PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件:
鯉春病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10～100pmol
模板DNA 0.1～2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul

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技術(shù)概論:
鯉春病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發(fā)展起來的體外核酸擴(kuò)增技術(shù),。它具有特異,、敏感,、產(chǎn)率高,、快速、簡便,、重復(fù)性好,、易自動化等突出優(yōu)點；能在一個試管內(nèi)將所要研究的目的基因或某一DNA片段于數(shù)小時內(nèi)擴(kuò)增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷,；可從一根毛發(fā),、一滴血、甚至一個細(xì)胞中擴(kuò)增出足量的DNA供分析研究和檢測鑒定,。過去幾天幾星期才能做到的事情,，用PCR幾小時便可完成。PCR技術(shù)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的一項革命性創(chuàng)舉和里程碑,。
產(chǎn)品特點:
鯉春病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格PCR引物設(shè)計的目的是為了找到一對合適的核苷酸片段,，使其能有效地擴(kuò)增模板DNA序列,。因此，引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否,。
要設(shè)計引物首先要找到DNA序列的保守區(qū),。同時應(yīng)預(yù)測將要擴(kuò)增的片段單鏈?zhǔn)欠裥纬啥壗Y(jié)構(gòu)。如這個區(qū)域單鏈能形成二級結(jié)構(gòu),，就要避開它,。如這一段不能形成二級結(jié)構(gòu)，那就可以在這一區(qū)域設(shè)計引物,。
現(xiàn)在可以在這一保守區(qū)域里設(shè)計一對引物,。一般引物長度為15-30堿基，擴(kuò)增片段長度為100-600堿基對,。
讓我們先看看P1引物,。一般引物序列中G+C含量一般為40%-60%。而且四種堿基的分布隨機(jī),。不要有聚嘌呤或聚嘧啶存在,。否則P1引物設(shè)計的就不合理。應(yīng)重新尋找區(qū)域設(shè)計引物,。
同時引物之間也不能有互補(bǔ)性,，一般一對引物間不應(yīng)多于4個連續(xù)堿基的互補(bǔ)。
引物確定以后,，可以對引物進(jìn)行必要的修飾,，例如可以在引物的5′端加酶切位點序列；標(biāo)記生物素,、熒光素,、等，這對擴(kuò)增的特異性影響不大,。但3′端不能進(jìn)行任何修飾,，因為引物的延伸是從3′端開始的。這里還需提醒的是3′端不要終止于密碼子的第3位,，因為密碼子第3位易發(fā)生簡并,，會影響擴(kuò)增的特異性與效率。
阪崎腸桿菌rpsU-dnaG 基因熒光PCR檢測試劑盒間序列(探針法）綜上所述我們可以歸納十條PCR引物的設(shè)計原則：
1,、鯉春病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格引物應(yīng)用核酸系列保守區(qū)內(nèi)設(shè)計并具有特異性,。
2、 產(chǎn)物不能形成二級結(jié)構(gòu),。
3,、引物長度一般在15~30堿基之間。
4、G+C含量在40%~60%之間,。
5,、堿基要隨機(jī)分布。
6,、引物自身不能有連續(xù)4個堿基的互補(bǔ),。
7、引物之間不能有連續(xù)4個堿基的互補(bǔ),。
8,、引物5′端可以修飾。
9,、引物3′端不可修飾,。
10、引物3′端要避開密碼子的第3位,。
PCR引物設(shè)計的目的是找到一對合適的核苷酸片段,，使其能有效地擴(kuò)增模板DNA序列。如前述,，引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否。對引物的設(shè)計不可能有一種包羅萬象的規(guī)則確保PCR的成功,，但遵循某些原則,，則有助于引物的設(shè)計。
小鼠癌細(xì)胞,，4T1細(xì)胞1x10^6cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞,，G422細(xì)胞1x10^6cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠腎癌細(xì)胞，RENCA細(xì)胞1x10^6cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠腎小球系膜細(xì)胞,，SV40-MES-13細(xì)胞1x10^6cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠腎足細(xì)胞,，MPC-5細(xì)胞1x10^6cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞，RGC-5細(xì)胞1x10^6cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠樹突狀細(xì)胞,，DC2.4細(xì)胞1x10^6cells/T25培養(yǎng)瓶

兔支持細(xì)胞原代細(xì)胞*

兔骨骼肌成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞原裝/進(jìn)口

兔骨骼肌細(xì)胞原代細(xì)胞

人腦膜細(xì)胞總RNAHMCtRNA*

人神經(jīng)元總RNAHNtRNA原裝/進(jìn)口

人小腦顆粒細(xì)胞總RNAHCGCtRNA

人海馬趾神經(jīng)細(xì)胞總RNAHN-htRNA*

人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞總RNAHOPCtRNA原裝/進(jìn)口
鯉春病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格Acenaphthylene苊烯   規(guī)格：>98.0%(T)

Diphenylguanidine二苯胍   規(guī)格：>98.0%(T)

13-Acetyl-9-dihydrobaccatinIII13-乙?；?9-羥基巴卡丁III   規(guī)格：>98.0%(T)

Dihydrotanshinone二氫丹參酮   規(guī)格：>98.0%(T)

Boronsolution硼標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/ml,溶劑：水）   規(guī)格：>98.0%(T)

Boronsolution硼標(biāo)準(zhǔn)溶液（100µg/mL,基體：水）   規(guī)格：>98.0%(T)

Bismuthsolution鉍標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/ml,溶劑:1.5mol/LHNO3）   規(guī)格：>98.0%(T)

Coppersolution銅標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000mg/l,溶劑：1%硫酸）   規(guī)格：>98.0%(T)

Coppersolution銅標(biāo)準(zhǔn)溶液（500mg/l,溶劑:1%硫酸）   規(guī)格：>98.0%(T)

Chromiumsolution鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液（三價鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液1000μg/ml）   規(guī)格：>98.0%(T)

Chromiumsolution鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液（500mg/L,溶劑：水）   規(guī)格：>98.0%(T)

Chromiumsolution鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液（100µg/mL,基體：水）   規(guī)格：>98.0%(T)

Cobaltstandard鈷標(biāo)準(zhǔn)溶液（500mg/L,溶劑：1%鹽酸）   規(guī)格：>98.0%(T)

Cobaltstandard鈷標(biāo)準(zhǔn)溶液（100(20℃)µg/mL,基體:1%HNO3）   規(guī)格：>98.0%(T)

Dysprosiumstandard鏑標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/ml）   規(guī)格：>98.0%(T)