詳細(xì)介紹
通用原則:
1,, 歐洲放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒先選擇好探針,,然后設(shè)計引物使其盡可能的靠近于探針,。
2,, 擴(kuò)增子的長度應(yīng)不超過400bp,理想的能在100-150bp內(nèi),,擴(kuò)增片斷約短,,有效的擴(kuò)增反應(yīng)就越容易獲得。較短的擴(kuò)增片斷也容易保證分析的一致性
3,, 保持GC含量在20%和80%之間,,GC富含區(qū)容易產(chǎn)生非特異反應(yīng),從而會導(dǎo)致擴(kuò)增效率的降低,,及在SG分析中非特異信號,。
4, 為了保證效率和重復(fù)性,,應(yīng)避免重復(fù)的核苷酸序列,,尤其是G(不能有4個連續(xù)的G)
5, 將引物和探針互相進(jìn)行配對檢測,,以避免二聚體和發(fā)卡結(jié)構(gòu)的形成,。
b),探針設(shè)計指導(dǎo)
1,在設(shè)計引物之前設(shè)計探針
2,,探針的Tm值應(yīng)在68-70℃之間,,如果是目測探針,則要仔細(xì)審查GC富含區(qū),。
3,,探針的5’端要避免有鳥氨酸,5’G會有淬滅作用,,即使被切割下來這種淬滅作用也還會存在
4,,選擇C多于G的鏈作探針,G的含量多于C會降低反應(yīng)效率,,這時就應(yīng)選擇配對的另一條鏈作為探針,。
6, 探針應(yīng)盡可能的短,,不要超過30個bp,。
7, 檢測探針的DNA折疊和二級結(jié)構(gòu),。
產(chǎn)品名稱 | 歐洲放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒 |
英文名稱 | Actinomyces europaeus |
編號 | BJP2031 |
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原理:
產(chǎn)品僅用于科研所謂實時熒光定量PCR技術(shù),,是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法,。
檢測方法
1.SYBRGreenⅠ法:
在PCR反應(yīng)體系中,加入過量SYBR熒光染料,,SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,,發(fā)射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步,。
SYBR定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法:
探針完整時,報告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收,;PCR擴(kuò)增時,,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,,即每擴(kuò)增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步,。
產(chǎn)品特點:
全新的熱啟動DNA聚合酶-Hot Start Taq DNA聚合酶,可在PCR反應(yīng)的過程中抑制非特異擴(kuò)增,,從而最大限度地減少非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物的產(chǎn)生,,提高熒光定量PCR反應(yīng)的特異性,;
采用新型的熒光染料EvaGreen,與傳統(tǒng)熒光染料相比,,對PCR反應(yīng)抑制更小,,而且熒光信號更強,檢測靈敏度更高,;產(chǎn)品僅用于科研
含有UNG的試劑盒可以防止PCR產(chǎn)物污染體系,,進(jìn)而有效防止實驗過程中PCR產(chǎn)物的交叉污染;
TaqMan熒光定量PCR試劑盒提供了除引物,、探針,、模板外的所有實驗所需組分,并配備2×Buffer,,可完成不同類型熒光探針的實時熒光定量PCR反應(yīng),,方便用戶使用;
試劑盒的通用性強,,可適用于Roche的Light Cycler,、ABI各型實時熒光定量PCR儀和。
服務(wù)流程:
1.客戶認(rèn)真寫好訂單,,提供待檢基因相關(guān)信息,;
2.簽訂技術(shù)服務(wù)合同,支付預(yù)付款(30-50%),;
3.設(shè)計合成定量PCR引物(或客戶提供文獻(xiàn)引物委托本公司合成),;
4.DNA/RNA的抽提、定量,、RNA反轉(zhuǎn)錄,;
5.PCR預(yù)實驗,主要檢測引物的特異性和擴(kuò)增效率,;
6.正式定量實驗:對所有樣品上機(jī)檢測,;
7.實驗結(jié)果和數(shù)據(jù)分析,,形成報告,。產(chǎn)品僅用于科研
以下是公司*產(chǎn)品:
糖原PAS染色液Rat acetylcholine,ACH ELISA Kit
糖原PAS染色液Rat Vitamin C,VC ELISA Kit
糖原PAS染色液(細(xì)胞)Rat major histocompatibility complexⅢ,MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ ELISA Kit
糖原PAS染色液(細(xì)胞)Rat 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 ELISA Kit
AB-PAS染色液Rat Vitamin B6,VB6 ELISA Kit
AB-PAS染色液Rat Vitamin B6,VB6 ELISA Kit
糖原PAS快速染色液Rat fβCG ELISA Kit
糖原D-PAS染色液(淀粉酶消化法)Rat Vitamin D3,VD3 ELISA Kit
糖原D-PAS染色液(淀粉酶消化法)Rat Vitamin D2,VD2 ELISA Kit
糖原PAS染色液(真菌)Rat Vitamin E,VE ELISA Kit
人胰島素樣生長因子2(IGF-2)豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)抗體(IgG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
人胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA Kit 禽流感A型抗體診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)(檢血清/血漿/蛋黃)
人干擾素γ (IFNγ)ELISA Kit 犬瘟熱病毒抗原(CDV)快速檢測卡(檢眼結(jié)膜分泌物\鼻液\尿液\血清\血漿,)
人細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1)(CD54)ELISA KIT 犬狂犬病毒抗原檢測卡(檢唾液/血清,10條/盒)
人肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA kit 豬瘟病毒抗體診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
人gp130豬圓環(huán)病毒2型抗體診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)豬口蹄疫3ABC抗體(IgG)診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
人生長因子(GH)豬偽狂犬gE鑒別ELISA診斷試劑盒
人膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)豬口蹄疫病毒O型抗體診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
人粒細(xì)胞克隆刺激因子(G-CSF)牛,、羊布氏桿菌抗體快速檢測卡(檢血清/血漿/全血,,)