古柏線蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序,；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度,；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù),；5．PCR 反應(yīng)液的配制,；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué),；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物,；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

    全新的熱啟動(dòng)DNA聚合酶-Hot Start Taq DNA聚合酶,，可在PCR反應(yīng)的過程中抑制非特異擴(kuò)增,，從而最大限度地減少非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物的產(chǎn)生，提高熒光定量PCR反應(yīng)的特異性,；
    采用新型的熒光染料EvaGreen,，與傳統(tǒng)熒光染料相比，對(duì)PCR反應(yīng)抑制更小,，而且熒光信號(hào)更強(qiáng),，檢測靈敏度更高；產(chǎn)品僅用于科研
    含有UNG的試劑盒可以防止PCR產(chǎn)物污染體系,，進(jìn)而有效防止實(shí)驗(yàn)過程中PCR產(chǎn)物的交叉污染；
TaqMan熒光定量PCR試劑盒提供了除引物,、探針,、模板外的所有實(shí)驗(yàn)所需組分，并配備2×Buffer,，可完成不同類型熒光探針的實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng),，方便用戶使用；
    試劑盒的通用性強(qiáng)，可適用于Roche的Light Cycler,、ABI各型實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀和,。

產(chǎn)品名稱	古柏線蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱	Cooperia spp.
編號(hào)	BJP2276

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通用原則：
1， 先選擇好探針,，然后設(shè)計(jì)引物使其盡可能的靠近于探針,。
2， 擴(kuò)增子的長度應(yīng)不超過400bp,，理想的能在100－150bp內(nèi),，擴(kuò)增片斷約短，有效的擴(kuò)增反應(yīng)就越容易獲得,。較短的擴(kuò)增片斷也容易保證分析的一致性
3,， 保持GC含量在20％和80％之間，GC富含區(qū)容易產(chǎn)生非特異反應(yīng),，從而會(huì)導(dǎo)致擴(kuò)增效率的降低,，及在SG分析中非特異信號(hào)。
4,， 為了保證效率和重復(fù)性,，應(yīng)避免重復(fù)的核苷酸序列，尤其是G（不能有4個(gè)連續(xù)的G）
5,， 將引物和探針互相進(jìn)行配對(duì)檢測,，以避免二聚體和發(fā)卡結(jié)構(gòu)的形成。
b）,，探針設(shè)計(jì)指導(dǎo)
1,，在設(shè)計(jì)引物之前設(shè)計(jì)探針
2，探針的Tm值應(yīng)在68－70℃之間,，如果是目測探針,，則要仔細(xì)審查GC富含區(qū)。
3,，探針的5’端要避免有鳥氨酸,，5’G會(huì)有淬滅作用，即使被切割下來這種淬滅作用也還會(huì)存在
4,，選擇C多于G的鏈作探針,，G的含量多于C會(huì)降低反應(yīng)效率，這時(shí)就應(yīng)選擇配對(duì)的另一條鏈作為探針,。
6,， 探針應(yīng)盡可能的短，不要超過30個(gè)bp,。
7,， 檢測探針的DNA折疊和二級(jí)結(jié)構(gòu)。
古柏線蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒原理:
產(chǎn)品僅用于科研所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
檢測方法
1.SYBRGreenⅠ法：
在PCR反應(yīng)體系中,，加入過量SYBR熒光染料,，SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后，發(fā)射熒光信號(hào),，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射任何熒光信號(hào),，從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
SYBR定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時(shí),，報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收,；PCR擴(kuò)增時(shí)，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,，使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào)，即每擴(kuò)增一條DNA鏈,，就有一個(gè)熒光分子形成,，實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。
以下是公司*產(chǎn)品：
肌紅蛋白鹽酸可樂定

肌紅蛋白基三基硅烷

纖粘連蛋白基三基硅烷

纖粘連蛋白苯基三基三溴化銨

β-乳球蛋白苯基三基三溴化銨

β-乳球蛋白2-氨基-5-硝基吡啶

β-乳球蛋白2-氨基-5-硝基吡啶

β-乳球蛋白2-氨基-5-硝基吡啶

刀豆素A三氟烷磺酰氯

PUC18質(zhì)粒三氟烷磺酰氯
厭氧液體培養(yǎng)基變色酸

厭氧瓊脂變色酸二鈉鹽

雙歧桿菌生化用基礎(chǔ)培養(yǎng)基派洛寧Y

EC-MUG培養(yǎng)基派洛寧B

MUG營養(yǎng)瓊脂（NA -MUG）地衣紅

MMO-MUG藏紅T

MMO-MUG酚紅

改良磷酸鹽緩沖液（PSB）苯酚紅鈉鹽

DFI瓊脂（阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基）胭脂紅

DFI瓊脂（阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基）固紅TR
服務(wù)流程:
1.客戶認(rèn)真寫好訂單,，提供待檢基因相關(guān)信息,；
2.簽訂技術(shù)服務(wù)合同，支付預(yù)付款（30-50%),；
3.設(shè)計(jì)合成定量PCR引物（或客戶提供文獻(xiàn)引物委托本公司合成）,；
4.DNA/RNA的抽提、定量,、RNA反轉(zhuǎn)錄,；
5.PCR預(yù)實(shí)驗(yàn)，主要檢測引物的特異性和擴(kuò)增效率,；
6.正式定量實(shí)驗(yàn)：對(duì)所有樣品上機(jī)檢測,；
7.實(shí)驗(yàn)結(jié)果和數(shù)據(jù)分析，形成報(bào)告,。產(chǎn)品僅用于科研