詳細(xì)介紹
服務(wù)流程:
1.客戶認(rèn)真寫好訂單,,提供待檢基因相關(guān)信息,;
2.簽訂技術(shù)服務(wù)合同,支付預(yù)付款(30-50%),;
3.設(shè)計(jì)合成定量PCR引物(或客戶提供文獻(xiàn)引物委托本公司合成),;
4.DNA/RNA的抽提、定量,、RNA反轉(zhuǎn)錄,;
5.PCR預(yù)實(shí)驗(yàn),主要檢測(cè)引物的特異性和擴(kuò)增效率,;
6.正式定量實(shí)驗(yàn):對(duì)所有樣品上機(jī)檢測(cè),;
7.實(shí)驗(yàn)結(jié)果和數(shù)據(jù)分析,形成報(bào)告,。產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 | 火雞皰疹病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 |
英文名稱 | Herpesvirus of Turkey (HVT) |
編號(hào) | BJP2502 |
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原理:
產(chǎn)品僅用于科研所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),,是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
檢測(cè)方法
1.SYBRGreenⅠ法:
在PCR反應(yīng)體系中,,加入過量SYBR熒光染料,,SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,發(fā)射熒光信號(hào),,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射任何熒光信號(hào),,從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
SYBR定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法:
探針完整時(shí),,報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收,;PCR擴(kuò)增時(shí),Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,,使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,,從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào),即每擴(kuò)增一條DNA鏈,,就有一個(gè)熒光分子形成,,實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。
產(chǎn)品特點(diǎn):
火雞皰疹病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 全新的熱啟動(dòng)DNA聚合酶-Hot Start Taq DNA聚合酶,,可在PCR反應(yīng)的過程中抑制非特異擴(kuò)增,,從而最大限度地減少非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物的產(chǎn)生,提高熒光定量PCR反應(yīng)的特異性,;
采用新型的熒光染料EvaGreen,,與傳統(tǒng)熒光染料相比,對(duì)PCR反應(yīng)抑制更小,,而且熒光信號(hào)更強(qiáng),,檢測(cè)靈敏度更高;產(chǎn)品僅用于科研
含有UNG的試劑盒可以防止PCR產(chǎn)物污染體系,進(jìn)而有效防止實(shí)驗(yàn)過程中PCR產(chǎn)物的交叉污染,;
TaqMan熒光定量PCR試劑盒提供了除引物,、探針、模板外的所有實(shí)驗(yàn)所需組分,,并配備2×Buffer,,可完成不同類型熒光探針的實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng),方便用戶使用,;
試劑盒的通用性強(qiáng),,可適用于Roche的Light Cycler、ABI各型實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀和,。
以下是公司*產(chǎn)品:
N-硝基-L-精氨酸2-溴蒽醌
N-硝基-L-精氨酸2-溴蒽醌
N-硝基-L-精氨酸酯鹽酸鹽2-溴蒽醌
N-硝基-L-精氨酸酯鹽酸鹽BOC-D-4-氟苯氨酸
N-硝基-L-精氨酸酯鹽酸鹽BOC-D-4-氟苯氨酸
L-瓜氨酸2,3,4-三氧基苯酸
L-瓜氨酸2,3,4-三氧基苯酸
L-瓜氨酸2,3,4-三氧基苯酸
L-鳥氨酸鹽酸鹽9-溴菲
L-鳥氨酸鹽酸鹽9-溴菲
異夏佛塔苷T1NO肉湯
異水飛薊賓T1N3肉湯
異甜菊醇 MCPC培養(yǎng)基
異香蘭素副溶血性弧菌瓊脂
異牡荊苷副溶血性弧菌增菌液
藥根堿改良磷酸鹽緩沖液
鹽酸藥根堿CIN-1I培養(yǎng)基
酸棗仁皂苷A改良Y培養(yǎng)基
酸棗仁皂苷A1ITC肉湯
酸棗仁皂苷B改良克氏雙糖
通用原則:
1,, 先選擇好探針,然后設(shè)計(jì)引物使其盡可能的靠近于探針,。
2,, 擴(kuò)增子的長(zhǎng)度應(yīng)不超過400bp,理想的能在100-150bp內(nèi),,擴(kuò)增片斷約短,,有效的擴(kuò)增反應(yīng)就越容易獲得。較短的擴(kuò)增片斷也容易保證分析的一致性
3,, 保持GC含量在20%和80%之間,,GC富含區(qū)容易產(chǎn)生非特異反應(yīng),從而會(huì)導(dǎo)致擴(kuò)增效率的降低,,及在SG分析中非特異信號(hào),。
4, 為了保證效率和重復(fù)性,,應(yīng)避免重復(fù)的核苷酸序列,,尤其是G(不能有4個(gè)連續(xù)的G)
5, 將引物和探針互相進(jìn)行配對(duì)檢測(cè),,以避免二聚體和發(fā)卡結(jié)構(gòu)的形成,。
b),探針設(shè)計(jì)指導(dǎo)
1,,在設(shè)計(jì)引物之前設(shè)計(jì)探針
2,,探針的Tm值應(yīng)在68-70℃之間,如果是目測(cè)探針,,則要仔細(xì)審查GC富含區(qū),。
3,探針的5’端要避免有鳥氨酸,,5’G會(huì)有淬滅作用,,即使被切割下來這種淬滅作用也還會(huì)存在
4,,選擇C多于G的鏈作探針,G的含量多于C會(huì)降低反應(yīng)效率,,這時(shí)就應(yīng)選擇配對(duì)的另一條鏈作為探針,。
6, 探針應(yīng)盡可能的短,,不要超過30個(gè)bp,。
7, 檢測(cè)探針的DNA折疊和二級(jí)結(jié)構(gòu),。