潰瘍棒桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度,；3．反應(yīng)時間,；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制,；6．PCR技術(shù)的基本原理,；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物,；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件,。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

    全新的熱啟動DNA聚合酶-Hot Start Taq DNA聚合酶，可在PCR反應(yīng)的過程中抑制非特異擴(kuò)增,，從而最大限度地減少非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物的產(chǎn)生,，提高熒光定量PCR反應(yīng)的特異性；
    采用新型的熒光染料EvaGreen,，與傳統(tǒng)熒光染料相比,，對PCR反應(yīng)抑制更小,，而且熒光信號更強(qiáng)，檢測靈敏度更高,；產(chǎn)品僅用于科研
    含有UNG的試劑盒可以防止PCR產(chǎn)物污染體系,，進(jìn)而有效防止實(shí)驗(yàn)過程中PCR產(chǎn)物的交叉污染；
TaqMan熒光定量PCR試劑盒提供了除引物,、探針,、模板外的所有實(shí)驗(yàn)所需組分，并配備2×Buffer,，可完成不同類型熒光探針的實(shí)時熒光定量PCR反應(yīng),，方便用戶使用；
    試劑盒的通用性強(qiáng),，可適用于Roche的Light Cycler,、ABI各型實(shí)時熒光定量PCR儀和。

產(chǎn)品名稱	潰瘍棒桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱	Corynebacterium ulcerans
編號	BJP2284

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通用原則：
1,， 先選擇好探針,，然后設(shè)計(jì)引物使其盡可能的靠近于探針。
2,， 擴(kuò)增子的長度應(yīng)不超過400bp,，理想的能在100－150bp內(nèi)，擴(kuò)增片斷約短,，有效的擴(kuò)增反應(yīng)就越容易獲得。較短的擴(kuò)增片斷也容易保證分析的一致性
3,， 保持GC含量在20％和80％之間,，GC富含區(qū)容易產(chǎn)生非特異反應(yīng)，從而會導(dǎo)致擴(kuò)增效率的降低,，及在SG分析中非特異信號,。
4， 為了保證效率和重復(fù)性,，應(yīng)避免重復(fù)的核苷酸序列,，尤其是G（不能有4個連續(xù)的G）
5， 將引物和探針互相進(jìn)行配對檢測,，以避免二聚體和發(fā)卡結(jié)構(gòu)的形成,。
b），探針設(shè)計(jì)指導(dǎo)
1,，在設(shè)計(jì)引物之前設(shè)計(jì)探針
2,，探針的Tm值應(yīng)在68－70℃之間，如果是目測探針,，則要仔細(xì)審查GC富含區(qū),。
3,，探針的5’端要避免有鳥氨酸，5’G會有淬滅作用,，即使被切割下來這種淬滅作用也還會存在
4,，選擇C多于G的鏈作探針，G的含量多于C會降低反應(yīng)效率,，這時就應(yīng)選擇配對的另一條鏈作為探針,。
6， 探針應(yīng)盡可能的短,，不要超過30個bp,。
7， 檢測探針的DNA折疊和二級結(jié)構(gòu),。
潰瘍棒桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒原理:
產(chǎn)品僅用于科研所謂實(shí)時熒光定量PCR技術(shù),，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法,。
檢測方法
1.SYBRGreenⅠ法：
在PCR反應(yīng)體系中，加入過量SYBR熒光染料,，SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,，發(fā)射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步,。
SYBR定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時，報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收,；PCR擴(kuò)增時,，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解，使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,，即每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成,，實(shí)現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步,。
以下是公司*產(chǎn)品：
5-核黃素磷酸鈉鹽二水物D-纈氨醇

維生素B3D-纈氨醇

維生素B3噻吩-2，5-二羧酸

維生素B3噻吩-2,，5-二羧酸

異煙酸噻吩-2,，5-二羧酸

異煙酸5-基異噁唑-4-酸

維生素B55-基異噁唑-4-酸

維生素B53-溴-4-腈

維生素B53-溴-4-腈

維生素B62-溴-5-腈
Todd-Hewitt 肉湯橙黃Ⅰ

牛心湯培養(yǎng)基俾氏麥棕Y

BBL瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)丫啶橙

BL瓊脂培養(yǎng)基丫啶黃素

MFC培養(yǎng)基鹽酸丫啶

改良胰蛋白胨大豆肉湯（mTSB）鹽酸丫黃素

TPY瓊脂培養(yǎng)基基橙

嗜冷菌計(jì)數(shù)瓊脂基紫

緩沖蛋白胨水（BPW）基紫6B

緩沖蛋白胨水（BPW）溴酚紫
服務(wù)流程:
1.客戶認(rèn)真寫好訂單，提供待檢基因相關(guān)信息,；
2.簽訂技術(shù)服務(wù)合同,，支付預(yù)付款（30-50%)；
3.設(shè)計(jì)合成定量PCR引物（或客戶提供文獻(xiàn)引物委托本公司合成）；
4.DNA/RNA的抽提,、定量,、RNA反轉(zhuǎn)錄；
5.PCR預(yù)實(shí)驗(yàn),，主要檢測引物的特異性和擴(kuò)增效率,；
6.正式定量實(shí)驗(yàn)：對所有樣品上機(jī)檢測；
7.實(shí)驗(yàn)結(jié)果和數(shù)據(jù)分析,，形成報(bào)告,。產(chǎn)品僅用于科研