詳細介紹
PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件:
豬鏈球菌基因分型PCR檢測試劑盒哪里有賣標準的PCR反應(yīng)體系
10×擴增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產(chǎn)品名稱 | 豬鏈球菌基因分型PCR檢測試劑盒哪里有賣 |
規(guī)格 | 50T |
價格 | 電詢 |
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技術(shù)概論:
豬鏈球菌基因分型PCR檢測試劑盒哪里有賣聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發(fā)展起來的體外核酸擴增技術(shù),。它具有特異,、敏感,、產(chǎn)率高,、快速、簡便,、重復性好,、易自動化等突出優(yōu)點;能在一個試管內(nèi)將所要研究的目的基因或某一DNA片段于數(shù)小時內(nèi)擴增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷,;可從一根毛發(fā),、一滴血、甚至一個細胞中擴增出足量的DNA供分析研究和檢測鑒定,。過去幾天幾星期才能做到的事情,,用PCR幾小時便可完成。PCR技術(shù)是生物醫(yī)學領(lǐng)域中的一項革命性創(chuàng)舉和里程碑,。
產(chǎn)品特點:
豬鏈球菌基因分型PCR檢測試劑盒哪里有賣PCR引物設(shè)計的目的是為了找到一對合適的核苷酸片段,,使其能有效地擴增模板DNA序列。因此,,引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否,。
要設(shè)計引物首先要找到DNA序列的保守區(qū),。同時應(yīng)預測將要擴增的片段單鏈是否形成二級結(jié)構(gòu)。如這個區(qū)域單鏈能形成二級結(jié)構(gòu),,就要避開它,。如這一段不能形成二級結(jié)構(gòu),那就可以在這一區(qū)域設(shè)計引物,。
現(xiàn)在可以在這一保守區(qū)域里設(shè)計一對引物,。一般引物長度為15-30堿基,擴增片段長度為100-600堿基對,。
讓我們先看看P1引物,。一般引物序列中G+C含量一般為40%-60%。而且四種堿基的分布隨機,。不要有聚嘌呤或聚嘧啶存在,。否則P1引物設(shè)計的就不合理。應(yīng)重新尋找區(qū)域設(shè)計引物,。
同時引物之間也不能有互補性,,一般一對引物間不應(yīng)多于4個連續(xù)堿基的互補。
引物確定以后,,可以對引物進行必要的修飾,,例如可以在引物的5′端加酶切位點序列;標記生物素,、熒光素、等,,這對擴增的特異性影響不大,。但3′端不能進行任何修飾,因為引物的延伸是從3′端開始的,。這里還需提醒的是3′端不要終止于密碼子的第3位,,因為密碼子第3位易發(fā)生簡并,會影響擴增的特異性與效率,。
阪崎腸桿菌rpsU-dnaG 基因熒光PCR檢測試劑盒間序列(探針法)綜上所述我們可以歸納十條PCR引物的設(shè)計原則:
1,、豬鏈球菌基因分型PCR檢測試劑盒哪里有賣引物應(yīng)用核酸系列保守區(qū)內(nèi)設(shè)計并具有特異性。
2,、 產(chǎn)物不能形成二級結(jié)構(gòu),。
3、引物長度一般在15~30堿基之間,。
4,、G+C含量在40%~60%之間。
5,、堿基要隨機分布,。
6,、引物自身不能有連續(xù)4個堿基的互補。
7,、引物之間不能有連續(xù)4個堿基的互補,。
8、引物5′端可以修飾,。
9,、引物3′端不可修飾。
10,、引物3′端要避開密碼子的第3位,。
PCR引物設(shè)計的目的是找到一對合適的核苷酸片段,使其能有效地擴增模板DNA序列,。如前述,,引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否。對引物的設(shè)計不可能有一種包羅萬象的規(guī)則確保PCR的成功,,但遵循某些原則,,則有助于引物的設(shè)計。
Romas(人淋巴瘤細胞)5×106cells/瓶×2WI-38(人二倍體胚肺細胞)
CL-0127JEG-3(人絨毛膜癌細胞)5×106cells/瓶×2
IgGOthersRabbit兔IgG-Fc(185Thr/Ala,Asn284/Ser)人細胞裂解液(陽性對照)
Hepa1-6小鼠肝癌細胞Hepamousehepatomacellline1-6DMEM+10%FBS
IL6ProteinMouse重組小鼠IL6/Ierleukin-6蛋白
小鼠小腸隱窩上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
Phospho-PRAS40(Thr246)磷酸化蛋白激酶AKT底物1抗體規(guī)格:0.1ml
Xprotein(N-Terminus)乙肝病毒X蛋白抗體(N端)規(guī)格:0.2ml
Profilin1前纖維蛋白1抗體規(guī)格:0.2ml
Xprotein(C-Terminus)抗乙肝病毒X蛋白抗體(C端)規(guī)格:0.2ml
Profilin2前纖維蛋白2抗體規(guī)格:0.2ml
豬鏈球菌基因分型PCR檢測試劑盒哪里有賣ACTH(1-39),human促腎上腺皮質(zhì)激素(1-39),,人 規(guī)格:分析標準品
ACTH(1-39),rat促腎上腺皮質(zhì)激素(1-39),,大鼠 規(guī)格:分析標準品
ACTH(18-39),human促腎上腺皮質(zhì)激素(18-39),人 規(guī)格:分析標準品
ACTH(4-10),human促腎上腺皮質(zhì)激素(4-10),,人 規(guī)格:分析標準品
Adrenomedullin(22-52),human腎臟髓質(zhì)肽(22-52),,人 規(guī)格:分析標準品
AllatostatinIV咽側(cè)體抑制素Ⅳ 規(guī)格:分析標準品
Amylin,human糊精肽,人 規(guī)格:分析標準品
AngiotensinA血管緊張素A 規(guī)格:分析標準品
AngiotensinConvertingEnzymeInhibitor血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑 規(guī)格:分析標準品
Angiotensinogen(1-14),Rat血管緊張素原(1-14),,大鼠 規(guī)格:分析標準品
Anti-Kentsin肯特肽抗體 規(guī)格:分析標準品
AtrialNatriureticPeptide(1-28),rat心房利鈉肽(1-28),大鼠 規(guī)格:分析標準品
AtrialNatriureticPeptide(126-149)(rat)心房利鈉肽(126-149) 規(guī)格:分析標準品
AtrialNatriureticPeptide(126-150)(rat)心房利鈉肽(126-150),,大鼠 規(guī)格:分析標準品
AtriopeptinI(rat)心鈉素Ⅰ,大鼠 規(guī)格:分析標準品