引物長度為15-30堿基,，擴(kuò)增片段長度為100-600堿基對(duì),。
讓我們先看看P1引物,。一般引物序列中G+C含量一般為40%-60%。而且四種堿基的分布隨機(jī),。不要有聚嘌呤或聚嘧啶存在。否則P1引物設(shè)計(jì)的就不合理,。應(yīng)重新尋找區(qū)域設(shè)計(jì)引物,。
同時(shí)引物之間也不能有互補(bǔ)性，一般一對(duì)引物間不應(yīng)多于4個(gè)連續(xù)堿基的互補(bǔ),。
引物確定以后,，可以對(duì)引物進(jìn)行必要的修飾，例如可以在引物的5′端加酶切位點(diǎn)序列,；標(biāo)記生物素,、熒光素、等,，這對(duì)擴(kuò)增的特異性影響不大,。但3′端不能進(jìn)行任何修飾，因?yàn)橐锏难由焓菑?′端開始的,。這里還需提醒的是3′端不要終止于密碼子的第3位,，因?yàn)槊艽a子第3位易發(fā)生簡并，會(huì)影響擴(kuò)增的特異性與效率,。
阪崎腸桿菌rpsU-dnaG 基因熒光PCR檢測試劑盒間序列(探針法）綜上所述我們可以歸納十條PCR引物的設(shè)計(jì)原則：
1,、玉米GA21/MSPCR檢測試劑盒規(guī)格引物應(yīng)用核酸系列保守區(qū)內(nèi)設(shè)計(jì)并具有特異性。
2,、 產(chǎn)物不能形成二級(jí)結(jié)構(gòu),。
3、引物長度一般在15~30堿基之間,。
4,、G+C含量在40%~60%之間。
5,、堿基要隨機(jī)分布,。
6、引物自身不能有連續(xù)4個(gè)堿基的互補(bǔ),。
7,、引物之間不能有連續(xù)4個(gè)堿基的互補(bǔ)。
8,、引物5′端可以修飾,。
9、引物3′端不可修飾,。
10,、引物3′端要避開密碼子的第3位,。
PCR引物設(shè)計(jì)的目的是找到一對(duì)合適的核苷酸片段，使其能有效地?cái)U(kuò)增模板DNA序列,。如前述,，引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否。對(duì)引物的設(shè)計(jì)不可能有一種包羅萬象的規(guī)則確保PCR的成功,，但遵循某些原則,，則有助于引物的設(shè)計(jì)。
SUP-B15(人Ph+急淋白血病細(xì)胞系)5×106cells/瓶×2SHZ-88(大鼠癌細(xì)胞)

T-108A膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mL

EGFROthersMouse小鼠EGFR/HER1/ErbB1人細(xì)胞裂解液(陽性對(duì)照)

F9小鼠畸胎瘤細(xì)胞F9mouseteratomacellsDMEM培養(yǎng)基+10%FBS

IL10ProteinHuman重組人IL10/Ierleukin-10蛋白(His標(biāo)簽)

小鼠子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

FOXO3A叉頭蛋白O3A抗體規(guī)格：0.2ml

Phospho-FoxO3a(Ser318/321)磷酸化叉頭蛋白3A抗體規(guī)格：0.1ml

Phospho-FoxO3a(Ser294)叉頭蛋白3A抗體規(guī)格：0.1ml

Phospho-FoxO3a(Ser253)磷酸化叉頭蛋白3A抗體規(guī)格：0.1ml

FOXO4叉頭蛋白O4抗體規(guī)格：0.2ml
玉米GA21/MSPCR檢測試劑盒規(guī)格Amiloridehydrochloride鹽酸阿米洛利   規(guī)格：HPLC≥99.0%,標(biāo)準(zhǔn)品

Methyl3,5-diamino-6-chloropyrazine-2-carboxylate3,，5-二氨基-6-氯吡嗪-2-羧酸甲酯   規(guī)格：HPLC≥99.5%,，標(biāo)準(zhǔn)品

Pizotifen苯噻啶   規(guī)格：HPLCgrade

β-Cyclodextrinβ-環(huán)糊精   規(guī)格：HPLC法含量測定

CaptoprilDisulfide卡托普利二硫化物   規(guī)格：HPLC法含量測定

Clioquinol氯羥喹   規(guī)格：HPLC法含量測定

Albuterolsulfate硫酸沙丁胺醇   規(guī)格：HPLC法含量測定

Dehydroepiandrosterone-3-sulfate硫酸普拉睪酮鈉   規(guī)格：HPLC法含量測定

Primidone撲米酮   規(guī)格：HPLC法含量測定

Zincgluconate葡萄糖酸鋅   規(guī)格：HPLC法含量測定

Triamcinolone曲安西龍   規(guī)格：HPLC法含量測定

Sulindac舒林酸   規(guī)格：HPLC法含量測定

NVP-HSP990HSP990   規(guī)格：HPLC法含量測定

TolazolineHCl鹽酸妥拉唑林   規(guī)格：HPLC法含量測定

Thioridazinehydrochloride鹽酸硫利達(dá)嗪   規(guī)格：HPLC法含量測定