詳細介紹
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,,凍存于-20℃,,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù),。
中文名稱 | 沙門氏菌invA基因(284bp)常規(guī)PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 | |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T |
保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
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實驗過程:
一,、試劑準備 | 二,、操作步驟 |
1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,,而不能從無到有,,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物,??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計,。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP,、dCTP,、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 1.在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油,。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測,。
人抗腎小球基底膜抗體(GBM)檢測試劑盒elisaHuman Leptin, LEP Elisa Kit
人抗腎小管基底膜抗體(TBM)ELISA試劑盒 Human growth hormone, HGH Elisa Kit
人抗腎小管基底膜抗體(TBM)ELISA檢測試劑盒Human Erythropoietin, EPO Elisa Kit
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人抗腎上腺皮質(zhì)抗體(AAA) ELISA Kithuman β-tubulin, TUBB Elisa Kit
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人抗神經(jīng)元核抗體2型/抗Ri抗體(ANNA-2/Ri) ELISA試劑盒 Human total prostate s pecific aigen, tPSA Elisa Kit
人抗神經(jīng)元核抗體1型/抗Hu抗體(ANNA-1/Hu)elisa試劑盒Human ai-immunodeficiency virus aibody, HIV Elisa Kit
人抗神經(jīng)元核抗體1型/抗Hu抗體(ANNA-1/Hu) 試劑盒 ELISAHuman Ureaplasma urealyticum aibody, UU-Ab Elisa Kit
人抗抗體(GM1)檢測試劑盒elisaHuman complex edprostate specific aigen, cPSA Elisa Kit
人抗抗體(GM1)ELISA KitHuman Herpes simplexvirus Ⅱ aibody, HSVⅡ-Ab Elisa Kit
人抗神經(jīng)膠質(zhì)纖維suan性蛋白(GFAP)自身抗體ELISA檢測試劑盒Human Estrogen-induced protein pS2 Elisa Kit
人抗殺菌通透性增高蛋白抗體(BPI-Ab)試劑盒ELISAHuman bacterial vaginosis, BV Elisa Kit
人抗殺菌通透性增高蛋白抗體(BPI-Ab)試劑盒 ELISAHuman Herpes simplexvirusⅠaibody, HSVⅠAb Elisa Kit
沙門氏菌invA基因(284bp)常規(guī)PCR檢測試劑盒Phosphoinositide Depende Protein Kinase 1 (PDPK1)蛋白二硫化物異構(gòu)酶A4(PDIA4)重組蛋白
11-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 1 (HSD11b1)蛋白二硫化物異構(gòu)酶A5(PDIA5)重組蛋白
11-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 1 (HSD11b1)蛋白二硫化物異構(gòu)酶A6(PDIA6)重組蛋白
7-Dehydrocholesterol Reductase ?
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織,、細胞、血液,、細菌等很多材料,,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息,、物種,、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品,。
4)樣本保存于液氮或干冰,,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法,。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加,。運用該技術(shù)可以對DNA,、RNA樣品進行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對定量分析,、基因表達差異分析,、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計,、RNA提取,、cDNA合成、qPCR,。