詳細介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:脊髓灰質(zhì)炎病毒3型PCR檢測試劑盒
英文名稱:
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,,避免反復(fù)凍融,。
公司產(chǎn)品僅用于科研運輸:低溫、避光,,快遞免費送貨上門,。
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PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,,在72℃ 保7min,。
3:PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油;否則,,直接取5-10μl電泳檢測,。
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例),。由于標準品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。
1. 標記 6 個離心管,,分別為 7,6,,5,,4,3,,2,。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,,下同),。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),,充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用,。
4. 換槍頭,,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品,。放冰上待用。
5. 換槍頭,,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品,。放冰上待用,。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用,。
二,、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,,則需要進行 N+2 個樣品提取,,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管,。
三,、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),,則標記 N+9 個 PCR 管,,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),,6 個用于標準曲線,。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),,則標記 N+4 個 PCR 管,,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),,1 個用于PCR 陽性對照,。
實驗外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測,、DNA甲基化檢測,、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片,、表達譜芯片,、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC,、iTRAQ、TMT,、Label-free,、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR,、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot,、Co-ip EMSA、CHIP,、熒光,、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色,、組織切片,、組化,、流式細胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS,、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞,、細胞模型、動物模型構(gòu)建
人總前列腺特異抗原(tPSA) 試劑盒 ELISAPorcine Ierleukin 1, IL-1 Elisa Kit
人總蛋白S(TPS)elisa試劑盒Porcine Collagen Type Ⅲ, Col Ⅲ Elisa Kit
人總蛋白C(TPC)試劑盒ELISAPorcine iercellular adhesion molecule 2, ICAM-2 Elisa Kit
人總膽汁suan(TBA)試劑盒ELISAPorcine iercellular adhesion molecule 3, ICAM-3 Elisa Kit
人總膽汁suan(TBA) 試劑盒 ELISAPorcine plasminogen activator inhibitor 1, PAI-1 Elisa Kit
人自然抗性相關(guān)巨噬細胞蛋白2(NRAMP-2)ELISA檢測試劑盒Porcine plasminogen activator inhibitor, PAI Elisa Kit
人自然抗性相關(guān)巨噬細胞蛋白1(NRAMP-1)ELISA試劑盒Porcine Fibrinogen Degradation Product, FDP Elisa Kit
人樁蛋白(Pax)試劑盒 ELISAPorcine thrombomodulin, TM Elisa Kit
人樁蛋白(Pax)elisa試劑盒Porcine platelet-derived growth factor, PDGF Elisa Kit
人轉(zhuǎn)移因子(TF)試劑盒elisaPorcine oxidized lowdensity lipoprotein, OxLDL Elisa Kit
人轉(zhuǎn)移因子(TF) ELISA檢測試劑盒 Porcine Tissue-type Plasiminogen Actilyse, t-PA Elisa Kit
人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)試劑盒elisaPorcine Tissue factor, TF Elisa Kit
人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒 Porcine Ierleukin 1 receptor aagonist, IL-1ra Elisa Kit
人轉(zhuǎn)錄中介因子1-β(TRIM28/KAP1/RNF96/TIF1B)試劑盒ELISAPorcine Methemoglobin, MHB Elisa Kit
脊髓灰質(zhì)炎病毒3型PCR檢測試劑盒蘇氨酰tRNA合成酶2(TARS2)重組蛋白Recombina Threonyl tRNA Syhetase 2, Mitochondrial (TARS2)
蘇氨酰tRNA合成酶2(TARS2)重組蛋白Recombina Threonyl tRNA Syhetase 2, Mitochondrial (TARS2)
精氨酰tRNA合成酶2(RARS2)重組蛋白Recombina Arginyl tRNA Syhetase 2, Mitochondrial (RARS2)
羥suan氧化酶2(HAO2)重?