技術(shù)概論:
大豆內(nèi)源基因PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發(fā)展起來的體外核酸擴(kuò)增技術(shù),。它具有特異,、敏感,、產(chǎn)率高,、快速、簡(jiǎn)便,、重復(fù)性好,、易自動(dòng)化等突出優(yōu)點(diǎn)；能在一個(gè)試管內(nèi)將所要研究的目的基因或某一DNA片段于數(shù)小時(shí)內(nèi)擴(kuò)增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷,；可從一根毛發(fā),、一滴血、甚至一個(gè)細(xì)胞中擴(kuò)增出足量的DNA供分析研究和檢測(cè)鑒定,。過去幾天幾星期才能做到的事情,，用PCR幾小時(shí)便可完成。PCR技術(shù)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的一項(xiàng)革命性創(chuàng)舉和里程碑,。

PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件:
大豆內(nèi)源基因PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10～100pmol
模板DNA 0.1～2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
?
產(chǎn)品特點(diǎn):
大豆內(nèi)源基因PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格PCR引物設(shè)計(jì)的目的是為了找到一對(duì)合適的核苷酸片段,，使其能有效地?cái)U(kuò)增模板DNA序列。因此,，引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否,。
要設(shè)計(jì)引物首先要找到DNA序列的保守區(qū)。同時(shí)應(yīng)預(yù)測(cè)將要擴(kuò)增的片段單鏈?zhǔn)欠裥纬啥?jí)結(jié)構(gòu)。如這個(gè)區(qū)域單鏈能形成二級(jí)結(jié)構(gòu),，就要避開它,。如這一段不能形成二級(jí)結(jié)構(gòu)，那就可以在這一區(qū)域設(shè)計(jì)引物,。
現(xiàn)在可以在這一保守區(qū)域里設(shè)計(jì)一對(duì)引物,。一般引物長(zhǎng)度為15-30堿基，擴(kuò)增片段長(zhǎng)度為100-600堿基對(duì),。
讓我們先看看P1引物,。一般引物序列中G+C含量一般為40%-60%。而且四種堿基的分布隨機(jī),。不要有聚嘌呤或聚嘧啶存在,。否則P1引物設(shè)計(jì)的就不合理。應(yīng)重新尋找區(qū)域設(shè)計(jì)引物,。
同時(shí)引物之間也不能有互補(bǔ)性,，一般一對(duì)引物間不應(yīng)多于4個(gè)連續(xù)堿基的互補(bǔ)。
引物確定以后,，可以對(duì)引物進(jìn)行必要的修飾,，例如可以在引物的5′端加酶切位點(diǎn)序列；標(biāo)記生物素,、熒光素,、等，這對(duì)擴(kuò)增的特異性影響不大,。但3′端不能進(jìn)行任何修飾,，因?yàn)橐锏难由焓菑?′端開始的。這里還需提醒的是3′端不要終止于密碼子的第3位,，因?yàn)槊艽a子第3位易發(fā)生簡(jiǎn)并,，會(huì)影響擴(kuò)增的特異性與效率。
阪崎腸桿菌rpsU-dnaG 基因熒光PCR檢測(cè)試劑盒間序列(探針法）綜上所述我們可以歸納十條PCR引物的設(shè)計(jì)原則：
1,、大豆內(nèi)源基因PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格引物應(yīng)用核酸系列保守區(qū)內(nèi)設(shè)計(jì)并具有特異性,。
2、 產(chǎn)物不能形成二級(jí)結(jié)構(gòu),。
3,、引物長(zhǎng)度一般在15~30堿基之間。
4,、G+C含量在40%~60%之間。
5,、堿基要隨機(jī)分布,。
6、引物自身不能有連續(xù)4個(gè)堿基的互補(bǔ)。
7,、引物之間不能有連續(xù)4個(gè)堿基的互補(bǔ),。
8、引物5′端可以修飾,。
9,、引物3′端不可修飾。
10,、引物3′端要避開密碼子的第3位,。
PCR引物設(shè)計(jì)的目的是找到一對(duì)合適的核苷酸片段，使其能有效地?cái)U(kuò)增模板DNA序列,。如前述,，引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否。對(duì)引物的設(shè)計(jì)不可能有一種包羅萬象的規(guī)則確保PCR的成功,，但遵循某些原則,，則有助于引物的設(shè)計(jì)。
胰酶中和液英文名稱：TNS

非酶細(xì)胞裂解液英文名稱：NECDS

細(xì)胞凍存液英文名稱：CFM

無血清細(xì)胞凍存液英文名稱：SF-CFM

臺(tái)盼藍(lán)英文名稱：TB

鹽緩沖注英文名稱：DPBS

平衡鹽溶液英文名稱：HBSS

滑膜細(xì)胞培養(yǎng)基SM-prf

髓核細(xì)胞培養(yǎng)基NPCM-prf*

人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,，EA,hy926細(xì)胞原裝/進(jìn)口

人前列腺癌細(xì)胞,，DU145細(xì)胞

人前列腺癌細(xì)胞，LNCAP細(xì)胞*

人前列腺癌細(xì)胞,，MDA-PCA-2b細(xì)胞原裝/進(jìn)口

人前列腺癌細(xì)胞,，PC-3細(xì)胞

人前列腺癌細(xì)胞，VCaP細(xì)胞*
大豆內(nèi)源基因PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格BupivacaineHCl鹽酸布比卡因   規(guī)格：>97%,進(jìn)分

ButenafineHCl鹽酸布替萘芬   規(guī)格：>97%,進(jìn)分

Captopril卡托普利   規(guī)格：>97%,進(jìn)分

Captopril卡托普利   規(guī)格：>97%,進(jìn)分

(S)-Carbidopa卡比多巴   規(guī)格：>97%,進(jìn)分,SigmaG9910

(S)-Carbidopa卡比多巴   規(guī)格：>97%,進(jìn)分,SigmaT4376

ChlormadinoneAcetate醋酸氯地孕酮   規(guī)格：>97%,進(jìn)分sigma貨號(hào)A3656

ChlormadinoneAcetate醋酸氯地孕酮   規(guī)格：>97%,進(jìn)分TCIA2215

CiprofloxacinHCL鹽酸環(huán)丙沙星   規(guī)格：>97%,美國(guó)進(jìn)口

CiprofloxacinHCL鹽酸環(huán)丙沙星   規(guī)格：>97%,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)

Cisatracuriumbesilate順苯磺阿曲庫銨   規(guī)格：>97%,液體

Cortisone21-acetate醋酸可的松   規(guī)格：>97%,一水物

Cortisone21-acetate醋酸可的松   規(guī)格：>97%,易氧化

Dantrolenesodium丹曲林鈉   規(guī)格：>97%,油狀

Dantrolenesodium丹曲林鈉   規(guī)格：>97%,游離酸