原理:
所謂實時熒光定量PCR技術,，是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法,。
檢測方法
1.SYBRGreenⅠ法：
在PCR反應體系中，加入過量SYBR熒光染料,，SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,，發(fā)射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步,。
SYBR定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時,，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR擴增時,，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,，即每擴增一條DNA鏈,，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步,。

通用原則：
1,，?哈維氏弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒先選擇好探針，然后設計引物使其盡可能的靠近于探針,。
2,， 擴增子的長度應不超過400bp，理想的能在100－150bp內(nèi),，擴增片斷約短,，有效的擴增反應就越容易獲得。較短的擴增片斷也容易保證分析的一致性
3,， 保持GC含量在20％和80％之間,，GC富含區(qū)容易產(chǎn)生非特異反應，從而會導致擴增效率的降低,，及在SG分析中非特異信號,。
4， 為了保證效率和重復性,，應避免重復的核苷酸序列,，尤其是G（不能有4個連續(xù)的G）
5， 將引物和探針互相進行配對檢測,，以避免二聚體和發(fā)卡結(jié)構(gòu)的形成,。
b），探針設計指導
1,，在設計引物之前設計探針
2,，探針的Tm值應在68－70℃之間，如果是目測探針,，則要仔細審查GC富含區(qū),。
3，探針的5’端要避免有鳥氨酸,，5’G會有淬滅作用,，即使被切割下來這種淬滅作用也還會存在
4，選擇C多于G的鏈作探針,，G的含量多于C會降低反應效率,，這時就應選擇配對的另一條鏈作為探針,。
6， 探針應盡可能的短,，不要超過30個bp,。
7， 檢測探針的DNA折疊和二級結(jié)構(gòu),。
服務流程:
1.客戶認真寫好訂單,，提供待檢基因相關信息；
2.簽訂技術服務合同,，支付預付款（30-50%),；
3.設計合成定量PCR引物（或客戶提供文獻引物委托本公司合成）；
4.DNA/RNA的抽提,、定量,、RNA反轉(zhuǎn)錄；
5.PCR預實驗,，主要檢測引物的特異性和擴增效率,；
6.正式定量實驗：對所有樣品上機檢測；
7.實驗結(jié)果和數(shù)據(jù)分析,，形成報告,。

以下是公司*產(chǎn)品：

肝細胞生長因子激活物抑制因子抗體Carvacrol；香荊芥酚

人類血紅蛋白α1抗體Dexamethasone,；地塞米松

鼠抗人型肝炎表面抗原抗體Coumalic Acid,；香豆酸

抗肝病毒pre S1/肝病毒pre S2抗體Hydrocortisone Acetate；醋酸氫的松

鼠抗人β亞基人絨毛膜促性腺激素單抗Kojic acid,；曲酸

人基因/bri3結(jié)合蛋白抗體Resveratrol,；白藜蘆醇

鼠抗人α 亞基人絨毛膜促性腺激素單抗Vitamin D2；維生素D2

型肝炎病毒-C區(qū)抗體Tyrosol,；酪醇

型肝炎病毒核心蛋白結(jié)合蛋白-1抗體p-Coumaric acid,；對香豆酸

型肝炎病毒-NS1抗體Lactic acid；DL-乳酸Cefadroxil   頭孢羥氨芐一水1 x 10^6 cellsT25培養(yǎng)瓶

Cefadroxil   頭孢羥氨芐一水1 x 10^6 cellsT25培養(yǎng)瓶

Cefadroxil   頭孢羥氨芐一水1 x 10^6 cellsT25培養(yǎng)瓶

Cefazolin sodium salt 頭孢唑啉鈉1 x 10^6 cellsT25培養(yǎng)瓶

Cefepime hydrochloride 頭孢吡肟鹽酸鹽1 x 10^6 cellsT25培養(yǎng)瓶

Cefepime 頭孢吡肟1 x 10^6 cellsT25培養(yǎng)瓶

Cefotaxime,Sodium Salt 噻孢1 x 10^6 cellsT25培養(yǎng)瓶

Cefotaxime,Sodium Salt 噻孢 1 x 10^6 cellsT25培養(yǎng)瓶

Cefotaxime,Sodium Salt 噻孢1 x 10^6 cellsT25培養(yǎng)瓶

Cefotaxime,Sodium Salt 噻孢  1 x 10^6 cellsT25培養(yǎng)瓶

產(chǎn)品特點：

    全新的熱啟動DNA聚合酶-Hot Start Taq DNA聚合酶,，可在PCR反應的過程中抑制非特異擴增,，從而最大限度地減少非特異性擴增產(chǎn)物的產(chǎn)生，提高熒光定量PCR反應的特異性,；
    采用新型的熒光染料EvaGreen,，與傳統(tǒng)熒光染料相比,，對PCR反應抑制更小,，而且熒光信號更強，檢測靈敏度更高,；
    含有UNG的試劑盒可以防止PCR產(chǎn)物污染體系,，進而有效防止實驗過程中PCR產(chǎn)物的交叉污染,；
TaqMan熒光定量PCR試劑盒提供了除引物、探針,、模板外的所有實驗所需組分,，并配備2×Buffer，可完成不同類型熒光探針的實時熒光定量PCR反應,，方便用戶使用,；
    試劑盒的通用性強，可適用于Roche的Light Cycler,、ABI各型實時熒光定量PCR儀和,。