詳細(xì)介紹
實時熒光定量PCR:
新兇手弗朗西斯菌探針法熒光定量PCR試劑盒實時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限,,實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強(qiáng)度,并記錄在電腦軟件之中,,通過對每個樣品Ct值的計算,,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果。因此,,實時熒光定量PCR無需內(nèi)標(biāo)是建立在兩個基礎(chǔ)之上的:產(chǎn)品僅用于科研
1)Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達(dá)Ct值所在的循環(huán)數(shù)時,,剛剛進(jìn)入真正的指數(shù)擴(kuò)增期(對數(shù)期),此時微小誤差尚未放大,,因此Ct值的重現(xiàn)性*,,即同一模板不同時間擴(kuò)增或同一時間不同管內(nèi)擴(kuò)增,得到的Ct值是恒定的,。
2)Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系,,可利用標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知樣品進(jìn)行定量測定,因此,,實時熒光定量PCR是一種采用外標(biāo)準(zhǔn)曲線定量的方法,。
外標(biāo)準(zhǔn)曲線的定量方法相比內(nèi)標(biāo)法是一種準(zhǔn)確的、值得信賴的科學(xué)方法,。利用外標(biāo)準(zhǔn)曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準(zhǔn)確,,重現(xiàn)性的定量方法,已得到全世界的*,,廣泛用于基因表達(dá)研究,、轉(zhuǎn)基因研究,,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領(lǐng)域,。
定量PCR除可以對樣品的初始濃度進(jìn)行準(zhǔn)確定量外,,還有其它多種豐富的應(yīng)用。還包括基因表達(dá)調(diào)控情況的分析,、等位基因的分析等,。產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 | 新兇手弗朗西斯菌探針法熒光定量PCR試劑盒 |
英文名稱 | Francisella novicida |
編號 | BJP2428 |
熒光化學(xué)物質(zhì):
實時熒光定量PCR所使用的熒光物質(zhì)可分為兩種:熒光探針和熒光染料。現(xiàn)將其原理簡述如下:
1. TaqMan熒光探針:PCR擴(kuò)增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,,該探針為一寡核苷酸,,兩端分別標(biāo)記一個報告熒光基團(tuán)和一個淬滅熒光基團(tuán)。探針完整時,,報告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收,;PCR擴(kuò)增時,Taq酶的5'-3'外切酶活性將探針酶切降解,,使報告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,,即每擴(kuò)增一條DNA鏈,,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成*同步,。而新型TaqMan-MGB探針使該技術(shù)既可進(jìn)行基因定量分析,,又可分析基因突變(SNP),有望成為基因診斷和個體化用藥分析的技術(shù)平臺,。
2. SYBR熒光染料:在PCR反應(yīng)體系中,,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料非特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,,發(fā)射熒光信號,,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步,。SYBR僅與雙鏈DNA進(jìn)行結(jié)合,,因此可以通過溶解曲線,確定PCR反應(yīng)是否特異,。
3. 分子信標(biāo):是一種在5和3末端自身形成一個8個堿基左右的發(fā)夾結(jié)構(gòu)的莖環(huán)雙標(biāo)記寡核苷酸探針,,兩端的核酸序列互補(bǔ)配對,導(dǎo)致熒光基團(tuán)與淬滅基團(tuán)緊緊靠近,,不會產(chǎn)生熒光,。PCR產(chǎn)物生成后,退火過程中,,分子信標(biāo)中間部分與特定DNA序列配對,,熒光基因與淬滅基因分離產(chǎn)生熒光 ,。
探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖??
以下產(chǎn)品是公司正在*產(chǎn)品:
聚腺苷酸1,2,4-苯三酚
聚尿苷酸1,2,4-苯三酚
赤霉烯酮環(huán)庚三烯酚酮
赤霉烯酮環(huán)庚三烯酚酮
雙1,2-二溴烷
雙1,,2-二溴烷
葉綠素銅鈉鹽1,,2-二溴烷
葉綠素銅鈉鹽二基酸葉醇酯
葉綠素銅鈉鹽二基酸葉醇酯
葉綠素B1-溴-2-基烷
新兇手弗朗西斯菌探針法熒光定量PCR試劑盒異甘草苷大黃根酸
左旋肉堿檸嗪酸
L-色氨酸三聚氰酸
丹參新酮環(huán)烷-1,1-二羧酸
橙花叔醇十七酸
三七皂苷Ft1 正庚酸
原百部次堿反式-2-己烯酸
補(bǔ)骨脂素高香草酸
土大黃苷 (±)-3-羥基酸
鉤藤堿DL-4-羥基-3-氧基扁桃酸
熒光定量PCR服務(wù):
簡介:產(chǎn)品僅用于科研實時熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出,該技術(shù)不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍,,而且與常規(guī)PCR相比,,它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問題,、自動化程度高等特點,,目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化;比較不同組織的mRNA表達(dá)差異,;驗證基因芯片,,siRNA干擾的實驗結(jié)果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術(shù)服務(wù),,全部實驗皆使用進(jìn)口試劑完成,,主要定量PCR儀器。
1,、熒光定量PCR服務(wù)要求:
(01)請您提供新鮮的且盡量多的材料,;或直接提供純化好的總RNA(大于 5 ug/樣品);或直接提供純化好的DNA(大于 5 ug/樣品),。
(02)請?zhí)峁┮阎娜L基因序列,。
(03)請?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料:DNA/RNA 來源等
2、熒光定量PCR操作程序
(01)引物(探針)設(shè)計與合成,。
(02)提取DNA/RNA,,樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。
(03)進(jìn)行Real Time PCR實驗,,進(jìn)行實驗結(jié)果分析,。
(04)實驗完成后,提供完整的實驗報告(含軟件分析結(jié)果)及引物等實驗材料,。
3,、熒光定量PCR的收費標(biāo)準(zhǔn):
我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費標(biāo)準(zhǔn)。