詳細介紹
服務(wù)流程:
1.客戶認真寫好訂單,,提供待檢基因相關(guān)信息,;
2.簽訂技術(shù)服務(wù)合同,支付預(yù)付款(30-50%),;
3.設(shè)計合成定量PCR引物(或客戶提供文獻引物委托本公司合成),;
4.DNA/RNA的抽提、定量,、RNA反轉(zhuǎn)錄,;
5.PCR預(yù)實驗,主要檢測引物的特異性和擴增效率,;
6.正式定量實驗:對所有樣品上機檢測,;
7.實驗結(jié)果和數(shù)據(jù)分析,形成報告,。產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 | 藍氏賈第鞭毛蟲B型探針法熒光定量PCR試劑盒 |
英文名稱 | Giardia lambliaB |
編號 | BJP2453 |
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原理:
產(chǎn)品僅用于科研所謂實時熒光定量PCR技術(shù),,是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法,。
檢測方法
1.SYBRGreenⅠ法:
在PCR反應(yīng)體系中,,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,,發(fā)射熒光信號,,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步,。
SYBR定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法:
探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收,;PCR擴增時,,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步,。
產(chǎn)品特點:
藍氏賈第鞭毛蟲B型探針法熒光定量PCR試劑盒 全新的熱啟動DNA聚合酶-Hot Start Taq DNA聚合酶,可在PCR反應(yīng)的過程中抑制非特異擴增,,從而最大限度地減少非特異性擴增產(chǎn)物的產(chǎn)生,,提高熒光定量PCR反應(yīng)的特異性;
采用新型的熒光染料EvaGreen,,與傳統(tǒng)熒光染料相比,,對PCR反應(yīng)抑制更小,而且熒光信號更強,,檢測靈敏度更高,;產(chǎn)品僅用于科研
含有UNG的試劑盒可以防止PCR產(chǎn)物污染體系,進而有效防止實驗過程中PCR產(chǎn)物的交叉污染,;
TaqMan熒光定量PCR試劑盒提供了除引物,、探針、模板外的所有實驗所需組分,,并配備2×Buffer,,可完成不同類型熒光探針的實時熒光定量PCR反應(yīng),方便用戶使用,;
試劑盒的通用性強,,可適用于Roche的Light Cycler、ABI各型實時熒光定量PCR儀和,。
以下是公司*產(chǎn)品:
基紫3-芐氧基溴烷
基紫4-異基環(huán)己酮
基紫6B4-氨基苯二酸
溴酚紫4-氨基苯二酸
溴酚紫2-庚醇
溴酚紫2-庚醇
溴酚紫鈉4-羥基-3-硝基吡啶
溴酚紫鈉4-羥基-3-硝基吡啶
固紫醬GBC鹽4-羥基-3-硝基吡啶
固紫醬GBC鹽4,4-二氧基-2-酮
4-氧基水楊酸十二烯基二酸酐
7-羥基-4-基順式六氫苯二酸酐
4'-O-基葛根素內(nèi)次基四氫苯二酸酐
3,5,6,7,8,3’,4’-七氧基黃酮二酸酐
雞豆黃素A四氯鄰苯二酸酐
5,7-二羥基色原酮2-并噻唑
5-羥基-6,7-二氧基黃酮6-硝基苯并咪唑
5-羥基-7,8-二氧基黃酮2-苯基-5(4-聯(lián)苯基)-1,3,4-惡二唑
5-羥基糠醛鈹試劑Ⅰ
5-羥基色氨酸鈹試劑II
通用原則:
1,, 先選擇好探針,然后設(shè)計引物使其盡可能的靠近于探針,。
2,, 擴增子的長度應(yīng)不超過400bp,理想的能在100-150bp內(nèi),擴增片斷約短,,有效的擴增反應(yīng)就越容易獲得,。較短的擴增片斷也容易保證分析的一致性
3, 保持GC含量在20%和80%之間,,GC富含區(qū)容易產(chǎn)生非特異反應(yīng),,從而會導(dǎo)致擴增效率的降低,及在SG分析中非特異信號,。
4,, 為了保證效率和重復(fù)性,應(yīng)避免重復(fù)的核苷酸序列,,尤其是G(不能有4個連續(xù)的G)
5,, 將引物和探針互相進行配對檢測,以避免二聚體和發(fā)卡結(jié)構(gòu)的形成,。
b),,探針設(shè)計指導(dǎo)
1,在設(shè)計引物之前設(shè)計探針
2,,探針的Tm值應(yīng)在68-70℃之間,,如果是目測探針,則要仔細審查GC富含區(qū),。
3,,探針的5’端要避免有鳥氨酸,5’G會有淬滅作用,,即使被切割下來這種淬滅作用也還會存在
4,,選擇C多于G的鏈作探針,G的含量多于C會降低反應(yīng)效率,,這時就應(yīng)選擇配對的另一條鏈作為探針,。
6, 探針應(yīng)盡可能的短,,不要超過30個bp,。
7, 檢測探針的DNA折疊和二級結(jié)構(gòu),。