詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:馬特定基因序列PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱:
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,,避免反復(fù)凍融。
公司產(chǎn)品僅用于科研運(yùn)輸:低溫,、避光,,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片,、SNP檢測(cè),、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片,、LncRNA芯片,、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE,、SILAC,、iTRAQ、TMT,、Label-free,、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取,、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot,、Co-ip EMSA,、CHIP、熒光,、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色,、特殊染色、組織切片,、組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS,、LC-MS,、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型,、動(dòng)物模型構(gòu)建
相關(guān)產(chǎn)品:
牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)PCR檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法)
牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)核suan檢測(cè)試劑盒(RT-PCR)
牛病毒性腹瀉病毒1型PCR檢測(cè)試劑盒
牛病毒性腹瀉病毒2型PCR檢測(cè)試劑盒
牛病毒性腹瀉病毒PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,,不加或添加石蠟油,。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min,。
3:PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油;否則,,直接取5-10μl電泳檢測(cè),。
人細(xì)胞毒素(CTX) ELISA試劑盒 Human Aibacterial Peptide LL-37 ELISA Kit
人細(xì)胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA檢測(cè)試劑盒 Human Attacin ELISA Kit
人細(xì)胞凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白(PYCARD)試劑盒ELISAHuman ai-cytomegalovirus(CMV) aibody (IgM)ELISA Kit
人系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)試劑盒elisaHuman ai-cytomegalovirus(CMV)aibody(IgG)ELISA Kit
人系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE) ELISA檢測(cè)試劑盒 Human ai-macrophage aibody ELISA Kit
人硒結(jié)合蛋白1(SELENBP1)檢測(cè)試劑盒elisaHuman Ai-keratin aibody ELISA Kit
人硒蛋白P(SEPP1)ELISA試劑盒Human ai-hepatitis A virus aibody IgM,ai-HAV-IgM ELISA Kit
人硒蛋白1(SEP1)ELISA試劑盒 Human ai-hepatitis A virus aibody IgG,ai-HAV-IgG ELISA Kit
人硒蛋白1(SEP1)ELISA試劑盒Human ai-hepatitis A virus(HAV)aibody ELISA kit
人戊型肝炎病毒抗體(IgM)試劑盒ELISAHuman ai basal ganglia(BG)autoaibody ELISA kit
人戊型肝炎病毒抗體(IgG)ELISA檢測(cè)試劑盒Human ai-Endomysial aibody (EMA)(IgA) ELISA kit
人戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)試劑盒ELISAHuman ai-Endomysial (EMA) aibody (IgG) ELISA kit
人戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)ELISA KitHuman ai-calsequestrin aibody IgG ELISA Kit
人戊型肝炎病毒IgG(HEV-IgG)ELISA試劑盒 Human Ai LH Ab ELISA Kit
馬特定基因序列PCR檢測(cè)試劑盒鳥(niǎo)氨suan脫羧酶(ODC)活性蛋白Active Ornithine Decarboxylase (ODC)
血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)活性蛋白Active Angiotensin I Converting Enzyme (ACE)
鳥(niǎo)氨suan脫羧酶(ODC)活性蛋白Active Ornithine Decarboxylase (ODC)
鈣3(CAPN3)活性蛋白Active Calpain 3 (CAPN3)
胸苷suan合成酶(TYMS)活性蛋白Active Thymidylate Syhetas?
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例),。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,,分別為 7,,6,5,,4,,3,2,。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,,*用帶芯槍頭,下同),。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽(yáng)性對(duì)照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品,。放冰上待用。
4. 換槍頭,,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品,。放冰上待用,。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),,充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用,。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品,。放冰上待用。
二,、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,,本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品,,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,,多出的一個(gè)用作樣品制備陽(yáng)性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管,。
三,、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),,則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),,6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線,。如果做定性分析,,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1 個(gè)用于PCR 陽(yáng)性對(duì)照,。