PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件:
口蹄疫病毒O亞型PCR檢測(cè)試劑盒圖片標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10～100pmol
模板DNA 0.1～2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul

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技術(shù)概論:
口蹄疫病毒O亞型PCR檢測(cè)試劑盒圖片聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發(fā)展起來(lái)的體外核酸擴(kuò)增技術(shù),。它具有特異,、敏感,、產(chǎn)率高、快速,、簡(jiǎn)便,、重復(fù)性好,、易自動(dòng)化等突出優(yōu)點(diǎn)；能在一個(gè)試管內(nèi)將所要研究的目的基因或某一DNA片段于數(shù)小時(shí)內(nèi)擴(kuò)增至十萬(wàn)乃至百萬(wàn)倍,使肉眼能直接觀察和判斷,；可從一根毛發(fā),、一滴血、甚至一個(gè)細(xì)胞中擴(kuò)增出足量的DNA供分析研究和檢測(cè)鑒定,。過(guò)去幾天幾星期才能做到的事情,，用PCR幾小時(shí)便可完成,。PCR技術(shù)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的一項(xiàng)革命性創(chuàng)舉和里程碑。
產(chǎn)品特點(diǎn):
口蹄疫病毒O亞型PCR檢測(cè)試劑盒圖片PCR引物設(shè)計(jì)的目的是為了找到一對(duì)合適的核苷酸片段,，使其能有效地?cái)U(kuò)增模板DNA序列,。因此，引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否,。
要設(shè)計(jì)引物首先要找到DNA序列的保守區(qū),。同時(shí)應(yīng)預(yù)測(cè)將要擴(kuò)增的片段單鏈?zhǔn)欠裥纬啥?jí)結(jié)構(gòu)。如這個(gè)區(qū)域單鏈能形成二級(jí)結(jié)構(gòu),，就要避開它,。如這一段不能形成二級(jí)結(jié)構(gòu)，那就可以在這一區(qū)域設(shè)計(jì)引物,。
現(xiàn)在可以在這一保守區(qū)域里設(shè)計(jì)一對(duì)引物,。一般引物長(zhǎng)度為15-30堿基，擴(kuò)增片段長(zhǎng)度為100-600堿基對(duì),。
讓我們先看看P1引物,。一般引物序列中G+C含量一般為40%-60%。而且四種堿基的分布隨機(jī),。不要有聚嘌呤或聚嘧啶存在,。否則P1引物設(shè)計(jì)的就不合理。應(yīng)重新尋找區(qū)域設(shè)計(jì)引物,。
同時(shí)引物之間也不能有互補(bǔ)性,，一般一對(duì)引物間不應(yīng)多于4個(gè)連續(xù)堿基的互補(bǔ),。
引物確定以后,，可以對(duì)引物進(jìn)行必要的修飾，例如可以在引物的5′端加酶切位點(diǎn)序列,；標(biāo)記生物素,、熒光素、等,，這對(duì)擴(kuò)增的特異性影響不大,。但3′端不能進(jìn)行任何修飾，因?yàn)橐锏难由焓菑?′端開始的,。這里還需提醒的是3′端不要終止于密碼子的第3位,，因?yàn)槊艽a子第3位易發(fā)生簡(jiǎn)并，會(huì)影響擴(kuò)增的特異性與效率,。
阪崎腸桿菌rpsU-dnaG 基因熒光PCR檢測(cè)試劑盒間序列(探針?lè)ǎ┚C上所述我們可以歸納十條PCR引物的設(shè)計(jì)原則：
1,、口蹄疫病毒O亞型PCR檢測(cè)試劑盒圖片引物應(yīng)用核酸系列保守區(qū)內(nèi)設(shè)計(jì)并具有特異性。
2,、 產(chǎn)物不能形成二級(jí)結(jié)構(gòu),。
3,、引物長(zhǎng)度一般在15~30堿基之間。
4,、G+C含量在40%~60%之間,。
5、堿基要隨機(jī)分布,。
6,、引物自身不能有連續(xù)4個(gè)堿基的互補(bǔ)。
7,、引物之間不能有連續(xù)4個(gè)堿基的互補(bǔ),。
8、引物5′端可以修飾,。
9,、引物3′端不可修飾。
10,、引物3′端要避開密碼子的第3位,。
PCR引物設(shè)計(jì)的目的是找到一對(duì)合適的核苷酸片段，使其能有效地?cái)U(kuò)增模板DNA序列,。如前述,，引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否。對(duì)引物的設(shè)計(jì)不可能有一種包羅萬(wàn)象的規(guī)則確保PCR的成功,，但遵循某些原則,，則有助于引物的設(shè)計(jì)。
人永生化表皮細(xì)胞,，HaCat細(xì)胞1x10^6cells/T25培養(yǎng)瓶

人永生化肝細(xì)胞,，C3A細(xì)胞1x10^6cells/T25培養(yǎng)瓶

人尤文氏肉瘤細(xì)胞，TC-32細(xì)胞1x10^6cells/T25培養(yǎng)瓶

人早幼粒白血病細(xì)胞,，HL60細(xì)胞1x10^6cells/T25培養(yǎng)瓶

人正常肝細(xì)胞,，L02細(xì)胞1x10^6cells/T25培養(yǎng)瓶

人正常肝細(xì)胞，QSG-7701細(xì)胞1x10^6cells/T25培養(yǎng)瓶

人正常肝細(xì)胞,，WRL68細(xì)胞1x10^6cells/T25培養(yǎng)瓶

人卵巢癌細(xì)胞,，OV-90細(xì)胞*

人卵巢癌細(xì)胞，SK-OV-3細(xì)胞原裝/進(jìn)口

人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞,，ES-2細(xì)胞

人卵巢腺癌細(xì)胞,，OVCAR-3細(xì)胞*

人支氣管上皮細(xì)胞，HBECTR細(xì)胞原代細(xì)胞原裝/進(jìn)口

人直腸成纖維細(xì)胞,，HRFCP細(xì)胞原代細(xì)胞

人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞原代細(xì)胞*

人子宮平滑肌細(xì)胞原代細(xì)胞原裝/進(jìn)口
口蹄疫病毒O亞型PCR檢測(cè)試劑盒圖片AcidFuchsin酸性品紅   規(guī)格：>98.0%(HPLC)

Alizarincomplexone茜素絡(luò)合指示劑(IND)   規(guī)格：>98.0%(HPLC)

Alizarincomplexone茜素絡(luò)合指示劑(高純級(jí),98%)   規(guī)格：>98.0%(HPLC)

ArsenazoI偶氮胂I   規(guī)格：>98.0%(HPLC)

BasicFuchsin堿性品紅(生物染色級(jí))   規(guī)格：>98.0%(HPLC)

BasicFuchsin堿性品紅(分析標(biāo)準(zhǔn)品)   規(guī)格：>98.0%(HPLC)

Bromothymolblue溴百里香酚藍(lán)   規(guī)格：>98.0%(HPLC)

BismuthiolII鉍試劑Ⅱ(CP)   規(guī)格：>98.0%(HPLC)

BismuthiolII鉍試劑Ⅱ(98%)   規(guī)格：>98.0%(HPLC)

BeryllonII鈹試劑Ⅱ   規(guī)格：>98.0%(HPLC)

Bromopyrogallolred溴鄰苯三酚紅   規(guī)格：>98.0%(HPLC)

BasicFuchsin鹽酸副品紅   規(guī)格：>98.0%(HPLC)

BrilliantYellow燦爛黃   規(guī)格：>98.0%(HPLC)

Congored剛果紅(AR)   規(guī)格：>98.0%(HPLC)

Calconcarboxylicacid鈣羧酸指示劑(AR)   規(guī)格：>98.0%(HPLC)