產品簡介
供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 50T |
---|---|---|---|
應用領域 | 環(huán)保,生物產業(yè) | 主要用途 | 僅供科研實驗 |
英文名稱 | Schistosoma curassoniPCR | 規(guī)格 | 50T |
分類 | PCR檢測試劑盒 | 保存條件 | -20℃避光保存 |
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上海邦景實業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
13585886131 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2023-04-11 13:29:03瀏覽次數:259
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供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 50T |
---|---|---|---|
應用領域 | 環(huán)保,生物產業(yè) | 主要用途 | 僅供科研實驗 |
英文名稱 | Schistosoma curassoniPCR | 規(guī)格 | 50T |
分類 | PCR檢測試劑盒 | 保存條件 | -20℃避光保存 |
產品屬性:
產品名稱:柯拉松血吸蟲PCR檢測試劑盒
英文名稱:Schistosoma curassoniPCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,,避免反復凍融。
公司產品僅用于科研運輸:低溫,、避光,,快遞免費送貨上門。
實驗外包:
1.基因組學:基因芯片,、SNP檢測,、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學:microRNA芯片,、LncRNA芯片,、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質組學:2D-DIGE,、SILAC,、iTRAQ、TMT,、Label-free,、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR,、Real-timePCR
5.蛋白質檢測:Western blot,、Co-ip EMSA、CHIP,、熒光,、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色,、組織切片,、組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS,、LC-MS,、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型,、動物模型構建
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PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油,。
2:調整好反應程序,。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴增,。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min,。
3:PCR試劑盒結束反應,,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,,需用100μl進行抽提反應混合液,,以除去石蠟油;否則,,直接取5-10μl電泳檢測,。
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使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例),。由于標準品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。
1. 標記 6 個離心管,,分別為 7,6,,5,,4,3,,2,。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,,下同),。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),,充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用,。
4. 換槍頭,,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品,。放冰上待用,。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),,充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用,。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品,。放冰上待用。
二,、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,,本產品跟市場上絕大多數核酸純化產品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,,則需要進行 N+2 個樣品提取,,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管,。
三,、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,,則標記 N+9 個 PCR 管,,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),,6 個用于標準曲線,。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,,則標記 N+4 個 PCR 管,,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),,1 個用于PCR 陽性對照,。