詳細(xì)介紹
服務(wù)流程:
1.客戶認(rèn)真寫好訂單,,提供待檢基因相關(guān)信息,;
2.簽訂技術(shù)服務(wù)合同,支付預(yù)付款(30-50%),;
3.設(shè)計(jì)合成定量PCR引物(或客戶提供文獻(xiàn)引物委托本公司合成),;
4.DNA/RNA的抽提,、定量、RNA反轉(zhuǎn)錄,;
5.PCR預(yù)實(shí)驗(yàn),,主要檢測引物的特異性和擴(kuò)增效率;
6.正式定量實(shí)驗(yàn):對所有樣品上機(jī)檢測,;
7.實(shí)驗(yàn)結(jié)果和數(shù)據(jù)分析,,形成報(bào)告。產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 | 衣氏放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒 |
英文名稱 | Actinomyces israelii |
編號 | BJP2033 |
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原理:
產(chǎn)品僅用于科研所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),,是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),,利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法,。
檢測方法
1.SYBRGreenⅠ法:
在PCR反應(yīng)體系中,,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,,發(fā)射熒光信號,,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步,。
SYBR定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法:
探針完整時(shí),,報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收;PCR擴(kuò)增時(shí),,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,,使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,,即每擴(kuò)增一條DNA鏈,,就有一個(gè)熒光分子形成,實(shí)現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步,。
產(chǎn)品特點(diǎn):
衣氏放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒 全新的熱啟動(dòng)DNA聚合酶-Hot Start Taq DNA聚合酶,,可在PCR反應(yīng)的過程中抑制非特異擴(kuò)增,從而最大限度地減少非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物的產(chǎn)生,,提高熒光定量PCR反應(yīng)的特異性,;
采用新型的熒光染料EvaGreen,與傳統(tǒng)熒光染料相比,,對PCR反應(yīng)抑制更小,,而且熒光信號更強(qiáng),檢測靈敏度更高,;產(chǎn)品僅用于科研
含有UNG的試劑盒可以防止PCR產(chǎn)物污染體系,,進(jìn)而有效防止實(shí)驗(yàn)過程中PCR產(chǎn)物的交叉污染;
TaqMan熒光定量PCR試劑盒提供了除引物,、探針,、模板外的所有實(shí)驗(yàn)所需組分,,并配備2×Buffer,可完成不同類型熒光探針的實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng),,方便用戶使用,;
試劑盒的通用性強(qiáng),可適用于Roche的Light Cycler,、ABI各型實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀和,。
以下是公司*產(chǎn)品:
黏液卡紅染色液Rat omentin ELISA Kit
黏液卡紅染色液Rat peroxisome proliferators activator receptors alpha,PPAR-α ELISA Kit
黏液HID-AB染色液Rat major histocompatibility complexⅠ,H-1Ⅰ ELISA Kit
黏液HID-AB染色液Rat amyloid beta peptide 1-42,Aβ1-42 ELISA Kit
阿利新藍(lán)染色液(pH2.5)Rat Poly ADP ribose polymerase,PARP ELISA Kit
阿利新藍(lán)染色液(pH2.5)Rat von Willebrand Factor cleaving protease,ADAMTS-13/vWF-cp ELISA Kit
阿利新藍(lán)染色液(pH1.0)Rat cluster of differentiation 8,CD8 ELISA Kit
阿利新藍(lán)染色液(pH1.0)Rat typeⅠ procollagen,PC I ELISA Kit
阿利新藍(lán)染色液-A液(pH2.5)Rat procollagen Ⅰ N-terminal peptide,PⅠNP ELISA Kit
阿利新藍(lán)染色液-A液(pH1.0)Rat Cross-linked Carboxy-terminal telopeptide of type Ⅰ collagen,ⅠCTP ELISA Kit
人FA素總量快速檢測卡(檢飼料/糧油,靈敏度10ppb,,消線法)
人E-Selectin ELISA kit 黃曲B1 ELISA 檢測試劑盒(檢組織/飼料/糧食,,靈敏度0.04ppb,一步法)
人紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA Kit 嘔吐毒素酶免檢測試劑盒(檢飼料/糧食,靈敏度3ppb,,一步法)
人紅細(xì)胞生成素受體(EPO sR)T-2毒素檢測試劑盒(檢飼料/花生/大米,,靈敏度0.05ppb,一步法)
人噬酸性細(xì)胞趨化因子-2(Eotaxin-2)伏馬菌素B1酶聯(lián)免疫定量檢測試劑盒(檢飼料/玉米等,,靈敏度3ppb,,一步法)
人噬酸性細(xì)胞趨化因子(Eotaxin)赭曲霉A酶聯(lián)免疫測試盒
人EG-VEGF微囊藻毒素ELISA試劑盒
人表皮細(xì)胞生長因子受體(EGFR)黃M1檢測試劑盒(檢乳制品,靈敏度0.03ppb,,一步法)
人表皮細(xì)胞生長因子(EGF)B1檢測試劑盒(檢飼料/食品類,,靈敏度0.04ppb,一步法)
人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)玉米赤霉烯酮試劑盒(檢飼料/玉米/花生/大米,靈敏度0.1ppb,,一步法)
通用原則:
1,, 先選擇好探針,然后設(shè)計(jì)引物使其盡可能的靠近于探針,。
2,, 擴(kuò)增子的長度應(yīng)不超過400bp,理想的能在100-150bp內(nèi),,擴(kuò)增片斷約短,,有效的擴(kuò)增反應(yīng)就越容易獲得。較短的擴(kuò)增片斷也容易保證分析的一致性
3,, 保持GC含量在20%和80%之間,,GC富含區(qū)容易產(chǎn)生非特異反應(yīng),從而會(huì)導(dǎo)致擴(kuò)增效率的降低,,及在SG分析中非特異信號,。
4, 為了保證效率和重復(fù)性,,應(yīng)避免重復(fù)的核苷酸序列,,尤其是G(不能有4個(gè)連續(xù)的G)
5, 將引物和探針互相進(jìn)行配對檢測,以避免二聚體和發(fā)卡結(jié)構(gòu)的形成,。
b),探針設(shè)計(jì)指導(dǎo)
1,,在設(shè)計(jì)引物之前設(shè)計(jì)探針
2,,探針的Tm值應(yīng)在68-70℃之間,如果是目測探針,,則要仔細(xì)審查GC富含區(qū),。
3,探針的5’端要避免有鳥氨酸,,5’G會(huì)有淬滅作用,,即使被切割下來這種淬滅作用也還會(huì)存在
4,選擇C多于G的鏈作探針,,G的含量多于C會(huì)降低反應(yīng)效率,,這時(shí)就應(yīng)選擇配對的另一條鏈作為探針。
6,, 探針應(yīng)盡可能的短,,不要超過30個(gè)bp。
7,, 檢測探針的DNA折疊和二級結(jié)構(gòu),。