技術(shù)概論:
間日瘧PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發(fā)展起來(lái)的體外核酸擴(kuò)增技術(shù)。它具有特異、敏感,、產(chǎn)率高、快速,、簡(jiǎn)便,、重復(fù)性好、易自動(dòng)化等突出優(yōu)點(diǎn),；能在一個(gè)試管內(nèi)將所要研究的目的基因或某一DNA片段于數(shù)小時(shí)內(nèi)擴(kuò)增至十萬(wàn)乃至百萬(wàn)倍,使肉眼能直接觀察和判斷,；可從一根毛發(fā)、一滴血,、甚至一個(gè)細(xì)胞中擴(kuò)增出足量的DNA供分析研究和檢測(cè)鑒定。過(guò)去幾天幾星期才能做到的事情,，用PCR幾小時(shí)便可完成,。PCR技術(shù)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的一項(xiàng)革命性創(chuàng)舉和里程碑。

PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件:
間日瘧PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10～100pmol
模板DNA 0.1～2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
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產(chǎn)品特點(diǎn):
間日瘧PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格PCR引物設(shè)計(jì)的目的是為了找到一對(duì)合適的核苷酸片段,，使其能有效地?cái)U(kuò)增模板DNA序列,。因此，引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否,。
要設(shè)計(jì)引物首先要找到DNA序列的保守區(qū),。同時(shí)應(yīng)預(yù)測(cè)將要擴(kuò)增的片段單鏈?zhǔn)欠裥纬啥?jí)結(jié)構(gòu)。如這個(gè)區(qū)域單鏈能形成二級(jí)結(jié)構(gòu),，就要避開(kāi)它,。如這一段不能形成二級(jí)結(jié)構(gòu)，那就可以在這一區(qū)域設(shè)計(jì)引物,。
現(xiàn)在可以在這一保守區(qū)域里設(shè)計(jì)一對(duì)引物,。一般引物長(zhǎng)度為15-30堿基,，擴(kuò)增片段長(zhǎng)度為100-600堿基對(duì)。
讓我們先看看P1引物,。一般引物序列中G+C含量一般為40%-60%,。而且四種堿基的分布隨機(jī)。不要有聚嘌呤或聚嘧啶存在,。否則P1引物設(shè)計(jì)的就不合理,。應(yīng)重新尋找區(qū)域設(shè)計(jì)引物。
同時(shí)引物之間也不能有互補(bǔ)性,，一般一對(duì)引物間不應(yīng)多于4個(gè)連續(xù)堿基的互補(bǔ),。
引物確定以后，可以對(duì)引物進(jìn)行必要的修飾,，例如可以在引物的5′端加酶切位點(diǎn)序列,；標(biāo)記生物素、熒光素,、等,，這對(duì)擴(kuò)增的特異性影響不大。但3′端不能進(jìn)行任何修飾,，因?yàn)橐锏难由焓菑?′端開(kāi)始的,。這里還需提醒的是3′端不要終止于密碼子的第3位，因?yàn)槊艽a子第3位易發(fā)生簡(jiǎn)并,，會(huì)影響擴(kuò)增的特異性與效率,。
阪崎腸桿菌rpsU-dnaG 基因熒光PCR檢測(cè)試劑盒間序列(探針?lè)ǎ┚C上所述我們可以歸納十條PCR引物的設(shè)計(jì)原則：
1、間日瘧PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格引物應(yīng)用核酸系列保守區(qū)內(nèi)設(shè)計(jì)并具有特異性,。
2,、 產(chǎn)物不能形成二級(jí)結(jié)構(gòu)。
3,、引物長(zhǎng)度一般在15~30堿基之間,。
4、G+C含量在40%~60%之間,。
5,、堿基要隨機(jī)分布。
6,、引物自身不能有連續(xù)4個(gè)堿基的互補(bǔ),。
7、引物之間不能有連續(xù)4個(gè)堿基的互補(bǔ),。
8,、引物5′端可以修飾。
9、引物3′端不可修飾,。
10,、引物3′端要避開(kāi)密碼子的第3位。
PCR引物設(shè)計(jì)的目的是找到一對(duì)合適的核苷酸片段,，使其能有效地?cái)U(kuò)增模板DNA序列,。如前述，引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否,。對(duì)引物的設(shè)計(jì)不可能有一種包羅萬(wàn)象的規(guī)則確保PCR的成功,，但遵循某些原則，則有助于引物的設(shè)計(jì),。
人黑色素瘤細(xì)胞,，MV3細(xì)胞英文名稱(chēng)：

人黑素瘤細(xì)胞，WM266-4細(xì)胞英文名稱(chēng)：

人橫紋肌瘤細(xì)胞,，A673細(xì)胞英文名稱(chēng)：

人橫紋肌肉瘤細(xì)胞,，A-204細(xì)胞英文名稱(chēng)：

人橫紋肌肉瘤細(xì)胞，RD細(xì)胞英文名稱(chēng)：

人紅白血病細(xì)胞,，HEL細(xì)胞英文名稱(chēng)：

人紅白血病細(xì)胞,，TF-1細(xì)胞英文名稱(chēng)：

人髓核細(xì)胞總RNAHNPCtRNA

人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHHSECtRNA*

人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞總RNAHIBEpiCtRNA原裝/進(jìn)口

人肝細(xì)胞總RNAHHtRNA

人肝臟星形細(xì)胞總RNAHHSteCtRNA*

人心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHCMECtRNA原裝/進(jìn)口

人膀胱平滑肌細(xì)胞，HBSMCGD細(xì)胞原代細(xì)胞

人膀胱上皮細(xì)胞原代細(xì)胞*
間日瘧PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格Nilered尼羅紅(>95%,BS)   規(guī)格：>98%,二氫嘧啶脫氫酶(DPD)抑制劑

N-PhenylureaN-苯基脲(>97%,BR)   規(guī)格：>98%,二水合物,類(lèi)受體拮抗劑

Okadaicacid,freeacid軟海綿酸(>95.0%,BC)   規(guī)格：>98%,二水合物可用于細(xì)胞培養(yǎng)

Okadaicacid,sodiumsalt軟海綿酸鈉(>95.0%,BC)   規(guī)格：>98%,反式,BR

Potassiumcarbonate,hydrate結(jié)晶碳酸鉀(>98%,BR)   規(guī)格：>98%,非肽類(lèi)生長(zhǎng)激素促分泌劑

Potassiumpyrophosphate,tetrabasic焦磷酸鉀(>97%,BC)   規(guī)格：>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品

Potassiumtungstate,dehydrate鎢酸鉀二水(>98%,BR)   規(guī)格：>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品

Quininehemisulfatesalthydrate硫酸奎寧水合物(>98%,BR)   規(guī)格：>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品

Sodiumphosphate,dibasic,dodecahydrate磷酸氫二鈉十二水(>98%,BR)   規(guī)格：>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品

Sodiumphosphotungstate,hydrate磷鎢酸鈉(>98%,BC)   規(guī)格：>98%,，分析標(biāo)準(zhǔn)品

Sodiumstearate硬脂酸鈉(>95%,BR)   規(guī)格：>98%,分子生物

Sodiumthiosulfateanhydrous硫代硫酸鈉無(wú)水(>98.5%,BC)   規(guī)格：>98%,分子生物學(xué)級(jí)

SulfoNHSLCBiotinSulfoNHSLCBiotin   規(guī)格：>98%,分子生物學(xué)級(jí)

SulfoNHSSSBiotinSulfoNHSSSBiotin   規(guī)格：>98%,分子生物學(xué)級(jí)

Tetraacetylribose四乙酰核糖(>98%(HPLC),BC)   規(guī)格：>98%,分子生物學(xué)級(jí)