詳細(xì)介紹
產(chǎn)品特點(diǎn):
豬鏈球菌Ⅱ型PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格PCR引物設(shè)計(jì)的目的是為了找到一對(duì)合適的核苷酸片段,使其能有效地?cái)U(kuò)增模板DNA序列。因此,,引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否。
要設(shè)計(jì)引物首先要找到DNA序列的保守區(qū),。同時(shí)應(yīng)預(yù)測(cè)將要擴(kuò)增的片段單鏈?zhǔn)欠裥纬啥?jí)結(jié)構(gòu),。如這個(gè)區(qū)域單鏈能形成二級(jí)結(jié)構(gòu),就要避開它,。如這一段不能形成二級(jí)結(jié)構(gòu),,那就可以在這一區(qū)域設(shè)計(jì)引物。
現(xiàn)在可以在這一保守區(qū)域里設(shè)計(jì)一對(duì)引物,。一般引物長度為15-30堿基,,擴(kuò)增片段長度為100-600堿基對(duì)。
讓我們先看看P1引物,。一般引物序列中G+C含量一般為40%-60%,。而且四種堿基的分布隨機(jī)。不要有聚嘌呤或聚嘧啶存在,。否則P1引物設(shè)計(jì)的就不合理,。應(yīng)重新尋找區(qū)域設(shè)計(jì)引物。
同時(shí)引物之間也不能有互補(bǔ)性,,一般一對(duì)引物間不應(yīng)多于4個(gè)連續(xù)堿基的互補(bǔ),。
引物確定以后,可以對(duì)引物進(jìn)行必要的修飾,,例如可以在引物的5′端加酶切位點(diǎn)序列,;標(biāo)記生物素、熒光素,、等,這對(duì)擴(kuò)增的特異性影響不大,。但3′端不能進(jìn)行任何修飾,,因?yàn)橐锏难由焓菑?′端開始的。這里還需提醒的是3′端不要終止于密碼子的第3位,,因?yàn)槊艽a子第3位易發(fā)生簡(jiǎn)并,,會(huì)影響擴(kuò)增的特異性與效率。
阪崎腸桿菌rpsU-dnaG 基因熒光PCR檢測(cè)試劑盒間序列(探針法)綜上所述我們可以歸納十條PCR
產(chǎn)品名稱 | 豬鏈球菌Ⅱ型PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格 |
規(guī)格 | 50T |
價(jià)格 | 電詢 |
技術(shù)概論:
豬鏈球菌Ⅱ型PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發(fā)展起來的體外核酸擴(kuò)增技術(shù),。它具有特異,、敏感、產(chǎn)率高,、快速,、簡(jiǎn)便、重復(fù)性好,、易自動(dòng)化等突出優(yōu)點(diǎn),;能在一個(gè)試管內(nèi)將所要研究的目的基因或某一DNA片段于數(shù)小時(shí)內(nèi)擴(kuò)增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷,;可從一根毛發(fā)、一滴血,、甚至一個(gè)細(xì)胞中擴(kuò)增出足量的DNA供分析研究和檢測(cè)鑒定,。過去幾天幾星期才能做到的事情,用PCR幾小時(shí)便可完成,。PCR技術(shù)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的一項(xiàng)革命性創(chuàng)舉和里程碑,。
引物的設(shè)計(jì)原則:
1、豬鏈球菌Ⅱ型PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格引物應(yīng)用核酸系列保守區(qū)內(nèi)設(shè)計(jì)并具有特異性,。
2,、 產(chǎn)物不能形成二級(jí)結(jié)構(gòu)。
3,、引物長度一般在15~30堿基之間,。
4、G+C含量在40%~60%之間,。
5,、堿基要隨機(jī)分布。
6,、引物自身不能有連續(xù)4個(gè)堿基的互補(bǔ),。
7、引物之間不能有連續(xù)4個(gè)堿基的互補(bǔ),。
8,、引物5′端可以修飾。
9,、引物3′端不可修飾,。
10、引物3′端要避開密碼子的第3位,。
PCR引物設(shè)計(jì)的目的是找到一對(duì)合適的核苷酸片段,,使其能有效地?cái)U(kuò)增模板DNA序列。如前述,,引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否,。對(duì)引物的設(shè)計(jì)不可能有一種包羅萬象的規(guī)則確保PCR的成功,但遵循某些原則,,則有助于引物的設(shè)計(jì),。
EFNB2OthersMouse小鼠EFNB2/EphrinB2人細(xì)胞裂解液(陽性對(duì)照)
CM-R103大鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
CHST11OthersHuman人CHST11/C4ST-1桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液(陽性對(duì)照)
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-1膀胱變移細(xì)胞癌,T-24細(xì)胞U251(膠質(zhì)瘤細(xì)胞)
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0927
小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞MM
CollagenXⅩ型膠原抗體規(guī)格:0.1ml
Contactin-6NB-3神經(jīng)粘附蛋白抗體規(guī)格:0.2ml
Claudin1緊密連接蛋白1抗體規(guī)格:0.2ml
Claudin3緊密連接蛋白3抗體規(guī)格:0.2ml
Claudin4緊密連接蛋白4抗體規(guī)格:0.2ml
豬鏈球菌Ⅱ型PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格BleomycinA5Hydrochloride鹽酸平陽霉素 規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
Erythromycinethylsuccinate琥乙紅霉素 規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
Griseofulvin灰黃霉素 規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
Tivantinib,ARQ197Tivantinib(ARQ197) 規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
Ethylvanillin3-乙氧基-4-羥基 規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
2-Phenylacetamide2-苯 規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
Enoxacin依諾沙星 規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
[Nle4,DPhe7]a-MSH,amide;MelanotanI[Nle4,DPhe7]a-促黑激素酰胺;美拉諾坦I 規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
[Nle8’18,Tyr34]-pTH(1-34)amide(bovine)[Nle8’18,Tyr34]-甲狀旁腺激素(1-34)酰胺(牛) 規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
[Nle8’18,Tyr34]-pTH(3-34)amide(bovine)[Nle8’18,Tyr34]-甲狀旁腺激素(3-34)酰胺(牛) 規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
[Nle8’18,Tyr34]-pTH(7-34)amide(bovine)[Nle8’18,Tyr34]-甲狀旁腺激素(7-34)酰胺(牛) 規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
[Phe2,Orn8]-Oxytocin[Phe2,Orn8]-催產(chǎn)素 規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
[Ser4,Ile8]-Oxytocin[Ser4,Ile8]-催產(chǎn)素 規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
[Tyr34]-pTH(7-34)amide(bovine)[Tyr34]-甲狀旁腺激素(7-34)酰胺(牛) 規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
[Trp4]-Kemptide[Trp4]-Kemptide 規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件:
豬鏈球菌Ⅱ型PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul