原理:
所謂實時熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法,。
檢測方法
1.SYBRGreenⅠ法：
在PCR反應(yīng)體系中,，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,，發(fā)射熒光信號,，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步,。
SYBR定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時,，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR擴增時,，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,，即每擴增一條DNA鏈,，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步,。

通用原則：
1,，饒氏無綠藻探針法熒光定量PCR試劑盒先選擇好探針，然后設(shè)計引物使其盡可能的靠近于探針,。
2,， 擴增子的長度應(yīng)不超過400bp，理想的能在100－150bp內(nèi),，擴增片斷約短,，有效的擴增反應(yīng)就越容易獲得。較短的擴增片斷也容易保證分析的一致性
3,， 保持GC含量在20％和80％之間,，GC富含區(qū)容易產(chǎn)生非特異反應(yīng)，從而會導(dǎo)致擴增效率的降低,，及在SG分析中非特異信號,。
4， 為了保證效率和重復(fù)性,，應(yīng)避免重復(fù)的核苷酸序列,，尤其是G（不能有4個連續(xù)的G）
5， 將引物和探針互相進行配對檢測，以避免二聚體和發(fā)卡結(jié)構(gòu)的形成,。
b）,，探針設(shè)計指導(dǎo)
1，在設(shè)計引物之前設(shè)計探針
2,，探針的Tm值應(yīng)在68－70℃之間,，如果是目測探針，則要仔細審查GC富含區(qū),。
3,，探針的5’端要避免有鳥氨酸，5’G會有淬滅作用,，即使被切割下來這種淬滅作用也還會存在
4,，選擇C多于G的鏈作探針，G的含量多于C會降低反應(yīng)效率,，這時就應(yīng)選擇配對的另一條鏈作為探針,。
6， 探針應(yīng)盡可能的短,，不要超過30個bp,。
7， 檢測探針的DNA折疊和二級結(jié)構(gòu),。
服務(wù)流程:
1.客戶認真寫好訂單,，提供待檢基因相關(guān)信息；
2.簽訂技術(shù)服務(wù)合同,，支付預(yù)付款（30-50%),；
3.設(shè)計合成定量PCR引物（或客戶提供文獻引物委托本公司合成）；
4.DNA/RNA的抽提,、定量,、RNA反轉(zhuǎn)錄；
5.PCR預(yù)實驗,，主要檢測引物的特異性和擴增效率,；
6.正式定量實驗：對所有樣品上機檢測；
7.實驗結(jié)果和數(shù)據(jù)分析,，形成報告,。

以下是公司*產(chǎn)品：

硫酸鈰銨 抗酰膽堿脂酶單克隆抗體

羥胺溶液 抗堿性磷酸酶抗體

雙環(huán)己酮草酰二腙 抗利尿激素/血管升壓素抗體

檸檬酸銅 抗磷酸化Bcl-xL(pSer62)蛋白抗體

酒石酸銅 抗磷酸化原癌基因c-kit抗體

硫酸鋁 抗牛酪蛋白抗體

氫氧化鋁 克拉拉細胞蛋白(Clara細胞分泌蛋白)抗體

酸性氧化鋁 淋巴細胞趨化因子CCL21抗體

酸性氧化鋁 磷酸化APP(Tyr757)淀粉樣肽前體蛋白抗體

酸性氧化鋁 磷酸化β-連環(huán)蛋白抗體苦杏堿醇 AD-二聚體(D-Dimer)測定試劑盒(含校對品)

苦杏堿醇 B抗凝血酶（AT-Ⅲ）測定試劑盒

闊葉酮醇凝血酶原時間（PT）測定試劑盒ISI1.0-1.3

蠟果楊梅酸 B部分凝血活酶時間(APTT)測定試劑盒<白陶土含Cacl2>

蠟果楊梅酸 C凝血酶時間(TT)測定試劑盒<含復(fù)溶液>

雷公藤三萜酸 A纖維蛋白原(BFI)測定試劑盒<含IBS>

雷醌內(nèi)酯酮凝血酶原時間（PT）測定試劑盒ISI1.0-1.3<含復(fù)溶液>

雷藤二萜醌 B凝血酶原時間（PT）測定試劑盒ISI1.0-1.3<含復(fù)溶液>

李屬素部分凝血活酶時間(APTT)測定試劑盒<鞣花酸含Cacl2>

里查酮 A部分凝血活酶時間(APTT)測定試劑盒<鞣花酸含Cacl2>

產(chǎn)品特點：

    全新的熱啟動DNA聚合酶-Hot Start Taq DNA聚合酶，可在PCR反應(yīng)的過程中抑制非特異擴增,，從而最大限度地減少非特異性擴增產(chǎn)物的產(chǎn)生,，提高熒光定量PCR反應(yīng)的特異性；
    采用新型的熒光染料EvaGreen,，與傳統(tǒng)熒光染料相比,，對PCR反應(yīng)抑制更小,，而且熒光信號更強，檢測靈敏度更高,；
    含有UNG的試劑盒可以防止PCR產(chǎn)物污染體系,，進而有效防止實驗過程中PCR產(chǎn)物的交叉污染；
TaqMan熒光定量PCR試劑盒提供了除引物,、探針,、模板外的所有實驗所需組分，并配備2×Buffer,，可完成不同類型熒光探針的實時熒光定量PCR反應(yīng),，方便用戶使用；
    試劑盒的通用性強,，可適用于Roche的Light Cycler、ABI各型實時熒光定量PCR儀和,。