原理:
所謂實時熒光定量PCR技術(shù),，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法,。
檢測方法
1.SYBRGreenⅠ法：
在PCR反應(yīng)體系中,，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,，發(fā)射熒光信號,，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步,。
SYBR定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時,，報告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收；PCR擴(kuò)增時,，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,，使報告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,，即每擴(kuò)增一條DNA鏈,，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步,。

通用原則：
1,，青霉通用探針法熒光定量PCR試劑盒先選擇好探針，然后設(shè)計引物使其盡可能的靠近于探針,。
2,， 擴(kuò)增子的長度應(yīng)不超過400bp，理想的能在100－150bp內(nèi),，擴(kuò)增片斷約短,，有效的擴(kuò)增反應(yīng)就越容易獲得。較短的擴(kuò)增片斷也容易保證分析的一致性
3,， 保持GC含量在20％和80％之間,，GC富含區(qū)容易產(chǎn)生非特異反應(yīng),，從而會導(dǎo)致擴(kuò)增效率的降低,，及在SG分析中非特異信號。
4,， 為了保證效率和重復(fù)性,，應(yīng)避免重復(fù)的核苷酸序列，尤其是G（不能有4個連續(xù)的G）
5,， 將引物和探針互相進(jìn)行配對檢測,，以避免二聚體和發(fā)卡結(jié)構(gòu)的形成。
b）,，探針設(shè)計指導(dǎo)
1,，在設(shè)計引物之前設(shè)計探針
2,，探針的Tm值應(yīng)在68－70℃之間，如果是目測探針,，則要仔細(xì)審查GC富含區(qū),。
3，探針的5’端要避免有鳥氨酸,，5’G會有淬滅作用,，即使被切割下來這種淬滅作用也還會存在
4，選擇C多于G的鏈作探針,，G的含量多于C會降低反應(yīng)效率,，這時就應(yīng)選擇配對的另一條鏈作為探針。
6,， 探針應(yīng)盡可能的短,，不要超過30個bp。
7,， 檢測探針的DNA折疊和二級結(jié)構(gòu),。
服務(wù)流程:
1.客戶認(rèn)真寫好訂單，提供待檢基因相關(guān)信息,；
2.簽訂技術(shù)服務(wù)合同,，支付預(yù)付款（30-50%)；
3.設(shè)計合成定量PCR引物（或客戶提供文獻(xiàn)引物委托本公司合成）,；
4.DNA/RNA的抽提,、定量、RNA反轉(zhuǎn)錄,；
5.PCR預(yù)實驗,，主要檢測引物的特異性和擴(kuò)增效率；
6.正式定量實驗：對所有樣品上機(jī)檢測,；
7.實驗結(jié)果和數(shù)據(jù)分析,，形成報告。

以下是公司*產(chǎn)品：

對羥基苯酮酸兔肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞

對羥基苯酮酸兔肝實質(zhì)細(xì)胞

2-酮酸兔肝外膽管上皮細(xì)胞

2-酮酸兔肝星狀細(xì)胞

苦酮酸兔支持細(xì)胞

庚二酸兔骨骼肌成纖維細(xì)胞

庚二酸兔骨骼肌細(xì)胞

庚二酸兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞

富馬酸兔骨細(xì)胞

富馬酸兔股動脈內(nèi)皮細(xì)胞吳茱萸苷α-黑色素細(xì)胞刺激素檢測試劑盒

新苦參酮α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶檢測試劑盒

新苦參醇α干擾素檢測試劑盒

單密利特苷α-輔肌動蛋白4檢測試劑盒

10-氧基喜樹堿α-輔肌動蛋白3檢測試劑盒

車葉草苷酸酯α-輔肌動蛋白1檢測試劑盒

冬青苷Oα-防御素4檢測試劑盒

毛冬青皂苷B3α淀粉酶檢測試劑盒

毛冬青皂苷B2α半乳糖基檢測試劑盒

毛冬青皂苷B1α半乳糖苷酶檢測試劑盒

產(chǎn)品特點：

    全新的熱啟動DNA聚合酶-Hot Start Taq DNA聚合酶,，可在PCR反應(yīng)的過程中抑制非特異擴(kuò)增,，從而最大限度地減少非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物的產(chǎn)生，提高熒光定量PCR反應(yīng)的特異性,；
    采用新型的熒光染料EvaGreen,，與傳統(tǒng)熒光染料相比，對PCR反應(yīng)抑制更小,，而且熒光信號更強(qiáng),，檢測靈敏度更高；
    含有UNG的試劑盒可以防止PCR產(chǎn)物污染體系,，進(jìn)而有效防止實驗過程中PCR產(chǎn)物的交叉污染,；
TaqMan熒光定量PCR試劑盒提供了除引物,、探針、模板外的所有實驗所需組分,，并配備2×Buffer,，可完成不同類型熒光探針的實時熒光定量PCR反應(yīng)，方便用戶使用,；
    試劑盒的通用性強(qiáng),，可適用于Roche的Light Cycler、ABI各型實時熒光定量PCR儀和,。