實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),，懸浮細胞可使用滴片法,；

2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；

3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時動作要輕,；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。

產(chǎn)品名稱：小鼠子宮頸癌細胞

產(chǎn)品英文：U14細胞

貨號：BJ-01X1700

細胞培養(yǎng)條件：DMEM +10%FBS+1%P/S

生長狀態(tài)：貼壁生長

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

是否提供細胞STR鑒定：不提供STR鑒定報告

保存培養(yǎng)溫度（℃）37

運輸溫度（℃）：常溫

我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,，購買到貨后,，公司產(chǎn)品僅用于科研由我們實驗室擴增,、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，*進口來源,，*保證5代以內(nèi),，活力>95%，無細菌,、真菌,、支原體污染。 細胞到達客戶手中,，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。

培養(yǎng)操作步驟 ：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布,；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）,；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中,；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出,，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱,；準備一個15mL無菌的離心管,，加入8mL預熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出,，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯,，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）,。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）,。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染,。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體,，使細胞均勻分散,，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡,。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min,，棄上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液,。

5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),，補加適量的培養(yǎng)基,，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）第二天觀察細胞貼壁生長情況,，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞,。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代,。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。

凝血因子XII(F12)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  葡聚糖T70乙 AR,99.0%β-萘酚 AR

凝血因子V(F5)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  葡聚糖T70己二 超純級，≥99.5% (HPLC)β-萘酚 分析標準品, ≥99.5%(GC)

凝血因子XI(F11)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  葡聚糖T100苯  ACS, ≥99.0%β-萘酚 熒光指示劑, ≥99.0% (GC

凝血因子XIII A1多肽(F13A1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  葡聚糖T100 AR,99.5% (劇品) Standard for GC,≥99.8% (GC)

凝血因子XIII B多肽(F13B)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  葡聚糖T110 光譜級,，≥99.5%(GC)鄰苯二 AR,，98%

絲切蛋白2(CFL2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 葡聚糖T110  色譜級，≥99.8%(GC)3-二乙 99%

抗膠原蛋白抗體(CLA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 葡聚糖T200乙酐 AR,98.5%（易制品）N,N-二正辛 95%

XV 型膠原(COL15)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 葡聚糖T200冰乙 AR,99.5%癸 98%

II型膠原(COL2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 葡聚糖T500雙酚A CP3-二 99%

III型膠原(COL3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 葡聚糖T500正丁 CP,98%N-(3-二氨)烯酰 99%

VI型膠原(COL6)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 葡聚糖T1000正丁 Standard for GC, ≥99.9% (GC)十二  98.0%

I型膠原α2(COL1α2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 葡聚糖T1000正丁 AR,99%十二 CP,95%

II型膠原α1(COL2α1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒葡聚糖T2000正丁 CP,98%十六 90%

III型膠原α1(COL3α1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 葡聚糖T2000正丁 for HPLC,，≥99.7% (GC) 十六 98%

IV型膠原α1(COL4α1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 聚蔗糖70正丁  >99.5%(GC)油 C18：80-90%

VI型膠原α1(COL6α1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 聚蔗糖70正丁  ACS, ≥99.4%十八 90%
U14細胞芐二十六烷化銨芐三化銨

芐三乙化銨草高鐵銨

次亞磷銨化苯三銨

化四庚銨化四戊銨丁二銨