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詳細(xì)介紹
技術(shù)概論:
利什曼原蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒哪里有賣(mài)聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發(fā)展起來(lái)的體外核酸擴(kuò)增技術(shù),。它具有特異,、敏感、產(chǎn)率高,、快速,、簡(jiǎn)便、重復(fù)性好,、易自動(dòng)化等突出優(yōu)點(diǎn),；能在一個(gè)試管內(nèi)將所要研究的目的基因或某一DNA片段于數(shù)小時(shí)內(nèi)擴(kuò)增至十萬(wàn)乃至百萬(wàn)倍,使肉眼能直接觀察和判斷；可從一根毛發(fā),、一滴血,、甚至一個(gè)細(xì)胞中擴(kuò)增出足量的DNA供分析研究和檢測(cè)鑒定。過(guò)去幾天幾星期才能做到的事情,，用PCR幾小時(shí)便可完成。PCR技術(shù)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的一項(xiàng)革命性創(chuàng)舉和里程碑,。
產(chǎn)品名稱 | 利什曼原蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒哪里有賣(mài) |
規(guī)格 | 50T |
價(jià)格 | 電詢 |
PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件:
利什曼原蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒哪里有賣(mài)標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10～100pmol
模板DNA 0.1～2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
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產(chǎn)品特點(diǎn):
利什曼原蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒哪里有賣(mài)PCR引物設(shè)計(jì)的目的是為了找到一對(duì)合適的核苷酸片段,，使其能有效地?cái)U(kuò)增模板DNA序列。因此,，引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否,。
要設(shè)計(jì)引物首先要找到DNA序列的保守區(qū)。同時(shí)應(yīng)預(yù)測(cè)將要擴(kuò)增的片段單鏈?zhǔn)欠裥纬啥?jí)結(jié)構(gòu),。如這個(gè)區(qū)域單鏈能形成二級(jí)結(jié)構(gòu),，就要避開(kāi)它。如這一段不能形成二級(jí)結(jié)構(gòu),，那就可以在這一區(qū)域設(shè)計(jì)引物,。
現(xiàn)在可以在這一保守區(qū)域里設(shè)計(jì)一對(duì)引物。一般引物長(zhǎng)度為15-30堿基,，擴(kuò)增片段長(zhǎng)度為100-600堿基對(duì),。
讓我們先看看P1引物。一般引物序列中G+C含量一般為40%-60%,。而且四種堿基的分布隨機(jī),。不要有聚嘌呤或聚嘧啶存在。否則P1引物設(shè)計(jì)的就不合理,。應(yīng)重新尋找區(qū)域設(shè)計(jì)引物,。
同時(shí)引物之間也不能有互補(bǔ)性，一般一對(duì)引物間不應(yīng)多于4個(gè)連續(xù)堿基的互補(bǔ),。
引物確定以后,，可以對(duì)引物進(jìn)行必要的修飾,，例如可以在引物的5′端加酶切位點(diǎn)序列；標(biāo)記生物素,、熒光素,、等，這對(duì)擴(kuò)增的特異性影響不大,。但3′端不能進(jìn)行任何修飾,，因?yàn)橐锏难由焓菑?′端開(kāi)始的。這里還需提醒的是3′端不要終止于密碼子的第3位,，因?yàn)槊艽a子第3位易發(fā)生簡(jiǎn)并,，會(huì)影響擴(kuò)增的特異性與效率。
阪崎腸桿菌rpsU-dnaG 基因熒光PCR檢測(cè)試劑盒間序列(探針?lè)ǎ┚C上所述我們可以歸納十條PCR引物的設(shè)計(jì)原則：
1,、利什曼原蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒哪里有賣(mài)引物應(yīng)用核酸系列保守區(qū)內(nèi)設(shè)計(jì)并具有特異性,。
2、 產(chǎn)物不能形成二級(jí)結(jié)構(gòu),。
3,、引物長(zhǎng)度一般在15~30堿基之間。
4,、G+C含量在40%~60%之間,。
5、堿基要隨機(jī)分布,。
6,、引物自身不能有連續(xù)4個(gè)堿基的互補(bǔ)。
7,、引物之間不能有連續(xù)4個(gè)堿基的互補(bǔ),。
8、引物5′端可以修飾,。
9,、引物3′端不可修飾。
10,、引物3′端要避開(kāi)密碼子的第3位,。
PCR引物設(shè)計(jì)的目的是找到一對(duì)合適的核苷酸片段，使其能有效地?cái)U(kuò)增模板DNA序列,。如前述,，引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否。對(duì)引物的設(shè)計(jì)不可能有一種包羅萬(wàn)象的規(guī)則確保PCR的成功,，但遵循某些原則,，則有助于引物的設(shè)計(jì)。
小鼠子細(xì)胞,，U14細(xì)胞1x10^6cells/T25培養(yǎng)瓶
鴨胚胎成纖維細(xì)胞,，Duckembryo細(xì)胞
永生型大鼠肝儲(chǔ)脂細(xì)胞,，HSC-T6細(xì)胞1x10^6cells/T25培養(yǎng)瓶
幼倉(cāng)鼠腎細(xì)胞，BHK-21細(xì)胞1x10^6cells/T25培養(yǎng)瓶
正常小鼠Sertoli細(xì)胞,，TM4細(xì)胞1x10^6cells/T25培養(yǎng)瓶
中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞,，CHL細(xì)胞1x10^6cells/T25培養(yǎng)瓶
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞k1亞克隆系，CHO-K1細(xì)胞1x10^6cells/T25培養(yǎng)瓶
人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞HBMEC原裝/進(jìn)口
人腦血管平滑肌細(xì)胞HBVSMC
人腦血管外膜成纖維細(xì)胞HBVSMC*
人腦血管周細(xì)胞HBVP原裝/進(jìn)口
人脈絡(luò)叢內(nèi)皮細(xì)胞HCPEC
人脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞HCPEpiC*
人脈絡(luò)叢成纖維細(xì)胞HCPF原裝/進(jìn)口
兔冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代細(xì)胞
利什曼原蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒哪里有賣(mài)Leadstandard鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液(100µg/mL,,基體:1%HNO3) 規(guī)格：>98.0%,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
Lutetiumstandard镥標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/mlin10%HCl) 規(guī)格：>98.0%,熔點(diǎn)18
Molybdenumstandard鉬標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml) 規(guī)格：>98.0%,油狀
Molybdenumstandard鉬標(biāo)準(zhǔn)溶液(100µg/mL,基體:1%HCl) 規(guī)格：>98.0%;FLT3拮抗劑
Nickelstandard水質(zhì)鎳標(biāo)樣(濃度范圍:0.959-1.01(mg/L),分析標(biāo)準(zhǔn)品) 規(guī)格：>98.0,BR
Niobiumstandard鈮標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml) 規(guī)格：>98.5%
NickelStandard鎳標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/mL,，基體:1%HNO3) 規(guī)格：>98.5%
Potassiumstandard鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑：水) 規(guī)格：>98.5%
PotassiumSolution鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000µg/mL,基體:1%HCl) 規(guī)格：>98.5%
Praseodymiumstandard鐠標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml) 規(guī)格：>98.5%
Rutheniumsolution釕標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,介質(zhì)：2.0mol/LHCl) 規(guī)格：>98.5%
Rhodiumsolution銠標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑:2.0Mol/LHCl) 規(guī)格：>98.5%
Rheniumstandard錸標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml;溶劑：1.5mol/L硝酸) 規(guī)格：>98.5%
Silicondioxidesolution二氧化硅標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,介質(zhì)：0.05mol/LNaOH) 規(guī)格：>98.5%
Silverstandard銀標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml) 規(guī)格：>98.5%
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