詳細(xì)介紹
服務(wù)流程:
1.客戶認(rèn)真寫好訂單,提供待檢基因相關(guān)信息,;
2.簽訂技術(shù)服務(wù)合同,,支付預(yù)付款(30-50%);
3.設(shè)計(jì)合成定量PCR引物(或客戶提供文獻(xiàn)引物委托本公司合成),;
4.DNA/RNA的抽提,、定量、RNA反轉(zhuǎn)錄,;
5.PCR預(yù)實(shí)驗(yàn),,主要檢測引物的特異性和擴(kuò)增效率;
6.正式定量實(shí)驗(yàn):對所有樣品上機(jī)檢測,;
7.實(shí)驗(yàn)結(jié)果和數(shù)據(jù)分析,,形成報(bào)告,。產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 | 人乳頭瘤病毒16探針法熒光定量PCR試劑盒 |
英文名稱 | Human Papillomavirus 16(HPV-16) |
編號 | BJP2528 |
?
原理:
產(chǎn)品僅用于科研所謂實(shí)時熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),,利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
檢測方法
1.SYBRGreenⅠ法:
在PCR反應(yīng)體系中,,加入過量SYBR熒光染料,,SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,發(fā)射熒光信號,,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
SYBR定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法:
探針完整時,,報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收,;PCR擴(kuò)增時,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,,使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴(kuò)增一條DNA鏈,,就有一個熒光分子形成,,實(shí)現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。
產(chǎn)品特點(diǎn):
人乳頭瘤病毒16探針法熒光定量PCR試劑盒 全新的熱啟動DNA聚合酶-Hot Start Taq DNA聚合酶,,可在PCR反應(yīng)的過程中抑制非特異擴(kuò)增,,從而最大限度地減少非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物的產(chǎn)生,提高熒光定量PCR反應(yīng)的特異性,;
采用新型的熒光染料EvaGreen,,與傳統(tǒng)熒光染料相比,對PCR反應(yīng)抑制更小,,而且熒光信號更強(qiáng),,檢測靈敏度更高;產(chǎn)品僅用于科研
含有UNG的試劑盒可以防止PCR產(chǎn)物污染體系,,進(jìn)而有效防止實(shí)驗(yàn)過程中PCR產(chǎn)物的交叉污染,;
TaqMan熒光定量PCR試劑盒提供了除引物、探針,、模板外的所有實(shí)驗(yàn)所需組分,,并配備2×Buffer,可完成不同類型熒光探針的實(shí)時熒光定量PCR反應(yīng),,方便用戶使用,;
試劑盒的通用性強(qiáng),可適用于Roche的Light Cycler、ABI各型實(shí)時熒光定量PCR儀和,。
以下是公司*產(chǎn)品:
3,5-二-L-酪氨酸(R)?-?(-?)?-?二氫-?5-?(對-?苯磺?;趸??-?2(3H)-呋喃酮
3,5-二-L-酪氨酸Trichostatin A
3,5-二-L-酪氨酸Neurotensin
L-酪氨酸二鈉鹽4-溴正苯
L-酪氨酸二鈉鹽4-溴正苯
L-酪氨酸二鈉鹽4-溴正苯
L-纈氨酸對溴苯醚
L-纈氨酸對溴苯醚
L-纈氨酸對溴苯醚
L-纈氨酸2-苯氧基溴烷
原阿片堿酰膽堿轉(zhuǎn)移酶測試盒
原蘇木素B蛋白酶測試盒-胃蛋白酶測試盒
原百部堿蛋白酶測試盒-胰蛋白酶測試盒
擬人參皂苷F11二糖酶測試盒
擬人參皂苷RT5紅細(xì)胞NADH高鐵血紅蛋白還原酶測試盒
土荊皮酸 二醛測試盒
土荊皮酸氧化酶測試盒
偽原薯蕷皂苷總抗氧化能力測試盒
補(bǔ)骨脂定羥自由基測試盒
紫檀芪抑制與產(chǎn)生超氧陰離子自由基測試盒
通用原則:
1, 先選擇好探針,,然后設(shè)計(jì)引物使其盡可能的靠近于探針,。
2, 擴(kuò)增子的長度應(yīng)不超過400bp,,理想的能在100-150bp內(nèi),,擴(kuò)增片斷約短,有效的擴(kuò)增反應(yīng)就越容易獲得,。較短的擴(kuò)增片斷也容易保證分析的一致性
3, 保持GC含量在20%和80%之間,,GC富含區(qū)容易產(chǎn)生非特異反應(yīng),,從而會導(dǎo)致擴(kuò)增效率的降低,及在SG分析中非特異信號,。
4,, 為了保證效率和重復(fù)性,應(yīng)避免重復(fù)的核苷酸序列,,尤其是G(不能有4個連續(xù)的G)
5,, 將引物和探針互相進(jìn)行配對檢測,以避免二聚體和發(fā)卡結(jié)構(gòu)的形成,。
b),,探針設(shè)計(jì)指導(dǎo)
1,在設(shè)計(jì)引物之前設(shè)計(jì)探針
2,,探針的Tm值應(yīng)在68-70℃之間,,如果是目測探針,則要仔細(xì)審查GC富含區(qū),。
3,,探針的5’端要避免有鳥氨酸,5’G會有淬滅作用,,即使被切割下來這種淬滅作用也還會存在
4,,選擇C多于G的鏈作探針,G的含量多于C會降低反應(yīng)效率,,這時就應(yīng)選擇配對的另一條鏈作為探針,。
6, 探針應(yīng)盡可能的短,,不要超過30個bp,。
7, 檢測探針的DNA折疊和二級結(jié)構(gòu)。