探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

實時熒光定量PCR：

實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限,，實現了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度，并記錄在電腦軟件之中,，通過對每個樣品Ct值的計算,，根據標準曲線獲得定量結果。因此,，實時熒光定量PCR無需內標是建立在兩個基礎之上的：
1）Ct值的重現性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數時,，剛剛進入真正的指數擴增期（對數期），此時微小誤差尚未放大,，因此Ct值的重現性*,，即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內擴增，得到的Ct值是恒定的,。
2）Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數存在線性關系,，可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定，因此,，實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法,。
外標準曲線的定量方法相比內標法是一種準確的、值得信賴的科學方法,。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確,，重現性的定量方法，已得到全世界的*,，廣泛用于基因表達研究,、轉基因研究，藥物療效考核、病原體檢測等諸多領域,。定量PCR除可以對樣品的初始濃度進行準確定量外,，還有其它多種豐富的應用。還包括基因表達調控情況的分析,、等位基因的分析等,。

熒光定量PCR服務：
簡介：實時熒光定量PCR技術于1996年由美國Applied Biosystems公司推出，該技術不僅實現了PCR從定性到定量的飛躍,，而且與常規(guī)PCR相比,，它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題,、自動化程度高等特點，目前該技術已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化,；比較不同組織的mRNA表達差異,；驗證基因芯片，siRNA干擾的實驗結果等,。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術服務,，全部實驗皆使用進口試劑完成，主要定量PCR儀器,。
1,、熒光定量PCR服務要求：
（01）請您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）,；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）,。
（02）請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。
（03）請?zhí)峁┍M可能詳細的背景資料：DNA/RNA 來源等
2,、熒光定量PCR操作程序
（01）引物（探針）設計與合成,。
（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉錄成cDNA,。
（03）進行Real Time PCR實驗,，進行實驗結果分析。
（04）實驗完成后,，提供完整的實驗報告（含軟件分析結果）及引物等實驗材料,。
3、熒光定量PCR的收費標準：
  我公司根據客戶的樣品數量進行不同的收費標準,。
熒光化學物質：
志賀氏菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒實時熒光定量PCR所使用的熒光物質可分為兩種：熒光探針和熒光染料?，F將其原理簡述如下：
1. TaqMan熒光探針：PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸,，兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團,。探針完整時，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR擴增時,，Taq酶的5'－3'外切酶活性將探針酶切降解,，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,，即每擴增一條DNA鏈,，就有一個熒光分子形成，實現了熒光信號的累積與PCR產物形成*同步,。而新型TaqMan-MGB探針使該技術既可進行基因定量分析,，又可分析基因突變（SNP），有望成為基因診斷和個體化用藥分析的技術平臺,。
2. SYBR熒光染料：在PCR反應體系中,，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料非特異性地摻入DNA雙鏈后,，發(fā)射熒光信號,，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加*同步,。SYBR僅與雙鏈DNA進行結合,，因此可以通過溶解曲線，確定PCR反應是否特異,。
3. 分子信標：是一種在5和3末端自身形成一個8個堿基左右的發(fā)夾結構的莖環(huán)雙標記寡核苷酸探針,，兩端的核酸序列互補配對，導致熒光基團與淬滅基團緊緊靠近,，不會產生熒光,。PCR產物生成后，退火過程中,，分子信標中間部分與特定DNA序列配對,，熒光基因與淬滅基因分離產生熒光 。
以下產品是公司正在*產品：

1-基-3-基六氟磷酸鹽咪唑啉嗡大鼠腦靜脈血管內皮細胞*培養(yǎng)基

1-基-3-基六氟磷酸鹽咪唑啉嗡大鼠腦靜脈血管平滑肌細胞*培養(yǎng)基

2-磺基苯酸酐大鼠腦膜細胞*培養(yǎng)基

2-磺基苯酸酐大鼠神經元細胞*培養(yǎng)基

2-磺基苯酸酐大鼠神經膠質細胞*培養(yǎng)基

(1S,2S)-1,2-二苯基二胺大鼠海馬神經元細胞*培養(yǎng)基

(1S,2S)-1,2-二苯基二胺大鼠腦微血管內皮細胞*培養(yǎng)基

(1S,2S)-1,2-二苯基二胺大鼠腦成纖維細胞*培養(yǎng)基

3,5-二氟吡啶大鼠神經小膠質細胞*培養(yǎng)基

3,5-二氟吡啶大鼠雪旺氏細胞*培養(yǎng)基5,7-二氧基-3,3',4'-三羥基黃酮SUPER Green I nucleic acid gel stain *20× concentrate in DMSO* (PCR Grade)

小構樹醇ASUPER Green I nucleic acid gel stain *20× concentrate in DMSO*  (PCR Grade)

8-羥基松脂醇SUPER Green II RNA gel stain *10,000× concentrate in DMSO*  (Electrophoresis Grade)   

疏展香茶菜寧BSUPER Green II RNA gel stain *10,000× concentrate in DMSO*  (Electrophoresis Grade)  

延命草素DuRed nucleic acid gel stain *10,000× concentrate in water*

4',5,8-三羥基-3',6,7-三氧基黃酮DuRed nucleic acid gel stain *10,000× concentrate in DMSO*

竹紅菌素DuGreen nucleic acid gel stain *10,000× concentrate in water*

顯軸買麻藤醇DuGreen nucleic acid gel stain *10,000× concentrate in DMSO*

基 5-O-阿魏?？崴狨TGreen nucleic acid gel stain *20× concentrate in water*

基 3-O-阿魏?？崴狨TGreen nucleic acid gel stain *20× concentrate in water*