McCoy’s 5A基礎(chǔ)培養(yǎng)基細(xì)胞的相關(guān)*產(chǎn)品：紫色孢囊桿菌酯（CHE）活性比色法定量檢測試劑盒
Ras信號轉(zhuǎn)導(dǎo)KSR1蛋白抗體乙酰堿酯活性比色法定量檢測試劑盒
柱式病毒DNA提取試劑盒丁酰酯定量檢測試劑盒
ABTS液體底物銅藍(lán)蛋白活性比色法定量檢測試劑盒

產(chǎn)品名稱：McCoy’s 5A基礎(chǔ)培養(yǎng)基細(xì)胞

英文名稱：McCoy’s 5A

貨號：BJ-01X10001

產(chǎn)品規(guī)格：500ml

 

我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,，購買到貨后,，公司產(chǎn)品僅用于科研由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，*進(jìn)口來源，*保證5代以內(nèi),，活力>95%,，無細(xì)菌、真菌,、支原體污染,。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次,。

培養(yǎng)操作步驟 ：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈,，不要用紗布,；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時,；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測,。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基,。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）,。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）,。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染,。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體,，使細(xì)胞均勻分散,，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡,。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min,，棄上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基,，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng),。

6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代,。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn),。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；

5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

豬抑瘤素M受體(OSMR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒4-氧苯乙羥乙纖維素 1500～2500mpa.s,，25℃乙酰(降二烯)合銠 97%

豬Rho家族GTP1(RND1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒1--2-吡咯烷羥乙纖維素 2600～3300mpa.s,，25℃乙酰酰雙(亞乙)化銠 99%

豬結(jié)構(gòu)特異性識別蛋白1(SSRP1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒4-乙羥乙纖維素 5000～6400mpa.s，25℃二羰乙酰銠 99%

豬蛋白激活受體3(PAR3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒4-乙四溴化碳 98%三苯膦醋鈀 Pd 14.2%

豬Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  4-乙四溴化碳 99%1,4-雙(二苯膦丁烷)二化鈀 98%

豬核孔蛋白155kda(NUP155)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒吡啶鹽鹽銀 99.9%,，≤0.1μm雙(乙)化鈀(II)  Pd 41.0%

豬胸腺白血病抗原(TLA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 吡啶鹽鹽銀 99.95%,，1.0μm雙(二苯膦) 98%

豬單核趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 吡啶鹽鹽銀 99.9%,≤0.5μm1,1'-雙(二-叔丁膦)二茂鐵 98%

豬VI型膠原α3(COL6α3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 硝苯吡啶三 CP,98.5%（劇品）1,5-雙(二苯膦)戊烷  97%

豬5核苷(5-NT)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  硝苯吡啶2-氨-2--1-  超純級, ≥99.0% (GC)1,1'-雙(二苯膦)二茂鐵 97%

豬纖蛋白原(FG)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 硝苯吡啶2-氨-2--1- 97%2,2'-聯(lián)吡啶-4,4'-二 96%

豬巨噬炎性蛋白5(MIP-5)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2,2'-聯(lián)吡啶醋丁纖維素 50-54%1,4-雙(二苯膦)丁烷 96%

豬血小板球蛋白β(βTG/PBP/CXCL7/NAP2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2,2'-聯(lián)吡啶 AR,99.5% (劇品)雙(三苯膦)化鎳(Ⅱ) 98%

豬脂肪型脂肪結(jié)合蛋白(FABP4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 2,2'-聯(lián)吡啶 光譜級，≥99.5%(GC)(R)-(-)-聯(lián)萘酚磷酯 98%

McCoy’s 5A基礎(chǔ)培養(yǎng)基細(xì)胞豬蛋白激C-θ(PKCθ)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2,2'-聯(lián)吡啶  色譜級,，≥99.8%(GC)[1,3-雙（二苯膦）烷]二化鈀 Pd 18%

豬破骨相關(guān)受體(OSCAR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒4,4'-聯(lián)吡啶 農(nóng)殘級 (劇品)二(苯)二化鈀  Pd 27.7%