詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:登革熱病毒Ⅰ、Ⅱ型PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱:
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,,避免反復(fù)凍融,。
公司產(chǎn)品僅用于科研運(yùn)輸:低溫、避光,,快遞免費(fèi)送貨上門,。
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PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,,不加或添加石蠟油,。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min,。
3:PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油;否則,,直接取5-10μl電泳檢測(cè),。
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例),。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,,分別為 7,6,,5,,4,3,,2,。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,,下同),。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽(yáng)性對(duì)照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),,充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用,。
4. 換槍頭,,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品,。放冰上待用,。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),,充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用,。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品,。放冰上待用。
二,、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,,本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品,,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,,多出的一個(gè)用作樣品制備陽(yáng)性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管,。
三,、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),,則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),,6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線,。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),,則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),,1 個(gè)用于PCR 陽(yáng)性對(duì)照。
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片,、SNP檢測(cè),、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片,、LncRNA芯片,、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE,、SILAC,、iTRAQ,、TMT、Label-free,、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取,、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot,、Co-ip EMSA,、CHIP、熒光,、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色,、特殊染色、組織切片,、組化,、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS,、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞,、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
細(xì)胞周期素M4ELISA試劑盒 CCNM4Mouse ai-IgE receptor aibody Elisa Kit
細(xì)胞周期素M2ELISA試劑盒 CCNM2Mouse Ai-myocardial aibody, AMA Elisa Kit
細(xì)胞周期素M1ELISA試劑盒 CCNM1Mouse Ceruloplasmin, CP/CER Elisa Kit
細(xì)胞周期素L2ELISA試劑盒 CCNL2Mouse p53/tumor protein, p53/TP53 Elisa Kit
細(xì)胞周期素L1ELISA試劑盒 CCNL1Mouse Cyclic guanosine monophosphate, cGMP Elisa Kit
細(xì)胞周期素KELISA試劑盒 CCNKMouse nitric oxide syhase, NOS Elisa Kit
細(xì)胞周期素JELISA試劑盒 CCNJMouse inducible nitric oxide syhase, iNOS Elisa Kit
細(xì)胞周期素IELISA試劑盒 CCNIMouse Endothelial nitric oxide syhase, eNOS Elisa Kit
細(xì)胞周期素I2ELISA試劑盒 CCNI2Mouse Histamine, HIS Elisa Kit
細(xì)胞周期素HELISA試劑盒 CCNHMouse lipoprotein-associated phospholipase A2, Lp-PL-A2 Elisa Kit
細(xì)胞周期素GELISA試劑盒 CCNGMouse Heat Shock Protein 90, Hsp-90 Elisa Kit
細(xì)胞周期素G2ELISA試劑盒 CCNG2Mouse Heat Shock Protein 70, Hsp-70 Elisa Kit
細(xì)胞周期素FELISA試劑盒 CCNFMouse adiponectin, ADP Elisa Kit
細(xì)胞周期素EELISA試劑盒 CCNEMouse Heat Shock Protein 40, Hsp-40 Elisa Kit
登革熱病毒Ⅰ,、Ⅱ型PCR檢測(cè)試劑盒核糖核suan酶A3(RNASE3)重組蛋白R(shí)ecombina Ribonuclease A3 (RNASE3)
周期素依賴性激酶5(CDK5)重組蛋白R(shí)ecombina Cyclin Depende Kinase 5 (CDK5)
過(guò)氧化還原酶2(PRDX2)重組蛋白R(shí)ecombina Peroxiredoxin 2 (PRDX2)
天冬氨酰tRNA合成酶2(DARS2)重組蛋白R(shí)ecombina Aspartyl tRNA Syhetase 2, Mitochondrial (DARS2)
腎酶(RN?