詳細介紹
技術(shù)概論:
豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒PCR檢測試劑盒圖片聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發(fā)展起來的體外核酸擴增技術(shù),。它具有特異,、敏感,、產(chǎn)率高、快速,、簡便,、重復(fù)性好、易自動化等突出優(yōu)點,;能在一個試管內(nèi)將所要研究的目的基因或某一DNA片段于數(shù)小時內(nèi)擴增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷,;可從一根毛發(fā)、一滴血,、甚至一個細胞中擴增出足量的DNA供分析研究和檢測鑒定,。過去幾天幾星期才能做到的事情,用PCR幾小時便可完成,。PCR技術(shù)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的一項革命性創(chuàng)舉和里程碑,。
產(chǎn)品名稱 | 豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒PCR檢測試劑盒圖片 |
規(guī)格 | 50T |
價格 | 電詢 |
PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件:
豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒PCR檢測試劑盒圖片標(biāo)準的PCR反應(yīng)體系
10×擴增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul?
產(chǎn)品特點:
豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒PCR檢測試劑盒圖片PCR引物設(shè)計的目的是為了找到一對合適的核苷酸片段,使其能有效地擴增模板DNA序列,。因此,,引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否,。
要設(shè)計引物首先要找到DNA序列的保守區(qū),。同時應(yīng)預(yù)測將要擴增的片段單鏈是否形成二級結(jié)構(gòu)。如這個區(qū)域單鏈能形成二級結(jié)構(gòu),,就要避開它,。如這一段不能形成二級結(jié)構(gòu),那就可以在這一區(qū)域設(shè)計引物,。
現(xiàn)在可以在這一保守區(qū)域里設(shè)計一對引物,。一般引物長度為15-30堿基,擴增片段長度為100-600堿基對,。
讓我們先看看P1引物,。一般引物序列中G+C含量一般為40%-60%,。而且四種堿基的分布隨機。不要有聚嘌呤或聚嘧啶存在,。否則P1引物設(shè)計的就不合理,。應(yīng)重新尋找區(qū)域設(shè)計引物。
同時引物之間也不能有互補性,,一般一對引物間不應(yīng)多于4個連續(xù)堿基的互補,。
引物確定以后,可以對引物進行必要的修飾,,例如可以在引物的5′端加酶切位點序列,;標(biāo)記生物素、熒光素,、等,,這對擴增的特異性影響不大。但3′端不能進行任何修飾,,因為引物的延伸是從3′端開始的,。這里還需提醒的是3′端不要終止于密碼子的第3位,因為密碼子第3位易發(fā)生簡并,,會影響擴增的特異性與效率,。
阪崎腸桿菌rpsU-dnaG 基因熒光PCR檢測試劑盒間序列(探針法)綜上所述我們可以歸納十條PCR引物的設(shè)計原則:
1、豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒PCR檢測試劑盒圖片引物應(yīng)用核酸系列保守區(qū)內(nèi)設(shè)計并具有特異性,。
2,、 產(chǎn)物不能形成二級結(jié)構(gòu)。
3,、引物長度一般在15~30堿基之間,。
4、G+C含量在40%~60%之間,。
5,、堿基要隨機分布。
6,、引物自身不能有連續(xù)4個堿基的互補,。
7、引物之間不能有連續(xù)4個堿基的互補,。
8,、引物5′端可以修飾。
9,、引物3′端不可修飾,。
10、引物3′端要避開密碼子的第3位。
PCR引物設(shè)計的目的是找到一對合適的核苷酸片段,,使其能有效地擴增模板DNA序列,。如前述,引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否,。對引物的設(shè)計不可能有一種包羅萬象的規(guī)則確保PCR的成功,,但遵循某些原則,則有助于引物的設(shè)計,。
人腦血管周細胞(HBVP)(5×105)人臍靜脈平滑肌細胞MDA-MB-231(ATCC來源),人癌細胞
CM-R044大鼠結(jié)腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
SELPOthersHuman人SELP/selectinP/P-selectin人細胞裂解液(陽性對照)
EL4小鼠淋巴瘤細胞EL4mouselymphomacellsRPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
白細胞介素-17超家族
小鼠胎兒真皮成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
CD36/PAS-4CD36抗體規(guī)格:0.1ml
CD4CD4抗體規(guī)格:0.1ml
CD7CD7抗體規(guī)格:0.2ml
CD8CD8抗體規(guī)格:0.1ml
CD9/MRP-1CD9蛋白抗體規(guī)格:0.1ml
豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒PCR檢測試劑盒圖片Kinetensin運動升壓素 規(guī)格:分析標(biāo)準品,≥99.5%(GC)
Laminin(925-933)層粘連蛋白(925-933) 規(guī)格:分析標(biāo)準品,≥99.5%(GC)
Laminin(929-933)層粘連蛋白(929-933) 規(guī)格:分析標(biāo)準品,≥99.5%(GC)
LamininNonapeptide,Amide層粘連蛋白九肽,,酰胺 規(guī)格:分析標(biāo)準品,≥99.5%(GC)
Leucopyrokinin(4-8);PheromonotropicPentapeptide白細胞焦激肽(4-8);Pheromonotropic五肽 規(guī)格:分析標(biāo)準品,≥99.5%(GC)
LHRH(4-10)黃體生成激素釋放激素(4-10) 規(guī)格:分析標(biāo)準品,≥99.5%(GC)
LymphocyteActivatingPentapeptide淋巴細胞激活五肽 規(guī)格:分析標(biāo)準品,≥99.5%(GC)
Melittin(Mellitin)蜂毒素 規(guī)格:分析標(biāo)準品,≥99.5%(HPLC)
MetamorphosinAMetamorphosinA 規(guī)格:分析標(biāo)準品,≥99.7%(GC
Neo-Kyotorphin新京都肽 規(guī)格:分析標(biāo)準品,≥99.8%(GC)
NeurokininA(4-10)神經(jīng)激肽A(4-10) 規(guī)格:分析標(biāo)準品,≥99.8%(GC)
NeuropeptideW-30(human)神經(jīng)肽W-30,,人 規(guī)格:分析標(biāo)準品,≥99.8%(GC)
NeuropeptideW-30(rat)神經(jīng)肽W-30,,大鼠 規(guī)格:分析標(biāo)準品,≥99.8%(GC)
Neurotensin(1-8)神經(jīng)降壓素(1-8) 規(guī)格:分析標(biāo)準品,≥99.9%(GC)
NeuropeptideY(13-36)(porcine)神經(jīng)肽Y(13-36),豬 規(guī)格:分析標(biāo)準品,10ng/μl溶于環(huán)己烷