詳細介紹
實時熒光定量PCR:
巨細胞病毒探針法熒光定量PCR試劑盒實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限,實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度,,并記錄在電腦軟件之中,,通過對每個樣品Ct值的計算,根據(jù)標準曲線獲得定量結果,。因此,,實時熒光定量PCR無需內標是建立在兩個基礎之上的:產(chǎn)品僅用于科研
1)Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數(shù)時,剛剛進入真正的指數(shù)擴增期(對數(shù)期),,此時微小誤差尚未放大,,因此Ct值的重現(xiàn)性*,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內擴增,,得到的Ct值是恒定的,。
2)Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關系,可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定,,因此,,實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內標法是一種準確的,、值得信賴的科學方法,。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確,重現(xiàn)性的定量方法,,已得到全世界的*,,廣泛用于基因表達研究、轉基因研究,,藥物療效考核,、病原體檢測等諸多領域。
定量PCR除可以對樣品的初始濃度進行準確定量外,,還有其它多種豐富的應用,。還包括基因表達調控情況的分析、等位基因的分析等,。產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 | 巨細胞病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 |
英文名稱 | Cytomegalovirus(CMV) |
編號 | BJP2305 |
熒光化學物質:
實時熒光定量PCR所使用的熒光物質可分為兩種:熒光探針和熒光染料?,F(xiàn)將其原理簡述如下:
1. TaqMan熒光探針:PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團,。探針完整時,,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收,;PCR擴增時,,Taq酶的5'-3'外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成*同步,。而新型TaqMan-MGB探針使該技術既可進行基因定量分析,又可分析基因突變(SNP),,有望成為基因診斷和個體化用藥分析的技術平臺,。
2. SYBR熒光染料:在PCR反應體系中,加入過量SYBR熒光染料,,SYBR熒光染料非特異性地摻入DNA雙鏈后,,發(fā)射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步,。SYBR僅與雙鏈DNA進行結合,因此可以通過溶解曲線,,確定PCR反應是否特異,。
3. 分子信標:是一種在5和3末端自身形成一個8個堿基左右的發(fā)夾結構的莖環(huán)雙標記寡核苷酸探針,兩端的核酸序列互補配對,,導致熒光基團與淬滅基團緊緊靠近,,不會產(chǎn)生熒光。PCR產(chǎn)物生成后,,退火過程中,,分子信標中間部分與特定DNA序列配對,熒光基因與淬滅基因分離產(chǎn)生熒光 ,。
探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖?
以下產(chǎn)品是公司正在*產(chǎn)品:
葡聚糖4-氟-2-硝基苯
葡聚糖4-氟-2-硝基苯
葡聚糖4-氟-3-硝基苯
葡聚糖4-氟-3-硝基苯
葡聚糖2-氟苯酮
葡聚糖2-氟苯酮
葡聚糖T32-氟苯酮
葡聚糖T34-氯-2-氟苯酸
葡聚糖T44-氯-2-氟苯酸
葡聚糖T44-氯-2-氟苯酸
巨細胞病毒探針法熒光定量PCR試劑盒豆粉瓊脂精氨酸瓊脂糖凝膠4B
CLED培養(yǎng)基賴氨酸瓊脂糖凝膠4B
大腸桿菌顯色培養(yǎng)基(ECA)瓊脂糖凝膠6B
大腸桿菌和大腸菌群液體顯色培養(yǎng)基(LECC)氨基瓊脂糖凝膠4B
大腸桿菌和大腸菌群顯色培養(yǎng)基(ECCA)羧基瓊脂糖凝膠4B
大腸菌群顯色培養(yǎng)基(CA)NHS活化瓊脂糖凝膠4FF
沙門氏菌顯色培養(yǎng)基(SA)環(huán)氧瓊脂糖凝膠6B
李斯特氏菌顯色培養(yǎng)菌(LA)Con A瓊脂糖凝膠4B
大腸桿菌O157顯色培養(yǎng)基苯脒瓊脂糖凝膠4FF
阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基GST瓊脂糖凝膠4FF
熒光定量PCR服務:
簡介:產(chǎn)品僅用于科研實時熒光定量PCR技術于1996年由美國Applied Biosystems公司推出,,該技術不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規(guī)PCR相比,,它具有特異性更強,、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點,,目前該技術已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化,;比較不同組織的mRNA表達差異;驗證基因芯片,,siRNA干擾的實驗結果等,。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術服務,,全部實驗皆使用進口試劑完成,主要定量PCR儀器,。
1,、熒光定量PCR服務要求:
(01)請您提供新鮮的且盡量多的材料;或直接提供純化好的總RNA(大于 5 ug/樣品),;或直接提供純化好的DNA(大于 5 ug/樣品),。
(02)請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。
(03)請?zhí)峁┍M可能詳細的背景資料:DNA/RNA 來源等
2,、熒光定量PCR操作程序
(01)引物(探針)設計與合成,。
(02)提取DNA/RNA,樣本逆轉錄成cDNA,。
(03)進行Real Time PCR實驗,,進行實驗結果分析。
(04)實驗完成后,,提供完整的實驗報告(含軟件分析結果)及引物等實驗材料,。
3、熒光定量PCR的收費標準:
我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進行不同的收費標準,。