詳細介紹
副雞嗜血桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒定量PCR除可以對樣品的初始濃度進行準確定量外,還有其它多種豐富的應用,。還包括基因表達調控情況的分析,、等位基因的分析等。產品僅用于科研
產品名稱 | 副雞嗜血桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 |
英文名稱 | Haemophilus paragallinarum |
編號 | BJP2472 |
實時熒光定量PCR:
實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限,,實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度,,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,,根據(jù)標準曲線獲得定量結果,。因此,實時熒光定量PCR無需內標是建立在兩個基礎之上的:
1)Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數(shù)時,,剛剛進入真正的指數(shù)擴增期(對數(shù)期),,此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現(xiàn)性*,,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內擴增,,得到的Ct值是恒定的,。
2)Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關系,可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定,,因此,,實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內標法是一種準確的,、值得信賴的科學方法,。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確,重現(xiàn)性的定量方法,,已得到全世界的*,,廣泛用于基因表達研究、轉基因研究,,藥物療效考核,、病原體檢測等諸多領域。產品僅用于科研
熒光化學物質:
實時熒光定量PCR所使用的熒光物質可分為兩種:熒光探針和熒光染料?,F(xiàn)將其原理簡述如下:
1. TaqMan熒光探針:PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團,。探針完整時,,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,,Taq酶的5'-3'外切酶活性將探針酶切降解,,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,,即每擴增一條DNA鏈,,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產物形成*同步,。而新型TaqMan-MGB探針使該技術既可進行基因定量分析,,又可分析基因突變(SNP),有望成為基因診斷和個體化用藥分析的技術平臺,。
2. SYBR熒光染料:在PCR反應體系中,,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料非特異性地摻入DNA雙鏈后,,發(fā)射熒光信號,,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加*同步,。SYBR僅與雙鏈DNA進行結合,,因此可以通過溶解曲線,確定PCR反應是否特異,。
3. 分子信標:是一種在5和3末端自身形成一個8個堿基左右的發(fā)夾結構的莖環(huán)雙標記寡核苷酸探針,,兩端的核酸序列互補配對,,導致熒光基團與淬滅基團緊緊靠近,不會產生熒光,。PCR產物生成后,,退火過程中,分子信標中間部分與特定DNA序列配對,,熒光基因與淬滅基因分離產生熒光 ,。
探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖?
熒光定量PCR服務:
簡介:實時熒光定量PCR技術于1996年由美國Applied Biosystems公司推出,該技術不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍,,而且與常規(guī)PCR相比,,它具有特異性更強,、有效解決PCR污染問題,、自動化程度高等特點,目前該技術已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化,;比較不同組織的mRNA表達差異,;驗證基因芯片,siRNA干擾的實驗結果等,。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術服務,,全部實驗皆使用進口試劑完成,主要定量PCR儀器,。
1,、熒光定量PCR服務要求:
(01)請您提供新鮮的且盡量多的材料;或直接提供純化好的總RNA(大于 5 ug/樣品),;或直接提供純化好的DNA(大于 5 ug/樣品),。
(02)請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。
(03)請?zhí)峁┍M可能詳細的背景資料:DNA/RNA 來源等
2,、熒光定量PCR操作程序
(01)引物(探針)設計與合成,。
(02)提取DNA/RNA,樣本逆轉錄成cDNA,。
(03)進行Real Time PCR實驗,,進行實驗結果分析。
(04)實驗完成后,,提供完整的實驗報告(含軟件分析結果)及引物等實驗材料,。
3、熒光定量PCR的收費標準:
我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進行不同的收費標準,。產品僅用于科研
以下產品是公司正在*產品:
滂胺天藍煙酸酰肼
滂胺天藍煙酸酰肼
粘蛋白胭脂紅苯酸鋰
基藍苯酸鋰
基藍苯基烯基砜
7-氨基-4-基苯基烯基砜
7-氨基-4-基苯基烯基砜
7-氨基-4-基2-氯基苯硫醚
2-氯基苯硫醚
9-溴-1-壬醇
副雞嗜血桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒竹節(jié)參皂苷IVa蛋白胨水培養(yǎng)基
綠原酸菌種保存培養(yǎng)基
茵芋堿豆粉瓊脂
膽固醇細菌L型增菌液
膽酸細菌L型分離瓊脂
重樓皂苷I溶血瓊脂基礎
重樓皂苷II亞硫酸鈉瓊脂
白楊素龍膽紫血液瓊脂基礎
大黃酚硫酸十二烷基鈉瓊脂
兒茶素改良羅氏培養(yǎng)基基礎