詳細(xì)介紹
技術(shù)概論:
轉(zhuǎn)基因植物NOS基因PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發(fā)展起來(lái)的體外核酸擴(kuò)增技術(shù)。它具有特異,、敏感,、產(chǎn)率高,、快速、簡(jiǎn)便,、重復(fù)性好,、易自動(dòng)化等突出優(yōu)點(diǎn);能在一個(gè)試管內(nèi)將所要研究的目的基因或某一DNA片段于數(shù)小時(shí)內(nèi)擴(kuò)增至十萬(wàn)乃至百萬(wàn)倍,使肉眼能直接觀察和判斷,;可從一根毛發(fā),、一滴血、甚至一個(gè)細(xì)胞中擴(kuò)增出足量的DNA供分析研究和檢測(cè)鑒定,。過(guò)去幾天幾星期才能做到的事情,,用PCR幾小時(shí)便可完成。PCR技術(shù)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的一項(xiàng)革命性創(chuàng)舉和里程碑,。
產(chǎn)品名稱 | 轉(zhuǎn)基因植物NOS基因PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格 |
規(guī)格 | 50T |
價(jià)格 | 電詢 |
PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件:
轉(zhuǎn)基因植物NOS基因PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul?
產(chǎn)品特點(diǎn):
轉(zhuǎn)基因植物NOS基因PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格PCR引物設(shè)計(jì)的目的是為了找到一對(duì)合適的核苷酸片段,,使其能有效地?cái)U(kuò)增模板DNA序列。因此,,引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否,。
要設(shè)計(jì)引物首先要找到DNA序列的保守區(qū)。同時(shí)應(yīng)預(yù)測(cè)將要擴(kuò)增的片段單鏈?zhǔn)欠裥纬啥?jí)結(jié)構(gòu),。如這個(gè)區(qū)域單鏈能形成二級(jí)結(jié)構(gòu),,就要避開(kāi)它。如這一段不能形成二級(jí)結(jié)構(gòu),,那就可以在這一區(qū)域設(shè)計(jì)引物,。
現(xiàn)在可以在這一保守區(qū)域里設(shè)計(jì)一對(duì)引物。一般引物長(zhǎng)度為15-30堿基,,擴(kuò)增片段長(zhǎng)度為100-600堿基對(duì),。
讓我們先看看P1引物。一般引物序列中G+C含量一般為40%-60%,。而且四種堿基的分布隨機(jī),。不要有聚嘌呤或聚嘧啶存在。否則P1引物設(shè)計(jì)的就不合理,。應(yīng)重新尋找區(qū)域設(shè)計(jì)引物,。
同時(shí)引物之間也不能有互補(bǔ)性,一般一對(duì)引物間不應(yīng)多于4個(gè)連續(xù)堿基的互補(bǔ),。
引物確定以后,,可以對(duì)引物進(jìn)行必要的修飾,例如可以在引物的5′端加酶切位點(diǎn)序列,;標(biāo)記生物素,、熒光素,、等,,這對(duì)擴(kuò)增的特異性影響不大,。但3′端不能進(jìn)行任何修飾,因?yàn)橐锏难由焓菑?′端開(kāi)始的,。這里還需提醒的是3′端不要終止于密碼子的第3位,,因?yàn)槊艽a子第3位易發(fā)生簡(jiǎn)并,會(huì)影響擴(kuò)增的特異性與效率,。
阪崎腸桿菌rpsU-dnaG 基因熒光PCR檢測(cè)試劑盒間序列(探針?lè)ǎ┚C上所述我們可以歸納十條PCR引物的設(shè)計(jì)原則:
1,、轉(zhuǎn)基因植物NOS基因PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格引物應(yīng)用核酸系列保守區(qū)內(nèi)設(shè)計(jì)并具有特異性。
2,、 產(chǎn)物不能形成二級(jí)結(jié)構(gòu),。
3、引物長(zhǎng)度一般在15~30堿基之間,。
4,、G+C含量在40%~60%之間。
5,、堿基要隨機(jī)分布,。
6、引物自身不能有連續(xù)4個(gè)堿基的互補(bǔ),。
7,、引物之間不能有連續(xù)4個(gè)堿基的互補(bǔ)。
8,、引物5′端可以修飾,。
9、引物3′端不可修飾,。
10,、引物3′端要避開(kāi)密碼子的第3位。
PCR引物設(shè)計(jì)的目的是找到一對(duì)合適的核苷酸片段,,使其能有效地?cái)U(kuò)增模板DNA序列,。如前述,引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否,。對(duì)引物的設(shè)計(jì)不可能有一種包羅萬(wàn)象的規(guī)則確保PCR的成功,,但遵循某些原則,則有助于引物的設(shè)計(jì),。
TE-10(人食管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2HCC1428(人癌細(xì)胞)
CM-M055小鼠卵巢成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
NAALADL1OthersMouse小鼠NAALADL1人細(xì)胞裂解液(陽(yáng)性對(duì)照)
LLC小鼠Lewis肺癌細(xì)胞LLCmicewithLewislungcancercellsDMEM+10%FBS
IL12BProteinMouse重組小鼠IL12B/IL-12B蛋白
小鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
5-HTR2B5-羥色胺受體2B抗體規(guī)格:0.2ml
5-HTR2A5-羥色胺受體2A抗體規(guī)格:0.2ml
5-HTT5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體規(guī)格:0.2ml
5-HTR35-羥色胺受體3抗體規(guī)格:0.2ml
5-HTR45-羥色胺受體4抗體規(guī)格:0.2ml
轉(zhuǎn)基因植物NOS基因PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格3',5'-Dihydroxyacetophenone3',5'-二羥基苯乙酮(>98.0%(GC)) 規(guī)格:含量測(cè)定
3',5'-Dibenzyloxyacetophenone3',5'-芐氧基苯乙酮(>97.0%(GC)) 規(guī)格:含量測(cè)定
3,5-DimethoxybenzylAlcohol3,5-二甲氧基芐醇(>98.0%(GC)) 規(guī)格:含量測(cè)定
3,5-DimethoxybenzylBromide3,5-二甲氧基芐溴(>96.0%(GC)) 規(guī)格:含量測(cè)定
3,5-Dibromo-1-trimethylsilylbenzene3,5-二溴-1-三甲基硅基苯(>97.0%(GC)) 規(guī)格:含量測(cè)定
3',5'-Dibromo-4'-hydroxyacetophenone3',5'-二溴-4'-羥基苯乙酮(>97.0%(GC)) 規(guī)格:含量測(cè)定
3,5-Dihydroxybenzamide3,5-二羥基苯甲酰胺(>98.0%(HPLC)(N)) 規(guī)格:含量測(cè)定
3,5-Dibenzyloxybenzaldehyde 3,5-二芐氧基苯(>98.0%(GC)) 規(guī)格:含量測(cè)定
Hexaphenylbenzene六苯基苯 規(guī)格:含量測(cè)定
1,3,5-Tris(4-carboxyphenyl)benzene1,3,5-三(4-羧基苯基)苯(>98.0%(HPLC)) 規(guī)格:含量測(cè)定
1,3,5-Tris(bromomethyl)benzene1,3,5-三(溴甲基)苯(>98.0%(GC)) 規(guī)格:含量測(cè)定
Naphthacene并四苯(>98.0%(HPLC)) 規(guī)格:含量測(cè)定
Naphthacene(purifiedbysublimation)并四苯(升華提純) 規(guī)格:含量測(cè)定
Pentacene(purifiedbysublimation)并五苯(以升華法純化) 規(guī)格:含量測(cè)定
PigmentBlue15(purifiedbysublimation)顏料藍(lán)15(以升華法純化) 規(guī)格:含量測(cè)定