詳細(xì)介紹
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織,、細(xì)胞,、血液、細(xì)菌等很多材料,,不同的樣本有不同要求,,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息,、物種,、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品,。
4)樣本保存于液氮或干冰,,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA,、RNA樣品進行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析,。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達(dá)差異分析,、基因分型,。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取,、cDNA合成,、qPCR。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù),。
中文名稱 | 牛血吸蟲PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 | Schistosoma bovisPCR |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T |
保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品,。
相關(guān)產(chǎn)品:
布氏岡比亞錐蟲Giardia lambliaAPCR
布氏羅得西亞錐蟲PCR檢測試劑盒Giardia lambliaPCR
布氏羅得西亞錐蟲PCR檢測試劑盒 Giardia spp.PCR
布氏羅得西亞錐蟲探針法熒光定量PCR試劑盒Gongylonema ingluvicolaPCR
布氏旋毛蟲PCR檢測試劑盒Goose Parvoiruvs(GPV)PCR
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備 | 二,、操作步驟 |
1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,,憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計,。因此,,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP,、dGTP,、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,,zui后在72℃ 保溫7min,。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油,;否則,,直接取5-10μl電泳檢測。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,,凍存于-20℃,,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
Sarcoglycan Alpha(SGCa)ELISA Kit小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)試劑盒 ELISA
Carnosine Dipeptidase 2(CNDP2)ELISA Kit小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)試劑盒ELISA
Carnosine Dipeptidase 1(CNDP1)ELISA Kit小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab) ELISA檢測試劑盒
Creatine Transporter(CRT)ELISA Kit小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)試劑盒elisa
Myotilin(MYOT)ELISA Kit小鼠抗酒石suansuan性磷suan酶5b(TRACP-5b)ELISA檢測試劑盒
Myoneurin(MYNN)ELISA Kit小鼠抗酒石suansuan性磷suan酶5b(TRACP-5b)試劑盒elisa
Myosin Heavy Chain 9, Non Muscle(MYH9)ELISA Kit小鼠抗利尿激素/血管加壓素/精氨suan加壓素(ADH/VP/AVP) ELISA檢測試劑盒
Myosin Heavy Chain 7B, Cardiac Muscle Beta(MYH7B)ELISA Kit小鼠抗利尿激素/血管加壓素/精氨suan加壓素(ADH/VP/AVP)試劑盒elisa
Myosin Heavy Chain 11, Smooth Muscle(MYH11)ELISA Kit小鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA檢測試劑盒
Myosin Heavy Chain 10, Non Muscle(MYH10)ELISA Kit小鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)試劑盒elisa
Myosin Light Chain 9, Regulatory(MYL9)ELISA Kit小鼠抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒
Myosin Light Chain 2, Regulatory, Cardiac(MYL2)ELISA Kit小鼠抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)試劑盒elisa
牛血吸蟲PCR檢測試劑盒組織C(CTSC)重組蛋白Recombina Cathepsin C (CTSC)
法尼基二磷suan法尼基轉(zhuǎn)移酶1(FDFT1)重組蛋白Recombina Farnesyl Diphosphate Farnesyltransferase 1 (FDFT1)
環(huán)加氧酶1(COX-1)重組蛋白Recombina Cyclooxygenase 1 (COX-1)
泛素羧基端酯酶L5(UCHL5)重組蛋白Recombina Ubiquitin Carboxyl Terminal Hydrolase L5 (UC?